| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 引言 | 第12-20页 |
| 1.1 花鲈的研究概述 | 第12-13页 |
| 1.2 碱性磷酸酶研究 | 第13-15页 |
| 1.2.1 碱性磷酸酶的结构和分布 | 第14页 |
| 1.2.2 碱性磷酸酶的生理作用 | 第14-15页 |
| 1.3 胃泌素家族及其受体概述 | 第15-19页 |
| 1.3.1 胃泌素结构及其受体概述 | 第16页 |
| 1.3.2 胃泌素内分泌细胞分布 | 第16-17页 |
| 1.3.3 胃泌素功能和调节因素 | 第17-19页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 花鲈基因信息挖掘 | 第20-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第20-21页 |
| 2.1.2 主要生化试剂 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 花鲈基因组DNA和总RNA的提取与检测 | 第21页 |
| 2.2.2 文库制备及质检 | 第21页 |
| 2.2.3 上机测序 | 第21-22页 |
| 2.2.4 基因注释及功能聚类分析 | 第22页 |
| 2.2.5 SSR引物筛选 | 第22-23页 |
| 2.2.6 多态性检测 | 第23页 |
| 2.2.7 数据分析 | 第23-24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-40页 |
| 2.3.1 花鲈基因组denovo测序结果分析 | 第24-27页 |
| 2.3.2 微卫星引物筛选结果 | 第27-28页 |
| 2.3.3 花鲈7个组织转录组数据分析 | 第28-29页 |
| 2.3.4 花鲈七个组织Unigene功能注释与分析 | 第29-40页 |
| 2.3.5 七个组织转录组微卫星统计 | 第40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-42页 |
| 2.4.1 花鲈简化基因组测序的构建及应用 | 第40-41页 |
| 2.4.2 花鲈转录组文库的构建及应用 | 第41-42页 |
| 第三章 花鲈肠道碱性磷酸酶基因表达和功能分析 | 第42-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 3.2.1 Lm-alpi基因鉴定 | 第43-44页 |
| 3.2.2 Lm-alpi生物信息学分析 | 第44页 |
| 3.2.3 免疫组织化学 | 第44页 |
| 3.2.4 质粒构建和转染 | 第44-45页 |
| 3.2.5 基因表达 | 第45-46页 |
| 3.2.6 酶活测定 | 第46页 |
| 3.2.7 数据分析 | 第46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-54页 |
| 3.3.1 Lm-alpi基因鉴定 | 第46-51页 |
| 3.3.2 Lm-alpi免疫定位 | 第51页 |
| 3.3.3 Lm-alpi在胚胎和组织中转录模式 | 第51-52页 |
| 3.3.4 LPS处理后Lm-alpi的动态变化 | 第52-53页 |
| 3.3.5 Lm-alpi对于脱盐反应的动态变化 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-57页 |
| 3.4.1 Alp家族同源性分析 | 第54页 |
| 3.4.2 蛋白序列和Alpi结构 | 第54-55页 |
| 3.4.3 Alpi在消化道中的功能 | 第55-57页 |
| 第四章 花鲈胃泌素的细胞定位和表达 | 第57-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-60页 |
| 4.2.1 RNA提取 | 第57页 |
| 4.2.2 引物设计及扩增 | 第57-58页 |
| 4.2.3 切胶回收 | 第58页 |
| 4.2.4 目的片段与表达载体连接 | 第58-59页 |
| 4.2.5 转化连接产物 | 第59页 |
| 4.2.6 重组质粒的筛选和鉴定 | 第59页 |
| 4.2.7 同源性及聚类分析 | 第59页 |
| 4.2.8 免疫组化 | 第59-60页 |
| 4.3 实验结果 | 第60-66页 |
| 4.3.1 Gas相关基因的分子鉴定与特征 | 第60-66页 |
| 4.3.2 Lm-gas表达蛋白的组织分布 | 第66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-68页 |
| 4.4.1 Lm-gasDNA分子鉴定与特征 | 第66-67页 |
| 4.4.2 Lm-gas细胞表达与定位 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75页 |