| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第12-27页 |
| 1 白斑综合征病毒研究进展 | 第12-16页 |
| 1.1 白斑综合征病毒简介 | 第12页 |
| 1.2 白斑综合征病毒研究概况 | 第12-16页 |
| 1.2.1 白斑综合征病毒的命名、形态学特征 | 第12-15页 |
| 1.2.2 白斑综合征病毒易感宿主及其传播途径 | 第15页 |
| 1.2.3 白斑综合征病毒感染对虾和中华绒螯蟹的症状、组织变化 | 第15-16页 |
| 1.2.4 白斑综合征的增殖过程 | 第16页 |
| 2 自噬的研究进展 | 第16-26页 |
| 2.1 自噬的发现及发展概况 | 第16-17页 |
| 2.2 自噬的分型 | 第17-19页 |
| 2.3 自噬的形成过程 | 第19-20页 |
| 2.4 自噬的调控 | 第20-21页 |
| 2.4.1 依赖mTOR调控途径 | 第20-21页 |
| 2.4.2 不依赖mTOR调控途径 | 第21页 |
| 2.4.3 其他自噬途径 | 第21页 |
| 2.5 自噬检测方法 | 第21-24页 |
| 2.5.1 透射电镜观察自噬体的形态——检测自噬的金标准 | 第21-22页 |
| 2.5.2 基于自噬体LC3和p62的检测 | 第22-23页 |
| 2.5.3 监测“自噬潮(autophagicflux)” | 第23页 |
| 2.5.4 体内自噬 | 第23-24页 |
| 2.6 自噬与病毒感染的关系 | 第24-25页 |
| 2.7 白斑综合征病毒对中华绒螯蟹的致病机制 | 第25-26页 |
| 3 研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 不同宿主白斑综合征病毒(WSSV)的分离及感染 | 第27-38页 |
| 1 材料和方法 | 第27-30页 |
| 1.1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1.1 克氏原螯虾、凡纳滨对虾、中华绒螯蟹以及斑马鱼 | 第27-28页 |
| 1.1.2 试验用斑马鱼 | 第28页 |
| 1.1.3 主要试剂和仪器 | 第28页 |
| 1.2 方法 | 第28-30页 |
| 1.2.1 克氏原螯虾、凡纳滨对虾、中华绒螯蟹以及斑马鱼体内WSSV病毒检测 | 第28页 |
| 1.2.2 PCR反应及产物的电泳检测 | 第28-29页 |
| 1.2.3 病原分离与纯化 | 第29页 |
| 1.2.4 人工感染及半数致死剂量(LD_(50))测试试验 | 第29-30页 |
| 1.2.5 细菌形态特征观察和生理生化鉴定 | 第30页 |
| 1.2.6 细菌16S rRNA基因序列分析 | 第30页 |
| 1.2.7 系统发育树的构建 | 第30页 |
| 1.2.8 WSSV感染斑马鱼 | 第30页 |
| 2 结果 | 第30-36页 |
| 2.1 WSSV感染克氏原螯虾后的主要症状 | 第30页 |
| 2.2 分子生物学检测 | 第30-31页 |
| 2.3 凡纳滨对虾临床主要症状 | 第31-32页 |
| 2.4 细菌的分离和形态观察 | 第32-33页 |
| 2.5 病原菌的生理生化和分子鉴定 | 第33-35页 |
| 2.6 WSSV感染中华绒螯蟹和凡纳滨对虾后症状 | 第35页 |
| 2.7 WSSV感染斑马鱼后症状 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 WSSV感染中华绒螯蟹后组织病理损伤观察 | 第38-47页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| 1.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第38页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第38-39页 |
| 1.2 常用溶液 | 第39页 |
| 1.3 实验方法 | 第39-41页 |
| 1.3.1 WSSV攻毒感染中华绒螯蟹实验 | 第39页 |
| 1.3.2 攻毒后中华绒螯蟹组织病理损伤 | 第39-40页 |
| 1.3.3 模板DNA制备 | 第40页 |
| 1.3.4 病毒引物设计合成 | 第40页 |
| 1.3.5 PCR反应及产物的电泳检测 | 第40-41页 |
| 2 结果 | 第41-45页 |
| 2.1 中华绒螯蟹攻毒感染后症状 | 第41-42页 |
| 2.2 WSSV在中华绒螯蟹体内感染情况 | 第42-43页 |
| 2.3 肝胰腺组织病理观察 | 第43-44页 |
| 2.4 鳃组织病理观察 | 第44页 |
| 2.5 其他组织病理观察 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 WSSV诱导中华绒螯蟹血细胞自噬的初步研究 | 第47-63页 |
| 1 材料和方法 | 第48-54页 |
| 1.1 材料 | 第48-50页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第48页 |
| 1.1.2 主要化学试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 1.1.3 实验用引物 | 第49-50页 |
| 1.2 方法 | 第50-54页 |
| 1.2.1 中华绒螯蟹免疫刺激和血细胞收集 | 第50页 |
| 1.2.2 Western blot | 第50-51页 |
| 1.2.3 血细胞免疫荧光 | 第51-52页 |
| 1.2.4 不同刺激血细胞RNA提取 | 第52页 |
| 1.2.5 cDNA合成 | 第52-53页 |
| 1.2.6 实时荧光定量PCR检测自噬相关基因 | 第53页 |
| 1.2.7 数据分析 | 第53-54页 |
| 2 结果 | 第54-60页 |
| 2.1 WSSV和雷帕霉素对中华绒螯蟹血细胞自噬的激活 | 第54-55页 |
| 2.2 WSSV诱导中华绒螯蟹血细胞自噬 | 第55-58页 |
| 2.3 WSSV诱导血细胞EsGabarap和EsAtg7基因mRNA表达水平的影响 | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 第五章 小结与展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
