| 致谢 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| ·DMRT基因的相关综述 | 第10-17页 |
| ·Dmrt基因的表达 | 第10-13页 |
| ·Dmrt基因的功能 | 第13-17页 |
| ·Dmrt1 | 第13-14页 |
| ·Dmrt2 | 第14-15页 |
| ·Dmrt3 | 第15页 |
| ·Dmrt4 | 第15-16页 |
| ·Dmrt5 | 第16页 |
| ·Dmrt7 | 第16-17页 |
| ·热带爪蟾作为研究模式动物的优势 | 第17-18页 |
| ·本研究的内容、目的和意义 | 第18-21页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第21-36页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·实验模式动物 | 第21页 |
| ·实验有关的试剂盒 | 第21页 |
| ·实验相关试剂 | 第21-22页 |
| ·实验相关溶液的配置 | 第22-25页 |
| ·实验方法 | 第25-36页 |
| ·引物设计 | 第25页 |
| ·爪蟾胚胎的获取 | 第25页 |
| ·胚胎总RNA抽提 | 第25-26页 |
| ·RNA逆转录-第一链cDNA的合成 | 第26页 |
| ·PCR反应体系 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的割胶回收 | 第27页 |
| ·载体连接反应T载体 | 第27-28页 |
| ·E.coli TG1感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·转化 | 第28-29页 |
| ·质粒的抽提 | 第29页 |
| ·酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·探针的制备 | 第30-31页 |
| ·模板的制备 | 第30页 |
| ·探针的合成 | 第30页 |
| ·探针的纯化 | 第30-31页 |
| ·胚胎的整体原位杂交 | 第31-32页 |
| ·原位杂交第一天 | 第31页 |
| ·原位杂交第二天 | 第31-32页 |
| ·原位杂交第三天 | 第32页 |
| ·原位杂家第四天 | 第32页 |
| ·原位杂交第五天 | 第32页 |
| ·石蜡切片 | 第32-34页 |
| ·RNA的合成 | 第34页 |
| ·模板的制备 | 第34页 |
| ·正义RNA的合成 | 第34页 |
| ·RNA纯化 | 第34页 |
| ·胚胎的显微注射 | 第34-36页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第36-63页 |
| ·DMRT5基因的克隆和序列分析 | 第36-39页 |
| ·Dmrt5全长cDNA的克隆 | 第36-37页 |
| ·Dmrt5基因的序列进化树分析及蛋白序列比对 | 第37-39页 |
| ·DMRT5在胚胎的嗅觉系统和端脑中表达 | 第39-43页 |
| ·DMRT5的表达可被RA,FGF,WNT-3A等尾部化信号因子所抑制 | 第43-46页 |
| ·RA信号可抑制Dmrt5基因的表达 | 第43-44页 |
| ·Fgf信号可抑制Dmrt5基因的表达 | 第44-45页 |
| ·Wnt-3a可抑制Dmrt5基因的表达 | 第45-46页 |
| ·嗅觉原基中XEBF2和NEUROGENIN的表达需要DMRT5 | 第46-59页 |
| ·Dmrt5功能获得的研究 | 第46-48页 |
| ·Dmrt5功能获得对Bf1基因的表达基本没有影响 | 第47-48页 |
| ·Dmrt5功能丧失的研究 | 第48-59页 |
| ·Dmrt5显性抑制突变体对Dmrt5基因的敲落 | 第48-52页 |
| ·Dmrt5显性抑制突变体的构建 | 第48-49页 |
| ·Dmrt5显性抑制突变体可以抑制ebf2基因的表达 | 第49-50页 |
| ·Dmrt5显性抑制突变体可以抑制neurogenin基因的表达 | 第50-51页 |
| ·Dmrt5显性抑制突变体对Bf1表达基本没有影响 | 第51-52页 |
| ·MO注射对Dmrt5基因的敲落 | 第52-59页 |
| ·Dmrt5 ATG-MO可以抑制胚胎头部发育 | 第53-55页 |
| ·Dmrt5 ATG-MO可以抑制胚胎neurogenin的表达 | 第55-56页 |
| ·Dmrt5 MOs可以抑制ebf2基因的表达 | 第56-57页 |
| ·Dmrt5 MOs可以抑制neurogenin基因的表达 | 第57-59页 |
| ·DMRT5和DMRT4之间的具有一定的相互调控关系 | 第59-63页 |
| ·显性抑制突变体Dmrt5可以抑制Dmrt4基因的表达 | 第59-60页 |
| ·Dmrt5 MOs可以抑制Dmrt4的表达 | 第60-63页 |
| 第四章 讨论 | 第63-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 作者简历 | 第74页 |
