| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 引言 | 第6-10页 |
| 第一章 fat1基因的密码子优化及载体构建 | 第10-19页 |
| ·实验仪器 | 第10页 |
| ·实验材料与试剂 | 第10页 |
| ·重组质粒p3.1-fat1的构建与结果 | 第10-11页 |
| ·重组质粒p3.1-fat1的构建 | 第10-11页 |
| ·重组质粒p3.1-fat1的构建结果 | 第11页 |
| ·稀有密码子的突变与结果 | 第11-14页 |
| ·稀有密码子的突变 | 第11-13页 |
| ·稀有密码子的突变的引物设计 | 第13页 |
| ·部分密码子突变前后比较 | 第13-14页 |
| ·真核表达载体pEGFPC1-fat1与pEGFPC1-Ofat1的构建与结果 | 第14-16页 |
| ·真核表达载体pEGFPC1-fat1与pEGFPC1-Ofat1的构建 | 第14-16页 |
| ·真核表达载体pEGFPC1-fat1与pEGFPC1-Ofat1的鉴定结果 | 第16页 |
| ·讨论 | 第16-19页 |
| 第二章 fat1基因在小鼠胚胎成纤维细胞内的优化表达 | 第19-33页 |
| ·转染细胞 | 第19页 |
| ·RT-PCR方法检测细胞内外源基因的mRNA丰度 | 第19-21页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·以总RNA为模板的反转录cDNA | 第20-21页 |
| ·反转录PCR | 第21页 |
| ·反转录PCR的实验结果 | 第21页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察基因表达 | 第21-22页 |
| ·转染48h后细胞膜内ω-6PUFAs/ω-3PUFAs比例变化 | 第22-25页 |
| ·转染细胞脂肪酸的提取 | 第22页 |
| ·气相色谱分析脂肪酸含量结果 | 第22-25页 |
| ·MTT检测转染细胞的活性 | 第25-28页 |
| ·细胞单纯加入ω-6 PUFAs作用48h后的MTT实验 | 第25页 |
| ·细胞转染fat1基因与复合加入ω-6 PUFAs作用48h后的MTT实验 | 第25-28页 |
| ·转染48h后检测细胞凋亡 | 第28-31页 |
| ·线粒体膜电位的检测 | 第28-29页 |
| ·Annexin Ⅴ-Alex Fluor488/PI双染法流式细胞仪分析 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-36页 |
| 文献综述 | 第36-49页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 在学期间发表论文 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
