| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩略语 | 第12-16页 |
| 第一部分：急性肝衰竭肝性脑病模型中脑组织氨转运体的表达 | 第16-35页 |
| 1 前言 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-24页 |
| 2.1 材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第17页 |
| 2.1.2 实验药物 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要实验器材 | 第18页 |
| 2.2 动物分组及模型制备 | 第18-19页 |
| 2.3 血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)检测 | 第19页 |
| 2.4 肝组织病理学检查 | 第19页 |
| 2.5 实验动物不同时间点血氨及脑实质氨水平检测 | 第19-20页 |
| 2.5.1 绘制标准曲线 | 第19页 |
| 2.5.2 样本准备 | 第19-20页 |
| 2.5.3 加入反应混合物 | 第20页 |
| 2.5.4 测量 | 第20页 |
| 2.6 应用Western blot方法观察脑组织氨转运体蛋白的表达 | 第20-21页 |
| 2.6.1 脑组织总蛋白提取 | 第20页 |
| 2.6.2 BCA法测脑组织蛋白浓度 | 第20页 |
| 2.6.3 Western blot方法检测脑组织氨转运体蛋白的表达 | 第20-21页 |
| 2.7 逆转录-聚合酶链式反应（reverse transcription PCR，RT-PCR）检测脑组织Rhbg、Rhcg基因m RNA的相对含量 | 第21-23页 |
| 2.7.1 脑组织RNA的提取 | 第21页 |
| 2.7.2 逆转录合成c DNA | 第21-22页 |
| 2.7.3 PCR（三步法） | 第22-23页 |
| 2.7.4 琼脂糖凝胶电泳： | 第23页 |
| 2.8 统计学处理 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-31页 |
| 3.1 各组动物给药后反应及死亡情况 | 第24页 |
| 3.2 血清ALT水平 | 第24-25页 |
| 3.3 肝脏HE染色结果 | 第25-26页 |
| 3.4 各组不同时间点小鼠血氨及脑组织氨水平测定 | 第26-28页 |
| 3.5 脑组织氨转运体蛋白表达情况 | 第28-30页 |
| 3.6 脑组织氨转运体m RNA表达变化 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-34页 |
| 5 结论 | 第34-35页 |
| 第二部分：肿瘤坏死因子-α对脑组织氨转运体表达的影响 | 第35-61页 |
| 1 前言 | 第35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-43页 |
| 2.1 材料 | 第35-36页 |
| 2.1.1 实验动物与细胞 | 第35-36页 |
| 2.1.2 实验药物 | 第36页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第36页 |
| 2.1.4 主要实验器材 | 第36页 |
| 2.2 动物分组及模型制备 | 第36-37页 |
| 2.3 血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)检测 | 第37页 |
| 2.4 血清肿瘤坏死因子-α ( TNF-α )水平测定 | 第37-38页 |
| 2.5 肝组织病理学检查 | 第38页 |
| 2.6 血氨及脑组织氨水平检测 | 第38-39页 |
| 2.6.1 绘制标准曲线 | 第38页 |
| 2.6.2 样本准备 | 第38-39页 |
| 2.6.3 加入反应混合物 | 第39页 |
| 2.6.4 测量 | 第39页 |
| 2.7 TNF-α对人脑微血管内皮细胞中氨转运体表达的影响 | 第39页 |
| 2.8 Western blot方法分析脑组织或HBMEC中氨转运体蛋白的相对表达 | 第39页 |
| 2.8.1 脑组织或HBMEC总蛋白提取 | 第39页 |
| 2.8.2 BCA法测蛋白浓度 | 第39页 |
| 2.8.3 Western blot方法检测脑组织或HBMEC中氨转运体蛋白相对表达 | 第39页 |
| 2.9 逆转录-聚合酶链式反应（reverse transcription PCR，RT-PCR）检测脑组织及HBMEC中Rhbg/Rh BG、Rhcg/Rh CG mRNA的相对含量 | 第39-41页 |
| 2.9.1 脑组织或HBMEC中总RNA的提取 | 第40页 |
| 2.9.2 逆转录合成c DNA | 第40页 |
| 2.9.3 PCR（三步法） | 第40-41页 |
| 2.9.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
| 2.10 免疫组化( Immunohistochemistry, IHC )及免疫荧光法(Immunofluorescent assays, IFA)观察Rhcg蛋白在小鼠脑组织中的表达部位 | 第41-42页 |
| 2.11 统计学处理 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-56页 |
| 3.1 各组动物给药后反应及死亡率情况 | 第43页 |
| 3.2 血清ALT水平 | 第43-44页 |
| 3.3 D-Gal N联合LPS组及对照组血清TNF-α水平 | 第44-45页 |
| 3.4 肝脏HE染色结果 | 第45-46页 |
| 3.5 血氨及脑组织氨水平 | 第46-49页 |
| 3.6 脑组织氨转运体蛋白表达情况 | 第49-51页 |
| 3.7 脑组织或HBMEC中氨转运体m RNA相对表达 | 第51-53页 |
| 3.8 脑组织中氨转运体Rhcg的表达部位 | 第53-56页 |
| 4 讨论 | 第56-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 综述 | 第67-76页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 个人简介 | 第78页 |
