| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 苯丙氨酸解氨酶 | 第14-17页 |
| 1.1.1 L-苯丙氨酸 | 第14-15页 |
| 1.1.2 苯丙氨酸解氨酶 | 第15-17页 |
| 1.2 组氨酸解氨酶 | 第17-19页 |
| 1.2.1 L-组氨酸 | 第17-18页 |
| 1.2.2 组氨酸解氨酶 | 第18-19页 |
| 1.3 结构模拟与分子对接 | 第19-20页 |
| 1.4 课题研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 新型组氨酸解氨酶SbHAL的克隆表达及His-tag蛋白纯化 | 第22-34页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.3.1 通过NCBI寻找可行的片段 | 第22页 |
| 2.3.2 SbHAL片段的扩增 | 第22-24页 |
| 2.3.3 构建pET41-SbHAL重组质粒 | 第24-26页 |
| 2.3.4 重组目的蛋白SbHAL的诱导表达 | 第26页 |
| 2.3.5 SbHAL蛋白的His-tag纯化 | 第26-27页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.4.1 通过NCBI寻找可行的片段 | 第27-28页 |
| 2.4.2 SbHAL片段的扩增 | 第28-29页 |
| 2.4.3 构建pET41-SbHAL重组质粒 | 第29-31页 |
| 2.4.4 重组目的蛋白SbHAL的诱导表达 | 第31-32页 |
| 2.4.5 SbHAL蛋白的His-tag纯化 | 第32-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 SbHAL酶学性质研究、底物特异性研究及分子模拟 | 第34-58页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-45页 |
| 3.3.1 SbHAL最适底物的确定 | 第34-35页 |
| 3.3.2 不同温度对SbHAL活性的影响 | 第35页 |
| 3.3.3 不同pH对SbHAL活性的影响 | 第35页 |
| 3.3.4 金属离子对SbHAL活性的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.5 SbHAL蛋白温度耐受性的测定 | 第36页 |
| 3.3.6 SbHAL蛋白pH耐受性的测定 | 第36页 |
| 3.3.7 SbHAL蛋白酶活力和米氏常数的测定 | 第36-37页 |
| 3.3.8 十种化合物的合成 | 第37-42页 |
| 3.3.9 多种底物检测条件的确定 | 第42-43页 |
| 3.3.10 SbHAL对14种底物的催化活性研究 | 第43-44页 |
| 3.3.11 SbHAL的结构模拟及分子对接 | 第44-45页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第45-56页 |
| 3.4.1 SbHAL最适底物的确定 | 第45-46页 |
| 3.4.2 不同温度对SbHAL活性的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.3 不同pH对SbHAL活性的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.4 金属离子对SbHAL活性的影响 | 第48页 |
| 3.4.5 SbHAL温度耐受性的测定 | 第48-49页 |
| 3.4.6 SbHAL pH耐受性的测定 | 第49页 |
| 3.4.7 SbHAL酶活力和米氏常数的测定 | 第49-51页 |
| 3.4.8 十种化合物的合成 | 第51页 |
| 3.4.9 多种底物检测条件的确定 | 第51-53页 |
| 3.4.10 SbHAL对14种底物的催化活性研究 | 第53-55页 |
| 3.4.11 SbHAL的结构模拟及分子对接 | 第55-56页 |
| 3.5 本章小结 | 第56-58页 |
| 第四章 AvPAL的表达纯化与底物特异性研究 | 第58-68页 |
| 4.1 引言 | 第58页 |
| 4.2 实验仪器与材料 | 第58页 |
| 4.3 实验方法 | 第58-63页 |
| 4.3.1 AvPAL的表达与纯化 | 第58-59页 |
| 4.3.2 多种底物的合成及新反应条件、检测条件的确定 | 第59-60页 |
| 4.3.3 AvPAL底物特异性研究 | 第60-63页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第63-66页 |
| 4.4.1 AvPAL的表达与纯化 | 第63-64页 |
| 4.4.2 多种底物的合成及新反应条件、检测条件的确定 | 第64-65页 |
| 4.4.3 AvPAL底物特异性研究 | 第65-66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-68页 |
| 第五章 总结与展望 | 第68-72页 |
| 5.1 结论 | 第68-70页 |
| 5.1.1 SbHAL的克隆表达与蛋白纯化 | 第68页 |
| 5.1.2 SbHAL的酶学性质研究、底物特异性研究及分子模拟 | 第68-69页 |
| 5.1.3 AvPAL的表达纯化及底物特异性研究 | 第69-70页 |
| 5.2 创新点 | 第70页 |
| 5.3 展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 附录 | 第76-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第86-88页 |
| 作者与导师简介 | 第88-89页 |
| 附件 | 第89-90页 |
