抗除草剂基因对紫花苜蓿遗传转化的研究
| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 主要英文缩略词表 | 第5-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 1 绪论 | 第10-17页 |
| 1.1 引言 | 第10-14页 |
| 1.1.1 除草剂的概况 | 第10-11页 |
| 1.1.2 除草剂的优缺点 | 第11-12页 |
| 1.1.3 草甘膦与草铵膦的作用机理 | 第12页 |
| 1.1.4 草甘膦除草剂研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.5 草铵膦除草剂研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 抗草甘膦除草剂转基因作物研究现状 | 第14页 |
| 1.3 紫花苜蓿遗传转化的方法 | 第14-16页 |
| 1.3.1 农杆菌介导法 | 第14-15页 |
| 1.3.2 基因枪法 | 第15页 |
| 1.3.3 直接转化法 | 第15-16页 |
| 1.3.4 显微注射法 | 第16页 |
| 1.3.5 花粉管通道法 | 第16页 |
| 1.4 本研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-26页 |
| 2.1 实验材料与实验器材 | 第17-19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.2 农杆菌菌株与其携带质粒 | 第17页 |
| 2.1.3 植物培养基 | 第17页 |
| 2.1.4 农杆菌培养基 | 第17-18页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.6 试验仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 外植体的选择 | 第19页 |
| 2.2.2 草铵膦抗性浓度的筛选 | 第19页 |
| 2.2.3 草甘膦抗性浓度的筛选 | 第19页 |
| 2.2.4 农杆菌浓度的确定 | 第19-20页 |
| 2.2.5 最佳共培养时间的选择 | 第20页 |
| 2.2.6 农杆菌菌株的选择 | 第20页 |
| 2.2.7 农杆菌转化与菌种保存 | 第20页 |
| 2.2.8 农杆菌介到转化紫花苜蓿 | 第20-21页 |
| 2.2.9 抗草铵膦转基因植株的筛选 | 第21页 |
| 2.2.10 农杆菌质粒的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.11 紫花苜蓿DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.12 试纸条法检测转基因抗性植株 | 第23页 |
| 2.2.13 转基因公农1号苜蓿的PCR检测 | 第23-25页 |
| 2.2.14 抗草甘膦转基因植株的筛选 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-35页 |
| 3.1 外植体的选择 | 第26页 |
| 3.2 草铵膦筛选浓度的确定 | 第26-27页 |
| 3.3 草甘膦抗性浓度的确定 | 第27-29页 |
| 3.4 农杆菌菌株对转化的影响 | 第29页 |
| 3.5 农杆菌菌液浓度对转化的影响 | 第29-30页 |
| 3.6 共培养时间对转化的影响 | 第30-31页 |
| 3.7 转基因紫花苜蓿的PCR检测 | 第31-33页 |
| 3.7.1 bar基因PCR鉴定结果 | 第31-32页 |
| 3.7.2 CP4-EPSPS基因PCR鉴定结果 | 第32-33页 |
| 3.8 转基因紫花紫花苜蓿试纸条检测 | 第33页 |
| 3.9 转基因紫花苜蓿的草甘膦抗性鉴定 | 第33-35页 |
| 4 讨论与结论 | 第35-38页 |
| 4.1 讨论 | 第35-36页 |
| 4.2 结论 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 致谢 | 第41页 |
