摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
符号说明 | 第15-16页 |
第1章 绪论 | 第16-26页 |
1.1 长链非编码RNA概述 | 第16-20页 |
1.1.1 长链非编码RNA | 第16-18页 |
1.1.2 肝癌与长链非编码RNA | 第18-20页 |
1.2 前人相关研究概述 | 第20-22页 |
1.3 课题研究背景与研究意义 | 第22-23页 |
1.4 课题研究内容 | 第23-26页 |
第2章 TMEM75在肝癌发生发展中的生物学功能研究 | 第26-64页 |
2.1 前言 | 第26页 |
2.2 实验材料 | 第26-30页 |
2.2.1 细胞株和裸鼠 | 第26页 |
2.2.2 实验试剂 | 第26-28页 |
2.2.3 实验仪器与设备 | 第28-29页 |
2.2.4 实验相关溶液配制 | 第29-30页 |
2.3 实验方法 | 第30-44页 |
2.3.1 细胞培养相关操作 | 第30-33页 |
2.3.2 提取细胞总RNA | 第33-34页 |
2.3.3 RNA逆转录 | 第34-35页 |
2.3.4 Quantitative Real-time PCR | 第35页 |
2.3.5 细菌实验相关操作 | 第35-38页 |
2.3.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第38页 |
2.3.7 台盼蓝染色细胞计数实验 | 第38-39页 |
2.3.8 细胞克隆形成实验 | 第39页 |
2.3.9 细胞划痕愈合实验 | 第39-40页 |
2.3.10 transwell实验 | 第40-41页 |
2.3.11 细胞周期实验 | 第41-42页 |
2.3.12 细胞凋亡实验 | 第42-43页 |
2.3.13 组织RNA提取 | 第43页 |
2.3.14 裸鼠移植瘤实验 | 第43-44页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第44-64页 |
2.4.1 在肝癌组织以及对应的癌旁组织中检测lncRNA-TMEM75的表达情况 | 第44-45页 |
2.4.2 检测敲低TMEM75后对细胞增殖能力的影响 | 第45-49页 |
2.4.3 检测敲低TMEM75后对细胞侵袭能力的影响 | 第49-51页 |
2.4.4 检测过表达TMEM75后对细胞增殖能力的影响 | 第51-55页 |
2.4.5 检测过表达TMEM75后对细胞侵袭能力的影响 | 第55-57页 |
2.4.6 裸鼠移植瘤实验检测TMEM75对于体内肿瘤生长的影响 | 第57-61页 |
2.4.7 讨论 | 第61-64页 |
第3章 TMEM75在肝癌发生发展中的分子机制研究 | 第64-100页 |
3.1 前言 | 第64页 |
3.2 实验材料 | 第64-67页 |
3.2.1 实验试剂 | 第64-66页 |
3.2.2 实验仪器与设备 | 第66页 |
3.2.3 实验相关溶液配制 | 第66-67页 |
3.3 实验方法 | 第67-81页 |
3.3.1 细胞核质分离实验 | 第67-68页 |
3.3.2 染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第68-70页 |
3.3.3 RNA免疫共沉淀实验(RIP) | 第70-73页 |
3.3.4 Western Blot实验 | 第73-76页 |
3.3.5 RNA pulldown实验 | 第76-80页 |
3.3.6 基因表达谱芯片分析 | 第80-81页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第81-100页 |
3.4.1 TMEM75与PVT1的表达相关性研究 | 第81-84页 |
3.4.2 TMEM75参与调控PVT1表达的分子机制研究 | 第84-90页 |
3.4.3 寻找TMEM75与PVT1所共同调控的下游靶基因 | 第90-93页 |
3.4.4 检测敲低OGFR后对细胞增殖能力的影响 | 第93-96页 |
3.4.5 检测敲低OGFR后对细胞侵袭能力的影响 | 第96-98页 |
3.4.6 讨论 | 第98-100页 |
第4章 课题的结论与展望 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-108页 |
附录 | 第108-116页 |
1.1 附图 | 第108-113页 |
1.2 附表 | 第113-116页 |
致谢 | 第116-118页 |
研究成果及发表论文 | 第118-120页 |
导师及作者简介 | 第120-122页 |
附件 | 第122-123页 |