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LANA通过let-7a/RBPJ信号通路抑制KSHV的裂解复制

致谢第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
英文缩略表第10-13页
1 前言第13-19页
    1.1 KS的流行病学第13页
    1.2 KS组织发生第13-14页
    1.3 KSHV第14页
    1.4 KSHV编码的相关蛋白第14-16页
        1.4.1 ORF73/LANA第15页
        1.4.2 ORF72/v-Cyclin第15页
        1.4.3 病毒复制与转录激活因子(RTA)第15-16页
        1.4.4 KSHV编码的G蛋白偶联受体(vGPCR)第16页
    1.5 MIRNA的简介第16-18页
        1.5.1 Let-7的简介第17-18页
    1.6 RBPJ、LANA、LET-7A之间的关系第18-19页
2 实验材料与仪器第19-22页
    2.1 材料、试剂和主要仪器第19-22页
        2.1.1 细胞株第19页
        2.1.2 细胞培养基第19页
        2.1.3 试剂和试剂盒第19页
        2.1.4 主要仪器设备第19-20页
        2.1.5 常用试剂的配制第20页
        2.1.6 qPCR引物第20-22页
3 实验方法和步骤第22-29页
    3.1 293 T、ISLK.219细胞第22页
    3.2 细胞培养第22-23页
    3.3 DOX母液配制第23页
    3.4 KSHV病毒的浓缩制取第23页
    3.5 质粒转化、扩增和转染第23-26页
        3.5.1 质粒DNA的转化第23页
        3.5.2 质粒扩增及抽提第23-24页
        3.5.3 细胞瞬时转染第24页
        3.5.4 实时荧光定量第24-26页
    3.6 WESTERNBLOT检测LANA、LIN28B、NF-ΚB、RBPJ的蛋白水平第26-27页
    3.7 萤光素酶活性测定第27页
    3.8 细胞内和细胞外KSHV基因组的分离和定量第27页
    3.9 NORTHERN-BLOTS第27-28页
    3.10 统计学分析第28-29页
4 结果第29-43页
    4.1 LANA上调LET-7A和PRI-LET-7AFD水平的同时下调RBPJ的表达水平第29-31页
    4.2 LANA通过下调NF-ΚB和LIN28B来上调LET-7A第31-33页
    4.3 LANA通过增加NICD诱导PRI-LET-7AFD的转录水平第33-35页
    4.4 LET-7A直接抑制RBPJ的表达第35-36页
    4.5 过表达LET-7A成剂量依赖性抑制KSHV的裂解再激活第36-38页
    4.6 过表达LET-7A成时间依赖性抑制KSHV的裂解再激活第38-39页
    4.7 敲低RBPJ成剂量依赖性抑制KSHV的裂解再激活第39-41页
    4.8 敲低RBPJ成时间依赖性抑制KSHV的裂解再激活第41-43页
5 讨论第43-46页
6 结论第46-47页
参考文献第47-52页
中文综述第52-60页
    参考文献第58-60页
作者简介第60页

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