| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 1 引言 | 第14-16页 |
| 2 试剂与设备 | 第16-22页 |
| 2.1 主要试剂 | 第16页 |
| 2.2 仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.3 主要溶剂配制 | 第17-22页 |
| 3 实验方法 | 第22-34页 |
| 3.1 大数据分析 | 第22页 |
| 3.2 感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| 3.2.1 试剂配制 | 第22-23页 |
| 3.2.2 制备方法 | 第23页 |
| 3.3 质粒的转化及提取 | 第23页 |
| 3.4 细胞培养及转染 | 第23-24页 |
| 3.4.1 细胞培养 | 第23-24页 |
| 3.4.2 细胞瞬时转染 | 第24页 |
| 3.4.3 构建稳定株 | 第24页 |
| 3.5 RNA提取及逆转录 | 第24-25页 |
| 3.6 RT-PCR | 第25-26页 |
| 3.7 总蛋白的提取及BCA测蛋白浓度 | 第26-27页 |
| 3.8 免疫印迹杂交 | 第27-28页 |
| 3.8.1 SDS-PAGE凝胶的配制 | 第27页 |
| 3.8.2 蛋白电泳 | 第27-28页 |
| 3.8.3 蛋白印迹 | 第28页 |
| 3.9 MTS检测细胞增殖 | 第28页 |
| 3.10 EDU检测细胞增殖 | 第28-29页 |
| 3.11 Tunel检测细胞凋亡 | 第29-30页 |
| 3.12 Transwell检测细胞迁移能力 | 第30页 |
| 3.13 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第30页 |
| 3.14 Invasion检测细胞侵袭能力 | 第30页 |
| 3.15 平板克隆 | 第30-31页 |
| 3.16 软琼脂集落形成 | 第31页 |
| 3.17 裸鼠成瘤实验 | 第31-32页 |
| 3.18 HE染色 | 第32页 |
| 3.19 免疫组化染色 | 第32-34页 |
| 4 结果 | 第34-52页 |
| 4.1 ProteinAtlas数据库分析结果 | 第34-36页 |
| 4.2 成功构建PCNP过表达及沉默的人神经母细胞瘤细胞株 | 第36-37页 |
| 4.3 PCNP抑制NB细胞生长 | 第37-39页 |
| 4.4 PCNP减弱细胞克隆形成能力 | 第39页 |
| 4.5 PCNP抑制人NB细胞迁移和侵袭 | 第39-42页 |
| 4.6 PCNP促进人NB细胞凋亡 | 第42-45页 |
| 4.7 PCNP过表达及沉默调控MAPK信号通路 | 第45-46页 |
| 4.8 PCNP过表达及沉默调控PI3K/AKT/mTOR信号通路 | 第46-47页 |
| 4.9 PCNP过表达降低人NB细胞成瘤率 | 第47-49页 |
| 4.10 PCNP过表达降低Ki67和CD31阳性率 | 第49-52页 |
| 5 讨论 | 第52-58页 |
| 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 综述 | 第66-78页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 在读期间参加的学术会议及研究成果 | 第80-82页 |
