| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 1 材料、实验试剂与仪器 | 第14-22页 |
| 1.1 实验材料 | 第14-15页 |
| 1.2 试剂的配制 | 第15-20页 |
| 1.3 仪器 | 第20-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-34页 |
| 2.1 小鼠肺癌模型的建立 | 第22页 |
| 2.2 小鼠肺组织蛋白质组iTRAQ定量分析 | 第22页 |
| 2.3 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.4 组织包埋及石蜡切片 | 第23页 |
| 2.5 HE染色 | 第23页 |
| 2.6 免疫组化 | 第23-24页 |
| 2.7 质粒提取 | 第24页 |
| 2.8 脂质体转染 | 第24-25页 |
| 2.9 细胞药物浓度梯度实验 | 第25页 |
| 2.10 稳定株的筛选 | 第25页 |
| 2.11 亚克隆 | 第25页 |
| 2.12 RNA提取和RT-PCR | 第25-26页 |
| 2.13 组织蛋白的提取 | 第26-27页 |
| 2.14 细胞蛋白的提取 | 第27页 |
| 2.15 蛋白定量 | 第27页 |
| 2.16 免疫印迹 | 第27-28页 |
| 2.17 免疫荧光 | 第28-29页 |
| 2.18 软琼脂克隆形成实验 | 第29页 |
| 2.19 平板克隆实验 | 第29-30页 |
| 2.20 黏附实验 | 第30页 |
| 2.21 划痕实验 | 第30页 |
| 2.22 Transwell实验 | 第30-31页 |
| 2.23 核质分离实验 | 第31页 |
| 2.24 流式细胞术检测凋亡 | 第31-32页 |
| 2.25 Incucyte活细胞成像及功能分析实验 | 第32页 |
| 2.26 裸鼠荷瘤实验 | 第32-33页 |
| 2.27 统计学分析 | 第33-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-50页 |
| 3.1 小鼠肺癌模型的建立 | 第34-35页 |
| 3.2 肺腺癌建模鼠早期肺癌组织的iTRAQ定量蛋白质组分析 | 第35-36页 |
| 3.3 肺腺癌建模鼠不同病理时期肺组织中Destrin表达变化特点 | 第36-37页 |
| 3.4 Destrin高表达与肺腺癌肝转移密切相关 | 第37-38页 |
| 3.5 临床肺腺癌组织中Destrin表达的组织芯片分析 | 第38-39页 |
| 3.6 肺腺癌患者Destrin高表达与肿瘤的临床分期和淋巴结转移状态密切相关 | 第39页 |
| 3.7 Destrin高表达是影响肺腺癌预后的重要危险因素 | 第39-41页 |
| 3.8 Destrin影响肺腺癌发展和转移的机制研究 | 第41-45页 |
| 3.8.1 Destrin低表达肺腺癌细胞株的筛选 | 第41页 |
| 3.8.2 Destrin沉默对A549细胞增殖、迁移和黏附的影响 | 第41-43页 |
| 3.8.3 Destrin沉默使A549细胞呈间质上皮样转化 | 第43-44页 |
| 3.8.4 Destrin沉默对A549细胞中actin组装的影响 | 第44页 |
| 3.8.5 Destrin沉默对A549细胞黏着斑形成的影响 | 第44-45页 |
| 3.8.6 Destrin沉默影响A549细胞中β-catenin的定位和表达 | 第45页 |
| 3.9 Destrin沉默对A549裸鼠荷瘤实验的影响 | 第45-46页 |
| 3.10 Destrin沉默后可显著提高A549细胞对经典抗肿瘤药物顺铂的致凋亡敏感性,同时可显著抑制EGF对肿瘤细胞的生长刺激作用 | 第46-50页 |
| 讨论 | 第50-54页 |
| 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 综述 | 第58-70页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 在读期间参加的学术会议及研究成果 | 第72-73页 |
