| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第9-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 肿瘤的发展及治疗 | 第13-14页 |
| 1.2 肿瘤基因疫苗 | 第14-16页 |
| 1.2.1 肿瘤基因疫苗概述 | 第14-15页 |
| 1.2.2 肿瘤基因疫苗的分类 | 第15-16页 |
| 1.3 影响肿瘤基因疫苗效果的因素 | 第16-21页 |
| 1.3.1 肿瘤抗原 | 第16-18页 |
| 1.3.2 疫苗载体 | 第18页 |
| 1.3.3 分子佐剂 | 第18-19页 |
| 1.3.4 DC靶向性 | 第19-21页 |
| 1.4 痘病毒载体概述 | 第21-24页 |
| 1.4.1 痘病毒及其分类 | 第21页 |
| 1.4.2 痘病毒载体的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4.3 痘病毒安哥拉株(MVA) | 第22-24页 |
| 1.5 prime-boost免疫策略 | 第24-25页 |
| 1.6 立题依据与实验设计 | 第25-27页 |
| 1.6.1 立题依据 | 第25-26页 |
| 1.6.2 实验设计 | 第26-27页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第27-45页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第27-33页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.2 试剂 | 第28-32页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-45页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第33-34页 |
| 2.2.2 MVA-sPD1/MS的制备 | 第34-39页 |
| 2.2.3 动物肿瘤模型的建立 | 第39-40页 |
| 2.2.3.1 稳定表达人源MUC1及Survivin的黑色素瘤细胞系的筛选及鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.3.2 稳定表达人源MUC1及Survivin的黑色素瘤小鼠模型的建立 | 第40页 |
| 2.2.4 小鼠免疫效果评价 | 第40-43页 |
| 2.2.5 MVA-sPD1/MS的抑瘤率实验 | 第43-44页 |
| 2.2.6 统计学处理方法 | 第44-45页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第45-79页 |
| 3.1 MVA-sPD1/MS的制备 | 第45-54页 |
| 3.1.0 重组表达载体pSC11M1-sPD1/MS构建 | 第45-49页 |
| 3.1.1 质粒转染真核细胞蛋白表达检测 | 第49-50页 |
| 3.1.2 MVA-sPD1/MS的重组 | 第50页 |
| 3.1.3 MVA-sPD1/MS的筛选及扩增 | 第50-52页 |
| 3.1.4 MVA-sPD1/MS滴度检测 | 第52-53页 |
| 3.1.5 MVA-sPD1/MS表达 | 第53-54页 |
| 3.1.6 小结 | 第54页 |
| 3.2 动物肿瘤模型的建立 | 第54-59页 |
| 3.2.1 稳定表达细胞系RFP-MS~+ B16的筛选及鉴定 | 第54-56页 |
| 3.2.2 稳定表达人源MUC1及Survivin的黑色素瘤小鼠模型的建立 | 第56-59页 |
| 3.2.3 小结 | 第59页 |
| 3.3 MVA-sPD1/MS的抗肿瘤效果评价 | 第59-64页 |
| 3.3.1 小鼠免疫实验设计 | 第59-60页 |
| 3.3.2 MVA-sPD1/MS抑制肿瘤生长的作用 | 第60-61页 |
| 3.3.3 细胞免疫—CTL体外杀伤检测 | 第61页 |
| 3.3.4 细胞免疫--Elispot检测T细胞分泌IFN-γ的水平 | 第61-62页 |
| 3.3.5 体液免疫--ELISA检测血清中抗体情况 | 第62-63页 |
| 3.3.6 小结 | 第63-64页 |
| 3.4 MVA-sPD1/MS与DNA疫苗联合使用的免疫原性研究 | 第64-70页 |
| 3.4.1 联合疫苗小鼠免疫实验设计 | 第64-65页 |
| 3.4.2 细胞免疫—CTL体外杀伤检测 | 第65页 |
| 3.4.3 细胞免疫--Elispot检测T细胞分泌IFN-γ水平 | 第65-66页 |
| 3.4.4 体液免疫--ELISA检测血清中抗体情况 | 第66-67页 |
| 3.4.5 脾细胞分泌细胞因子检测 | 第67-69页 |
| 3.4.6 mRNA水平细胞因子检测 | 第69-70页 |
| 3.4.7 小结 | 第70页 |
| 3.5 MVA-sPD1/MS与DNA疫苗联合使用的抗肿瘤活性研究 | 第70-77页 |
| 3.5.0 小鼠实验设计 | 第71页 |
| 3.5.1 联合使用疫苗对黑色素瘤小鼠的抑瘤作用 | 第71-72页 |
| 3.5.2 细胞免疫--Elispot检测T细胞分泌IFN-γ水平 | 第72-73页 |
| 3.5.3 体液免疫--ELISA检测血清中抗体情况 | 第73-75页 |
| 3.5.4 mRNA水平细胞因子检测 | 第75-76页 |
| 3.5.5 小结 | 第76-77页 |
| 3.6 讨论 | 第77-79页 |
| 第4章 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
