| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 达托霉素 | 第10-12页 |
| 1.1.1 达托霉素的发现及其作用机制 | 第10-11页 |
| 1.1.2 达托霉素的生物合成 | 第11-12页 |
| 1.1.3 其它脂肽类抗生素—Arylomycin | 第12页 |
| 1.2 转录调控家族基因的研究 | 第12-20页 |
| 1.2.1 链霉菌抗生素生物合成的调控机制 | 第12-13页 |
| 1.2.2 全局性调控基因的研究 | 第13-20页 |
| 1.3 基因敲除技术的应用 | 第20-21页 |
| 1.4 立题依据 | 第21-23页 |
| 第2章 tfpA、arpA、afpA转录调控基因对A21978C合成的影响 | 第23-49页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要溶液及培养基配制 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 各家族转录调控基因的选择 | 第26-27页 |
| 2.2.2 链霉菌HCCB10043基因组DNA提取 | 第27页 |
| 2.2.3 PCR扩增反应 | 第27-28页 |
| 2.2.4 DNA凝胶回收纯化 | 第28页 |
| 2.2.5 DNA片段与载体连接 | 第28页 |
| 2.2.6 质粒提取与酶切反应 | 第28-29页 |
| 2.2.7 E.coli DH5α的化学转化 | 第29页 |
| 2.2.8 ET12567/pUZ8002感受态制备与电转化 | 第29页 |
| 2.2.9 大肠杆菌-链霉菌间接合转移 | 第29-30页 |
| 2.2.10 基因敲除突变株、回补突变株与过表达突变株的筛选与验证 | 第30页 |
| 2.2.11 链霉菌HCCB10043及相关突变株的培养与发酵 | 第30-31页 |
| 2.2.12 发酵液处理与目标产物的检测 | 第31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-47页 |
| 2.3.1 链霉菌HCCB10043基因组DNA提取 | 第31-32页 |
| 2.3.2 tfpA转录调控基因对A21978C合成的影响 | 第32-36页 |
| 2.3.3 arpA转录调控基因对A21978C合成的影响 | 第36-40页 |
| 2.3.4 afpA转录调控基因对A21978C合成的影响 | 第40-44页 |
| 2.3.5 tfpA、afpA在A9中基因缺失突变株与arpA在A9中过表达突变株的构建及HPLC分析 | 第44-47页 |
| 2.4 本章小结 | 第47-49页 |
| 第3章 dgkA、mfpA、asnC、lfpA调控相关基因A21978C合成的影响 | 第49-75页 |
| 3.1 材料 | 第49-50页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第49-50页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 3.2 方法 | 第50-52页 |
| 3.2.1 Overlap PCR反应 | 第50-51页 |
| 3.2.2 载体去磷酸化 | 第51页 |
| 3.2.3 链霉菌HCCB10043、△tfpA及△mfpA突变株总RNA提取 | 第51-52页 |
| 3.2.4 RT-PCR分析 | 第52页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第52-73页 |
| 3.3.1 dgkA转录调控基因对A21978C合成的影响 | 第52-56页 |
| 3.3.2 mfpA转录调控基因对A21978C合成的影响 | 第56-60页 |
| 3.3.3 asnC转录调控基因对A21978C合成的影响 | 第60-64页 |
| 3.3.4 lfpA转录调控基因对A21978C合成的影响 | 第64-67页 |
| 3.3.5 dgkA、mfpA、asnC及lfpA在A9中基因缺失突变株的构建及其发酵液分析 | 第67-71页 |
| 3.3.6 HCCB10043、△tfpA突变株及△mfpA突变株RT-PCR分析 | 第71-73页 |
| 3.4 本章小结 | 第73-75页 |
| 全文总结与展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 攻读学位期间发表的论文(专利) | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 附录 | 第84-87页 |
