致谢 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略词表 | 第12-16页 |
第一章 引言 | 第16-32页 |
1.1 隐花色素的发现 | 第16-17页 |
1.2 隐花色素的分子结构 | 第17-18页 |
1.3 隐花色素的亚细胞定位 | 第18-19页 |
1.4 隐花色素的信号传导路径 | 第19-21页 |
1.4.1 COP1/SPA路径 | 第20页 |
1.4.2 CIB路径 | 第20页 |
1.4.3 PIF路径 | 第20-21页 |
1.4.4 BIC1路径 | 第21页 |
1.5 隐花色素与植物激素之间的相互作用 | 第21-23页 |
1.5.1 隐花色素与生长素 | 第21-22页 |
1.5.2 隐花色素与赤霉素 | 第22页 |
1.5.3 隐花色素与细胞分裂素 | 第22-23页 |
1.5.4 隐花色素与油菜素内酯 | 第23页 |
1.5.5 隐花色素与其他激素 | 第23页 |
1.6 隐花色素的生理功能 | 第23-29页 |
1.6.1 调节种子休眠及发芽 | 第24页 |
1.6.2 促进幼苗的去黄化 | 第24-25页 |
1.6.3 隐花色素在开花中的作用 | 第25-26页 |
1.6.4 隐花色素在气孔开度和发育中的作用 | 第26-27页 |
1.6.5 隐花色素其他的生理作用 | 第27-28页 |
1.6.6 隐花色素在其他植物中的功能 | 第28-29页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第29-32页 |
第二章 番茄CRY1a基因过表达植株的构建 | 第32-44页 |
2.1 材料与方法 | 第32-40页 |
2.1.1 实验材料 | 第32-33页 |
2.1.2 CRY1a过表达载体构建 | 第33-36页 |
2.1.3 番茄的遗传转化 | 第36-39页 |
2.1.4 转基因阳性植株的检测 | 第39-40页 |
2.1.4.1 番茄转基因植株DNA的提取及PCR检测 | 第39页 |
2.1.4.2 PCR阳性植株总蛋白的提取及Western Blot检测 | 第39-40页 |
2.1.4.3 总RNA提取和基因表达分析 | 第40页 |
2.2 结果与分析 | 第40-43页 |
2.2.1 番茄CRY1a基因的克隆与过表达载体的构建 | 第40-42页 |
2.2.2 番茄CRY1a过表达载体的遗传转化 | 第42页 |
2.2.3 番茄CRY1a基因过表达株系的鉴定 | 第42-43页 |
2.3 讨论 | 第43-44页 |
第三章 番茄CRY1a调控植株生长发育 | 第44-65页 |
3.1 植物材料与方法 | 第46-49页 |
3.1.1 植物材料与处理 | 第46页 |
3.1.2 叶绿素及总类胡萝卜素提取 | 第46-47页 |
3.1.3 光合气体交换参数测定 | 第47页 |
3.1.4 表型鉴定 | 第47页 |
3.1.5 叶面积测定与叶片结构观察 | 第47页 |
3.1.6 植物激素检测 | 第47-48页 |
3.1.7 流式细胞术测细胞核DNA | 第48-49页 |
3.1.8 转录组测序及数据分析 | 第49页 |
3.1.9 总RNA提取及荧光定量PCR | 第49页 |
3.2 结果与分析 | 第49-62页 |
3.2.1 CRY1a基因对番茄叶片发育及地上部生物量积累的作用 | 第49-51页 |
3.2.2 CRY1a基因对番茄叶片基因转录组水平的影响 | 第51-56页 |
3.2.3 CRY1a基因对番茄叶片细胞增殖的影响 | 第56-58页 |
3.2.4 CRY1a基因改变叶片中内源激素的平衡 | 第58-59页 |
3.2.5 CRY1a基因影响激素代谢及信号途径相关基因的转录 | 第59-62页 |
3.3 讨论 | 第62-65页 |
第四章 番茄CRY1a调控植株侧枝形成 | 第65-77页 |
4.1 材料与方法 | 第67页 |
4.1.1 植物材料与处理 | 第67页 |
4.1.2 总RNA提取及荧光定量PCR | 第67页 |
4.1.3 激素提取与检测 | 第67页 |
4.1.4 侧芽长度和数量统计 | 第67页 |
4.2 结果与分析 | 第67-75页 |
4.2.1 CRY1a促进番茄侧枝形成 | 第67-69页 |
4.2.2 侧芽中BRC1基因表达 | 第69页 |
4.2.3 顶芽中激素含量 | 第69-70页 |
4.2.4 节间激素含量变化 | 第70-71页 |
4.2.5 茎节处激素含量 | 第71-73页 |
4.2.6 根系中独脚金内酯含量及相关基因表达量 | 第73-75页 |
4.3 讨论 | 第75-77页 |
第五章 番茄CRY1a调控花青素的合成 | 第77-99页 |
5.1 材料与方法 | 第80-83页 |
5.1.1 实验材料 | 第80页 |
5.1.2 病毒诱导的基因沉默(VIGS)载体构建和病毒侵染 | 第80-81页 |
5.1.2.1 VIGS载体构建 | 第80页 |
5.1.2.2 农杆菌介导的病毒侵染 | 第80-81页 |
5.1.3 花青素提取与检测 | 第81页 |
5.1.4 FRAP方法检测总抗氧化能力 | 第81页 |
5.1.5 总RNA提取与qRT-PCR | 第81页 |
5.1.6 植物总蛋白提取及Western杂交分析 | 第81-82页 |
5.1.7 氧化蛋白检测 | 第82页 |
5.1.8 蛋白原核表达及EMSA分析 | 第82-83页 |
5.1.9 ChIP分析 | 第83页 |
5.2 结果与分析 | 第83-96页 |
5.2.1 CRY1a促进番茄叶片花青素的积累并提高其抗氧化能力 | 第83-86页 |
5.2.2 CRY1a提高番茄叶片花青素生物合成相关基因的转录水平 | 第86-87页 |
5.2.3 CRY1a对番茄叶片花青素积累的促进作用依赖于蓝光 | 第87-88页 |
5.2.4 蓝光下CRY1a对番茄叶片花青素合成基因转录水平的影响 | 第88页 |
5.2.5 蓝光对SlHY5、SlCOP1转录及SlHY5蛋白积累的影响 | 第88-91页 |
5.2.6 SlHY5和SlCOP1影响蓝光下花青素积累及其合成基因的表达 | 第91页 |
5.2.7 SlHY5能直接结合番茄花青素合成基因的启动子 | 第91-94页 |
5.2.8 CRY1a过表达植株中沉默SlHY5减少了其在蓝光下花青素的积累 | 第94-96页 |
5.3 讨论 | 第96-99页 |
第六章 番茄CRY1a影响果实产量及品质 | 第99-106页 |
6.1 材料与方法 | 第100-102页 |
6.1.1 植物材料与处理 | 第100页 |
6.1.2 果实成熟时间及产量统计 | 第100页 |
6.1.3 果实可溶性固形物含量的测定 | 第100页 |
6.1.4 果实可溶性糖及有机酸含量的测定 | 第100-101页 |
6.1.5 果实类胡萝卜素含量的测定 | 第101-102页 |
6.2 结果与分析 | 第102-104页 |
6.2.1 CRY1a影响番茄果实色泽、大小及单株产量 | 第102-103页 |
6.2.2 改善果实品质 | 第103-104页 |
6.3 讨论 | 第104-106页 |
第七章 总结 | 第106-109页 |
参考文献 | 第109-122页 |
附图 | 第122-126页 |
附表1 | 第126-130页 |