| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第10-17页 |
| 1 启动子 | 第10-12页 |
| 2 GUS基因 | 第12页 |
| 3 酪氨酸降解途径 | 第12-13页 |
| 4 酪氨酸降解途径缺陷 | 第13-15页 |
| 4.1 动物降解缺陷 | 第13-14页 |
| 4.2 植物降解缺陷 | 第14-15页 |
| 4.3 拟南芥酪氨酸降解途径突变体 | 第15页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 AtHGO基因启动子与GUS融合表达载体的构建与转化 | 第17-29页 |
| 1 材料与方法 | 第17-24页 |
| 1.1 试验材料 | 第17页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第17页 |
| 1.3 试验方法 | 第17-24页 |
| 1.3.1 拟南芥基因组DNA的提取 | 第17-18页 |
| 1.3.2 AtHGO基因启动子分析 | 第18页 |
| 1.3.3 AtHGO基因启动子序列的扩增 | 第18-19页 |
| 1.3.4 PCR产物回收 | 第19页 |
| 1.3.5 质粒pC1301的获得 | 第19页 |
| 1.3.6 质粒pC1301的线性化与回收 | 第19-20页 |
| 1.3.7 大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第20页 |
| 1.3.8 载体与目的基因的重组 | 第20页 |
| 1.3.9 pAtHGO重组载体热激法转化 | 第20-21页 |
| 1.3.10 大肠杆菌菌落PCR | 第21页 |
| 1.3.11 pAtHGO重组质粒的获得 | 第21页 |
| 1.3.12 农杆菌GV3101感受态制备 | 第21-22页 |
| 1.3.13 农杆菌的电击法转化 | 第22页 |
| 1.3.14 重组载体质粒PCR检测 | 第22页 |
| 1.3.15 拟南芥幼苗的培养 | 第22-23页 |
| 1.3.16 农杆菌的培养 | 第23页 |
| 1.3.17 转化菌液的制备 | 第23页 |
| 1.3.18 拟南芥的遗传转化 | 第23页 |
| 1.3.19 T1代拟南芥转化植株筛选 | 第23-24页 |
| 1.3.20 T1代抗性苗PCR检测 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-27页 |
| 2.1 AtHGO基因启动子的序列分析 | 第24页 |
| 2.2 AtHGO基因启动子与GUS融合表达载体的构建与鉴定 | 第24-26页 |
| 2.3 农杆菌转化后的重组载体PCR检测 | 第26页 |
| 2.4 转基因植株的筛选 | 第26-27页 |
| 2.5 转基因植株PCR鉴定 | 第27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 OsHGO基因启动子与GUS融合表达载体的构建与转化 | 第29-40页 |
| 1 材料与方法 | 第29-36页 |
| 1.1 试验材料 | 第29页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第29页 |
| 1.3 试验方法 | 第29-36页 |
| 1.3.1 水稻的生长 | 第29-30页 |
| 1.3.2 水稻基因组DNA的提取 | 第30页 |
| 1.3.3 OsHGO基因启动子分析 | 第30页 |
| 1.3.4 OsHGO基因启动子序列克隆 | 第30-31页 |
| 1.3.5 PCR产物回收 | 第31页 |
| 1.3.6 质粒pC1301的获得 | 第31页 |
| 1.3.7 质粒pC1301和OsHGO序列的酶切与回收 | 第31-32页 |
| 1.3.8 大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第32页 |
| 1.3.9 酶切产物的连接 | 第32页 |
| 1.3.10 pOsHGO重组载体热激法转化 | 第32-33页 |
| 1.3.11 大肠杆菌菌落PCR | 第33页 |
| 1.3.12 pOsHGO重组质粒的获得 | 第33页 |
| 1.3.13 农杆菌GV3101感受态制备 | 第33-34页 |
| 1.3.14 农杆菌的电击法转化 | 第34页 |
| 1.3.15 重组载体质粒PCR检测 | 第34页 |
| 1.3.16 拟南芥幼苗的培养 | 第34页 |
| 1.3.17 农杆菌的培养 | 第34-35页 |
| 1.3.18 转化菌液的制备 | 第35页 |
| 1.3.19 拟南芥的遗传转化 | 第35页 |
| 1.3.20 T1代拟南芥转化植株筛选 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-39页 |
| 2.1 OsHGO启动子序列的分析 | 第36页 |
| 2.2 OsHGO基因启动子与GUS融合表达载体的构建与鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3 农杆菌转化后的重组载体PCR检测 | 第37-38页 |
| 2.4 转基因植株的筛选 | 第38页 |
| 2.5 转基因植株PCR鉴定 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 AtHGO/OsHGO基因启动子驱动的GUS在拟南芥中的表达分析 | 第40-45页 |
| 1 材料与方法 | 第40-41页 |
| 1.1 试验材料 | 第40页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第40页 |
| 1.3 试验方法 | 第40-41页 |
| 1.3.1 GUS染色植株的生长 | 第40页 |
| 1.3.2 转基因植株GUS染色分析 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-43页 |
| 2.1 AtHGO启动子驱使GUS在拟南芥不同时期的表达 | 第41-42页 |
| 2.2 OsHGO启动子驱使GUS在拟南芥不同时期的表达 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 结论与展望 | 第45-46页 |
| 1 本文的主要结论 | 第45页 |
| 2 本文的主要创新点 | 第45页 |
| 3 展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
