| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| 1.1 植物体内蛋氨酸的代谢调控 | 第14-16页 |
| 1.1.1 植物体内蛋氨酸合成与代谢 | 第14-15页 |
| 1.1.2 CGS的表达调控 | 第15-16页 |
| 1.2 提高植物体内蛋氨酸含量的方法及进展 | 第16-22页 |
| 1.2.1 蛋氨酸合成代谢通路的调控 | 第16-19页 |
| 1.2.2 储藏蛋白编码基因的调控 | 第19-21页 |
| 1.2.3 蛋氨酸代谢调控编码基因与富含蛋氨酸的储藏蛋白编码基因的聚合 | 第21-22页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 杂交创制共表达At DCGS和 β-Zein基因的大豆材料 | 第23-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 种植条件 | 第23页 |
| 2.2.2 杂交方法 | 第23-24页 |
| 2.2.3 转基因大豆材料除草剂筛选 | 第24页 |
| 2.2.4 大豆基因组DNA提取 | 第24-25页 |
| 2.2.5 目的基因PCR检测 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-29页 |
| 2.3.1 杂交亲本及子代统计 | 第26页 |
| 2.3.2 除草剂筛选及试纸条检测结果 | 第26-28页 |
| 2.3.3 PCR检测结果 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 双价表达载体转化创制共表达At DCGS和 β-Zein基因的大豆材料 | 第30-44页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-38页 |
| 3.2.1 液体及固体培养基配制 | 第30-31页 |
| 3.2.2 菌落培养及菌液PCR | 第31-32页 |
| 3.2.3 质粒提取 | 第32-33页 |
| 3.2.4 双价表达载体的构建 | 第33-35页 |
| 3.2.5 冻融法转化大肠杆菌 | 第35页 |
| 3.2.6 制备农杆菌EHA101感受态细胞 | 第35页 |
| 3.2.7 EHA101农杆菌电击转化 | 第35-36页 |
| 3.2.8 转基因大豆全株的转化与鉴定 | 第36-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-43页 |
| 3.3.1 表达载体构建 | 第38-41页 |
| 3.3.2 转基因材料的鉴定与筛选 | 第41-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 共表达At DCGS和 β-Zein基因的大豆材料的筛选、加代及品质鉴定 | 第44-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-51页 |
| 4.2.1 Southern blot与基因组整合鉴定 | 第44-47页 |
| 4.2.2 RNA提取与转录水平检测 | 第47-49页 |
| 4.2.3 SDS-PAGE蛋白水平检测 | 第49-50页 |
| 4.2.4 氨基酸含量检测 | 第50-51页 |
| 4.2.5 总蛋白及脂肪含量检测 | 第51页 |
| 4.3 结果与分析 | 第51-57页 |
| 4.3.1 Southern blot检测 | 第51-53页 |
| 4.3.2 转录水平检测 | 第53-54页 |
| 4.3.3 SDS-PAGE检测 | 第54页 |
| 4.3.4 蛋氨酸含量检测 | 第54-56页 |
| 4.3.5 游离氨基酸含量检测 | 第56页 |
| 4.3.6 总蛋白及脂肪含量的检测 | 第56-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-60页 |
| 4.4.1 基因工程手段提高大豆蛋氨酸含量 | 第57-58页 |
| 4.4.2 大豆蛋氨酸含量的提高对其它相关氨基酸的影响 | 第58-60页 |
| 第五章 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简历 | 第72页 |
