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美国白蛾核型多角体病毒检测方法的建立及ORF72基因的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 引言第11-21页
    1.1 杆状病毒概况第11-13页
        1.1.1 杆状病毒简介第11页
        1.1.2 杆状病毒的分类第11-12页
        1.1.3 杆状病毒的应用概况第12-13页
    1.2 美国白蛾第13-15页
        1.2.1 美国白蛾生物学特性第13页
        1.2.2 美国白蛾的发生与危害第13-14页
        1.2.3 美国白蛾的防治概况第14-15页
    1.3 美国白蛾核型多角体病毒第15-19页
        1.3.1 美国白蛾核型多角体病毒简介及其应用第15-16页
        1.3.2 美国白蛾核型多角体病毒的检测第16-17页
        1.3.3 美国白蛾核型多角体病毒基因的研究第17-19页
    1.4 研究目的与意义、内容及技术路线第19-21页
        1.4.1 研究目的与意义第19页
        1.4.2 主要研究内容第19页
        1.4.3 技术路线第19-21页
2 材料与方法第21-33页
    2.1 材料第21-22页
        2.1.1 供试虫源第21页
        2.1.2 仪器与设备第21页
        2.1.3 试剂及缓冲液的配置第21-22页
    2.2 方法第22-33页
        2.2.1 HycuNPV Taq Man探针法荧光定量PCR检测方法的建立第22-24页
        2.2.2 HycuNPV ORF72基因的研究第24-33页
3 结果与分析第33-48页
    3.1 HycuNPV Taq Man探针法荧光定量PCR检测方法的建立第33-36页
        3.1.1 HycuNPV polh基因的扩增第33页
        3.1.2 标准品质粒的制备第33页
        3.1.3 标准曲线与扩增曲线的绘制第33-34页
        3.1.4 重复性验证第34-35页
        3.1.5 不同时间点幼虫体内病毒含量第35-36页
    3.2 HycuNPV ORF72基因的研究第36-48页
        3.2.1 HycuNPV基因组DNA的提取第36页
        3.2.2 HycuNPV ORF72基因的扩增第36页
        3.2.3 ORF72基因的生物信息学分析第36-42页
        3.2.4 限制性内切酶对ORF72基因和pGEX-4T-1 载体质粒的双酶切第42页
        3.2.5 HycuNPV-p GEX-4T1ORF72重组质粒表达载体的构建第42-43页
        3.2.6 HycuNPV-p GEX-4T1ORF72原核表达载体的诱导表达第43-46页
        3.2.7 ORF72蛋白可溶性表达的鉴定及其蛋白的纯化第46-48页
4 结论与讨论第48-50页
    4.1 结论第48页
    4.2 讨论第48-50页
        4.2.1 探针法荧光定量PCR检测方法的建立第48-49页
        4.2.2 ORF72蛋白的诱导表达分析第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-56页
作者简介第56页

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