摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 引言 | 第11-21页 |
1.1 杆状病毒概况 | 第11-13页 |
1.1.1 杆状病毒简介 | 第11页 |
1.1.2 杆状病毒的分类 | 第11-12页 |
1.1.3 杆状病毒的应用概况 | 第12-13页 |
1.2 美国白蛾 | 第13-15页 |
1.2.1 美国白蛾生物学特性 | 第13页 |
1.2.2 美国白蛾的发生与危害 | 第13-14页 |
1.2.3 美国白蛾的防治概况 | 第14-15页 |
1.3 美国白蛾核型多角体病毒 | 第15-19页 |
1.3.1 美国白蛾核型多角体病毒简介及其应用 | 第15-16页 |
1.3.2 美国白蛾核型多角体病毒的检测 | 第16-17页 |
1.3.3 美国白蛾核型多角体病毒基因的研究 | 第17-19页 |
1.4 研究目的与意义、内容及技术路线 | 第19-21页 |
1.4.1 研究目的与意义 | 第19页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第19页 |
1.4.3 技术路线 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 供试虫源 | 第21页 |
2.1.2 仪器与设备 | 第21页 |
2.1.3 试剂及缓冲液的配置 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-33页 |
2.2.1 HycuNPV Taq Man探针法荧光定量PCR检测方法的建立 | 第22-24页 |
2.2.2 HycuNPV ORF72基因的研究 | 第24-33页 |
3 结果与分析 | 第33-48页 |
3.1 HycuNPV Taq Man探针法荧光定量PCR检测方法的建立 | 第33-36页 |
3.1.1 HycuNPV polh基因的扩增 | 第33页 |
3.1.2 标准品质粒的制备 | 第33页 |
3.1.3 标准曲线与扩增曲线的绘制 | 第33-34页 |
3.1.4 重复性验证 | 第34-35页 |
3.1.5 不同时间点幼虫体内病毒含量 | 第35-36页 |
3.2 HycuNPV ORF72基因的研究 | 第36-48页 |
3.2.1 HycuNPV基因组DNA的提取 | 第36页 |
3.2.2 HycuNPV ORF72基因的扩增 | 第36页 |
3.2.3 ORF72基因的生物信息学分析 | 第36-42页 |
3.2.4 限制性内切酶对ORF72基因和pGEX-4T-1 载体质粒的双酶切 | 第42页 |
3.2.5 HycuNPV-p GEX-4T1ORF72重组质粒表达载体的构建 | 第42-43页 |
3.2.6 HycuNPV-p GEX-4T1ORF72原核表达载体的诱导表达 | 第43-46页 |
3.2.7 ORF72蛋白可溶性表达的鉴定及其蛋白的纯化 | 第46-48页 |
4 结论与讨论 | 第48-50页 |
4.1 结论 | 第48页 |
4.2 讨论 | 第48-50页 |
4.2.1 探针法荧光定量PCR检测方法的建立 | 第48-49页 |
4.2.2 ORF72蛋白的诱导表达分析 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
作者简介 | 第56页 |