| 摘要 | 第2-3页 |
| abstract | 第3页 |
| 引言 | 第6-10页 |
| 第一章 荧光假单胞菌SOD基因的克隆及表达载体的构建 | 第10-22页 |
| 1.1 材料与方法 | 第10-11页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第10页 |
| 1.1.2 试剂 | 第10页 |
| 1.1.3 主要实验仪器 | 第10-11页 |
| 1.1.4 主要溶液和培养基配制 | 第11页 |
| 1.2 实验方法 | 第11-16页 |
| 1.2.1 荧光假单胞菌基因组提取 | 第11页 |
| 1.2.2 荧光假单胞菌SOD基因扩增 | 第11-12页 |
| 1.2.3 PCR产物胶回收 | 第12-13页 |
| 1.2.4 重组载体的构建 | 第13页 |
| 1.2.5 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和质粒转化 | 第13-14页 |
| 1.2.6 重组质粒的转化 | 第14页 |
| 1.2.7 重组质粒双酶切验证 | 第14页 |
| 1.2.8 PCR产物序列分析 | 第14-15页 |
| 1.2.9 重组表达载体pET-15b-SOD的构建 | 第15-16页 |
| 1.3 结果与分析 | 第16-22页 |
| 1.3.1 荧光假单胞菌SOD的扩增 | 第16页 |
| 1.3.2 重组质粒的双酶切验证 | 第16-17页 |
| 1.3.3 序列分析 | 第17-20页 |
| 1.3.4 重组表达载体pET-15b-SOD的构建 | 第20-21页 |
| 1.3.5 重组表达载体pET-15b-SOD的双酶切鉴定与工程菌株的菌落PCR鉴定 | 第21-22页 |
| 第二章 SOD的表达、纯化及性质研究 | 第22-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-23页 |
| 2.1.1 菌株与载体 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要溶液和培养基及其配制 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 重组表达载体pET-15b-SOD的诱导表达 | 第23-24页 |
| 2.2.2 重组表达载体pET-15b-SOD的诱导表达鉴定 | 第24页 |
| 2.2.3 包涵体的分离与洗涤 | 第24页 |
| 2.2.4 亲和层析纯化重组蛋白 | 第24-25页 |
| 2.2.5 SOD酶活的测定 | 第25-26页 |
| 2.2.6 表达SOD的大肠杆菌对百草枯的耐受性影响 | 第26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-32页 |
| 2.3.1 SOD基因在大肠杆菌中的诱导表达鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.2 包涵体的分离与洗涤 | 第27页 |
| 2.3.3 亲和层析纯化重组蛋白 | 第27-28页 |
| 2.3.4 SOD的最适温度 | 第28-29页 |
| 2.3.5 SOD热稳定性 | 第29页 |
| 2.3.6 SOD的最适pH值 | 第29-30页 |
| 2.3.7 SOD的pH稳定性 | 第30-31页 |
| 2.3.8 表达重组SOD的大肠杆菌对百草枯的耐受性 | 第31-32页 |
| 全文总结和讨论 | 第32-35页 |
| 展望 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 综述 | 第39-50页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
