摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
中英缩略词表 | 第9-10页 |
第1章 前言 | 第10-11页 |
第2章 材料 | 第11-15页 |
2.1 标本采集及随访 | 第11页 |
2.2 肝癌细胞株 | 第11页 |
2.3 主要试剂和耗材 | 第11-12页 |
2.4 试剂配制 | 第12-13页 |
2.5 主要的设备仪器 | 第13-15页 |
第3章 方法 | 第15-25页 |
3.1 免疫组化 | 第15-16页 |
3.2 细胞培养 | 第16-17页 |
3.2.1 细胞传代 | 第16页 |
3.2.2 细胞冻存 | 第16页 |
3.2.3 细胞复苏 | 第16-17页 |
3.3 WesternBlot检测各细胞系中KIFC1蛋白的表达 | 第17-20页 |
3.3.1 细胞总蛋白提取 | 第17页 |
3.3.2 BCA法蛋白定量 | 第17-18页 |
3.3.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第18-19页 |
3.3.4 转膜 | 第19页 |
3.3.5 抗体孵育 | 第19-20页 |
3.3.6 蛋白检测 | 第20页 |
3.4 KIFC1-SmallinterferingRNA(KIFC1-siRNA)转染 | 第20-21页 |
3.4.1 KIFC1-siRNA的构建 | 第20页 |
3.4.2 细胞转染HCC-LM3和SMMC-7721肝癌细胞株 | 第20-21页 |
3.5 KIFC1-siRNA转染后对肝癌细胞株增殖能力的影响 | 第21-22页 |
3.6 KIFC1-siRNA转染后对肝癌细胞株周期的影响 | 第22页 |
3.7 KIFC1-siRNA转染后对肝癌细胞株凋亡的影响 | 第22-23页 |
3.8 KIFC1-siRNA转染后对肝癌细胞株迁移能力的影响 | 第23页 |
3.9 KIFC1-siRNA转染后对肝癌细胞株侵袭能力的影响 | 第23页 |
3.10 WesternBlot检测KIFC1-siRNA转染后相关蛋白的表达 | 第23-24页 |
3.10.1 凋亡相关蛋白的检测 | 第23-24页 |
3.10.2 迁移侵袭相关蛋白的检测 | 第24页 |
3.11 从GEPIA[28]数据库中挖掘相关数据 | 第24页 |
3.12 统计学分析 | 第24-25页 |
第4章 结果 | 第25-39页 |
4.1 KIFC1在HCC组织中高表达且其表达水平与患者临床病理因素及不良预后密切相关 | 第25-31页 |
4.1.1 KIFC1在HCC组织中高表达 | 第25-26页 |
4.1.2 KIFC1的表达与HCC患者临床病理的关系 | 第26-28页 |
4.1.3 KIFC1表达与HCC患者预后的关系 | 第28-31页 |
4.2 KIFC1在肝癌细胞株及正常肝细胞中的表达 | 第31-32页 |
4.3 干扰 HCC-LM3 和 SMMC-7721 细胞 KIFC1 后,其 m RNA 及蛋白表达下降 | 第32-33页 |
4.4 干扰HCC-LM3和SMMC-7721细胞KIFC1后,细胞活力下降 | 第33页 |
4.5 干扰HCC-LM3和SMMC-7721细胞KIFC1后,细胞凋亡率增加 | 第33-35页 |
4.6 干扰HCC-LM3和SMMC-7721细胞KIFC1后,细胞周期无明显改变 | 第35-36页 |
4.7 干扰HCC-LM3和SMMC-7721细胞KIFC1后,细胞迁移侵袭能力降低 | 第36-39页 |
第5章 讨论 | 第39-41页 |
第6章 结论与展望 | 第41-42页 |
6.1 结论 | 第41页 |
6.2 展望 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
综述 | 第47-54页 |
参考文献 | 第52-54页 |