| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第11-13页 |
| 第2章 材料 | 第13-17页 |
| 2.1 乳腺癌组织芯片 | 第13页 |
| 2.2 细胞系 | 第13页 |
| 2.3 主要试剂与耗材 | 第13-14页 |
| 2.4 主要实验试剂配制 | 第14-15页 |
| 2.5 主要设备仪器 | 第15-17页 |
| 第3章 方法 | 第17-32页 |
| 3.1 免疫组化 | 第17-18页 |
| 3.2 细胞培养 | 第18-19页 |
| 3.2.1 细胞传代 | 第18-19页 |
| 3.2.2 细胞冻存 | 第19页 |
| 3.2.3 细胞复苏 | 第19页 |
| 3.3 WesternBlot | 第19-22页 |
| 3.3.1 细胞总蛋白提取 | 第19-20页 |
| 3.3.2 蛋白含量的测定 | 第20页 |
| 3.3.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第20-21页 |
| 3.3.4 转膜 | 第21-22页 |
| 3.3.5 封闭 | 第22页 |
| 3.3.6 抗体孵育 | 第22页 |
| 3.3.7 化学发光及图像采集 | 第22页 |
| 3.4 qRT-PCR | 第22-24页 |
| 3.4.1 总RNA提取 | 第22-23页 |
| 3.4.2 逆转录 | 第23页 |
| 3.4.3 RealtimePCR反应 | 第23-24页 |
| 3.5 过表达质粒构建 | 第24-27页 |
| 3.6 Crispr/cas9系统构建 | 第27-28页 |
| 3.7 慢病毒包装与细胞感染 | 第28-29页 |
| 3.7.1 制备病毒液(以PCDH-puro-flag为例) | 第28-29页 |
| 3.7.2 细胞感染与筛选 | 第29页 |
| 3.8 体外功能实验 | 第29-31页 |
| 3.8.1 细胞增殖 | 第29页 |
| 3.8.2 Transwell空穿实验 | 第29-30页 |
| 3.8.3 细胞划痕实验 | 第30-31页 |
| 3.9 统计学分析 | 第31-32页 |
| 第4章 结果 | 第32-45页 |
| 4.1 TP53I11在乳腺癌组织芯片中表达情况及其与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系 | 第32-37页 |
| 4.1.1 乳腺癌组织芯片及患者基本情况 | 第32-33页 |
| 4.1.2 TP53I11表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系 | 第33-35页 |
| 4.1.3 TP53I11表达水平与乳腺癌患者生存时间的关系 | 第35页 |
| 4.1.4 无病生存期(DFS)影响因素的分析 | 第35-37页 |
| 4.2 TP53I11在乳腺癌细胞系中功能的初步研究 | 第37-45页 |
| 4.2.1 选择实验用乳腺癌细胞株 | 第37-38页 |
| 4.2.2 稳定TP53I11过表达及敲除细胞感染成功鉴定 | 第38-39页 |
| 4.2.3 TP53I11能够抑制乳腺癌细胞增殖能力 | 第39-40页 |
| 4.2.4 TP53I11能够抑制乳腺癌细胞迁移转移能力 | 第40-43页 |
| 4.2.5 Westernblot检测肿瘤迁移转移相关基因的表达及作用机制的初步探索 | 第43-45页 |
| 第5章 讨论 | 第45-48页 |
| 第6章 结论与展望 | 第48-49页 |
| 6.1 结论 | 第48页 |
| 6.2 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第53-54页 |
| 综述 | 第54-61页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
