| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-17页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 研究背景 | 第11-16页 |
| 1.2.1 microRNA生物学功能简述 | 第11-12页 |
| 1.2.2 植物突变体材料创制策略 | 第12-15页 |
| 1.2.3 miRNA398研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 立题依据 | 第16页 |
| 1.4 研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 工程菌株 | 第17页 |
| 2.2 实验试剂 | 第17-18页 |
| 2.3 实验仪器 | 第18页 |
| 2.4 实验方法 | 第18-34页 |
| 2.4.1 水稻CRISPR-Cas9骨架载体 | 第18-19页 |
| 2.4.2 OsMIR398单基因Cas9敲除载体构建 | 第19-24页 |
| 2.4.3 OsMIR398双基因Cas9敲除载体构建 | 第24-25页 |
| 2.4.4 OsMIR398过表达载体构建 | 第25-27页 |
| 2.4.5 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第27-28页 |
| 2.4.6 水稻再生植株阳性检测 | 第28-30页 |
| 2.4.7 水稻T0代突变体检测 | 第30-32页 |
| 2.4.8 水稻T1代突变体检测 | 第32页 |
| 2.4.9 盐胁迫实验探究 | 第32-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-50页 |
| 3.1 CRISPR-Cas9敲除突变载体构建 | 第34-37页 |
| 3.1.1 OsMIR398单基因Cas9敲除载体构建 | 第34-35页 |
| 3.1.2 OsMIR398双基因Cas9敲除载体构建 | 第35-36页 |
| 3.1.3 OsMIR398过表达载体构建 | 第36-37页 |
| 3.2 水稻再生苗转基因阳性鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3 水稻T0代突变体检测 | 第38-44页 |
| 3.3.1 OsMIR398单基因Cas9敲除突变体检测 | 第38-40页 |
| 3.3.2 OsMIR398双基因Cas9敲除突变体检测 | 第40-42页 |
| 3.3.3 T0代突变效率统计 | 第42-44页 |
| 3.4 水稻T1代突变体检测 | 第44-48页 |
| 3.4.1 T1代植株Cas9核酸酶载体检测 | 第44页 |
| 3.4.2 T1代植株突变体检测 | 第44-46页 |
| 3.4.3 水稻T1代植株突变类型统计 | 第46-48页 |
| 3.5 OsMIR398定向修饰及过表达水稻盐胁迫响应分析 | 第48-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 攻硕期间取得的研究成果 | 第59页 |
