| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 绪论 | 第16-22页 |
| 参考文献 | 第19-22页 |
| 第一章 与人工关节假体无菌性松动密切相关的蛋白因子的系统综述和筛选 | 第22-70页 |
| 1.1 引言 | 第22页 |
| 1.2 方法 | 第22-33页 |
| 1.2.1 文献筛选方法和选择标准 | 第22-23页 |
| 1.2.2 纳入标准和排除标准 | 第23页 |
| 1.2.3 数据提取 | 第23-24页 |
| 1.2.4 研究质量的评价 | 第24页 |
| 1.2.5 数据分析 | 第24-33页 |
| 1.3 结果 | 第33-63页 |
| 1.3.1 纳入研究的筛选流程 | 第33页 |
| 1.3.2 纳入研究的特征及质量评价 | 第33-35页 |
| 1.3.3 和无菌性松动相关的主要生物标记物的证据综合分析 | 第35-63页 |
| 1.4 讨论 | 第63-65页 |
| 1.5 本章结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 第二章 三种假体的人工髋关节置换术后中期随访结果的比较 | 第70-93页 |
| 2.1 引言 | 第70页 |
| 2.2 研究内容与方法 | 第70-72页 |
| 2.3 结果 | 第72-84页 |
| 2.4 讨论 | 第84-88页 |
| 2.5 本章结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-93页 |
| 第三章 应用多项生物标记物诊断人工髋关节早期假体无菌性松动的研究 | 第93-129页 |
| 3.1 引言 | 第93页 |
| 3.2 资料与方法 | 第93-106页 |
| 3.2.1 一般资料 | 第93-94页 |
| 3.2.2 生物标记物检测分析 | 第94-105页 |
| 3.2.2.1 OPG用人快速ELISA试剂盒检测 | 第95-96页 |
| 3.2.2.2 RANKL用Milliplex人单复合型ELISA试剂盒检测 | 第96-98页 |
| 3.2.2.3 NTX用人三明治ELISA试剂盒检测 | 第98-100页 |
| 3.2.2.4 PICP用人三明治ELISA试剂盒检测 | 第100-101页 |
| 3.2.2.5 TNF-α用人三明治ELISA试剂盒检测 | 第101-103页 |
| 3.2.2.6 IL-1β 用人三明治ELISA试剂盒检测 | 第103-105页 |
| 3.2.3 统计分析 | 第105-106页 |
| 3.3 结果 | 第106-121页 |
| 3.3.1 患者和健康人血浆生物标记物水平 | 第106-107页 |
| 3.3.2 血浆生物标记物水平与不同人工髋关节假体界面和材料的相关性 | 第107页 |
| 3.3.3 生物标记物水平与骨水泥的相关性 | 第107-108页 |
| 3.3.4 患者各项指标与血浆IL-1β水平的年龄差异 | 第108页 |
| 3.3.5 诊断学表现 | 第108页 |
| 3.3.6 六项生物标记物的联合分析 | 第108-121页 |
| 3.4 讨论 | 第121-125页 |
| 3.5 本章结论 | 第125页 |
| 参考文献 | 第125-129页 |
| 第四章 慢病毒介导的白介素1受体拮抗蛋白基因在小鼠骨髓间充质干细胞体外表达的研究 | 第129-171页 |
| 4.1 引言 | 第129页 |
| 4.2 材料与方法 | 第129-151页 |
| 4.2.1 实验动物，试剂，仪器及细胞 | 第129-134页 |
| 4.2.2 IL-1Ra基因c DNA重组表达载体构建 | 第134-140页 |
| 4.2.2.1 小鼠Total RNA提取及c DNA制备 | 第134-135页 |
| 4.2.2.2 PCR扩增目的基因 | 第135页 |
| 4.2.2.3 PCR扩增IL-1Ra c DNA | 第135-136页 |
| 4.2.2.4 IL-1Ra基因重组载体构建(克隆构建) | 第136-140页 |
| 4.2.3 c DNA表达载体性能验证 | 第140-145页 |
| 4.2.3.1 经测序正确的c DNA重组表达载体进行去内毒素质粒DNA抽提 | 第140-141页 |
| 4.2.3.2 慢病毒包装细胞(293TN)系培养 | 第141页 |
| 4.2.3.3 共转染实验 | 第141-142页 |
| 4.2.3.4 使用Real Time-PCR的方法检测转染后293细胞中目的基因表达 | 第142-143页 |
| 4.2.3.5 Western blot检测转染前后293细胞中IL-1Ra蛋白含量 | 第143-145页 |
| 4.2.4 Lv-IL-1Ra重组慢病毒颗粒的包装和生产, 病毒收集 | 第145-147页 |
| 4.2.4.1 病毒包装 | 第145-146页 |
| 4.2.4.2 病毒滴度测定 | 第146-147页 |
| 4.2.5 小鼠BMSC培养 | 第147-148页 |
| 4.2.6 小鼠BMSC的慢病毒感染实验 | 第148-151页 |
| 4.2.6.1 慢病毒感染BMSC细胞最佳MOI值的确定 | 第148-149页 |
| 4.2.6.2 根据最佳MOI值，进行小鼠BMSC的重组病毒颗粒感染实验 | 第149页 |
| 4.2.6.3 基因干预后细胞活性检测 | 第149-150页 |
| 4.2.6.4 细胞增殖能力测定 | 第150-151页 |
| 4.2.6.5 收集细胞样品，进行Real Time-PCR | 第151页 |
| 4.2.6.6 感染后细胞中蛋白含量的检测 | 第151页 |
| 4.2.7 统计分析 | 第151页 |
| 4.3 结果 | 第151-163页 |
| 4.3.1 PCR扩增目的片段 | 第151-152页 |
| 4.3.2 阳性克隆筛选结果 | 第152-153页 |
| 4.3.3 测序结果 | 第153-156页 |
| 4.3.4 小鼠BMSC原代细胞分离培养结果 | 第156页 |
| 4.3.5 最佳MOI值计算 | 第156-157页 |
| 4.3.6 小鼠BMSC转染Lv.IL-1Ra/cop GFP的效率 | 第157-158页 |
| 4.3.7 细胞活性检测结果 | 第158-159页 |
| 4.3.8 细胞增殖能力测定结果 | 第159-160页 |
| 4.3.9 RT-q PCR检测结果 | 第160-162页 |
| 4.3.10 Western blot检测结果 | 第162-163页 |
| 4.4 讨论 | 第163-167页 |
| 4.5 本章结论 | 第167页 |
| 参考文献 | 第167-171页 |
| 全文总结 | 第171-173页 |
| 附录 | 第173-175页 |
| 致谢 | 第175-176页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第176-177页 |
