摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第14-25页 |
1.1 研究背景 | 第14页 |
1.2 葡萄再生途径 | 第14-16页 |
1.2.1 器官再生途径 | 第14-15页 |
1.2.2 体细胞胚再生途径 | 第15-16页 |
1.3 影响葡萄体细胞胚发生的因素 | 第16-18页 |
1.3.1 基因型对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第16-17页 |
1.3.2 外植体对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第17页 |
1.3.3 培养基组成对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第17-18页 |
1.3.4 葡萄体细胞胚性保持 | 第18页 |
1.4 葡萄基因工程研究进展 | 第18-22页 |
1.4.1 基因工程原理 | 第18-19页 |
1.4.2 农杆菌转化葡萄影响因素 | 第19-21页 |
1.4.3 葡萄基因工程发展趋势 | 第21-22页 |
1.5 畸形胚发生现象 | 第22-23页 |
1.6 葡萄芪合成酶功能以及基因工程概述 | 第23页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 葡萄体细胞胚再生途径建立 | 第25-42页 |
2.1 材料和试剂 | 第25页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
2.1.3 主要仪器 | 第25页 |
2.2 方法 | 第25-29页 |
2.2.1 外植体采集与消毒 | 第25-26页 |
2.2.2 胚性愈伤组织的诱导 | 第26页 |
2.2.3 体细胞胚诱导 | 第26-27页 |
2.2.4 葡萄原胚团(PEM)扩繁 | 第27页 |
2.2.5 二次胚再生体系的建立 | 第27-28页 |
2.2.6 葡萄体细胞胚萌发和成苗 | 第28-29页 |
2.2.7 葡萄温室炼苗 | 第29页 |
2.2.8 数据统计分析 | 第29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-39页 |
2.3.1 葡萄花器官采集以及茎尖扩繁 | 第29-30页 |
2.3.2 外植体消毒方法优化 | 第30-31页 |
2.3.3 外植体和培养基类型对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第31-32页 |
2.3.4 最佳体细胞胚诱导培养基筛选 | 第32-33页 |
2.3.5 葡萄液体悬浮培养增殖原胚团(PEM) | 第33-35页 |
2.3.6 影响葡萄二次体细胞胚再生的因素 | 第35-36页 |
2.3.7 蔗糖浓度对体细胞胚萌发的影响 | 第36-37页 |
2.3.8 BAP 浓度对于体细胞胚成苗的影响 | 第37-38页 |
2.3.9 葡萄体细胞胚再生以及保持 | 第38-39页 |
2.4 讨论 | 第39-40页 |
2.5 小结 | 第40-42页 |
第三章 葡萄畸形胚控制与利用 | 第42-49页 |
3.1 材料和试剂 | 第42页 |
3.1.1 植物材料 | 第42页 |
3.1.2 主要试剂 | 第42页 |
3.1.3 主要仪器 | 第42页 |
3.2 方法 | 第42-44页 |
3.2.1 基本培养基对畸形胚形成的影响 | 第42-43页 |
3.2.2 BAP 对畸形胚形成的影响 | 第43页 |
3.2.3 蔗糖浓度对畸形胚形成的影响 | 第43页 |
3.2.4 各种畸形胚对成苗率的影响 | 第43页 |
3.2.5 畸形胚再利用 | 第43页 |
3.2.6 组织化学染色观察 | 第43页 |
3.2.7 数据统计分析 | 第43-44页 |
3.3 结果与分析 | 第44-47页 |
3.3.1 畸形体细胞胚观察 | 第44页 |
3.3.2 体细胞胚成苗结果研究 | 第44-45页 |
3.3.3 基本培养基类型对体细胞胚萌发时形态的影响 | 第45页 |
3.3.4 BAP 浓度对体细胞胚萌发时形态的影响 | 第45-46页 |
3.3.5 蔗糖对胚萌发时形态的影响 | 第46页 |
3.3.6 畸形萌发胚通过二次胚再生途径再生利用 | 第46-47页 |
3.4 讨论 | 第47-48页 |
3.5 小结 | 第48-49页 |
第四章 欧洲葡萄无核白葡萄遗传转化体系优化及转泛素连接酶基因研究 | 第49-65页 |
4.1 材料和试剂 | 第49-50页 |
4.1.1 植物材料 | 第49页 |
4.1.2 植物表达载体以及菌株 | 第49页 |
4.1.3 主要试剂 | 第49-50页 |
4.1.4 主要仪器 | 第50页 |
4.2 方法 | 第50-53页 |
4.2.1 农杆菌介导的葡萄遗传转化 | 第50页 |
4.2.2 胚性材料卡那霉素抗性实验 | 第50-51页 |
4.2.3 不同胚性组织转化效率测试 | 第51页 |
4.2.4 不同筛选方法对转化的影响 | 第51-52页 |
4.2.5 转基因胚的成苗 | 第52页 |
4.2.6 转基因苗的分子检测 | 第52-53页 |
4.2.7 转基因植株表型观察以及抗病性测试 | 第53页 |
4.2.8 数据统计分析 | 第53页 |
4.3 结果与分析 | 第53-62页 |
4.3.1 农杆菌介导的遗传转化过程 | 第53-54页 |
4.3.2 卡那霉素最佳筛选浓度确定 | 第54-55页 |
4.3.3 胚性愈伤组织、体细胞胚和原胚团转化效率的比较 | 第55-56页 |
4.3.4 延迟筛选对转基因效率的影响 | 第56页 |
4.3.5 交替成苗对转基因胚成苗率的影响 | 第56-57页 |
4.3.6 无核白葡萄抗性苗分子检测 | 第57-59页 |
4.3.7 转基因苗的形态学观察 | 第59-60页 |
4.3.8 转泛素连接酶基因葡萄白粉病抗性鉴定 | 第60-62页 |
4.4 讨论 | 第62-63页 |
4.5 小结 | 第63-65页 |
第五章 欧洲葡萄无核白转中国野生华东葡萄芪合成酶基因研究 | 第65-82页 |
5.1 材料和试剂 | 第65-66页 |
5.1.1 植物材料 | 第65页 |
5.1.2 菌株和载体 | 第65页 |
5.1.3 主要试剂 | 第65-66页 |
5.1.4 主要仪器 | 第66页 |
5.2 方法 | 第66-69页 |
5.2.1 中国野生华东葡萄白河-35-1 芪合成酶基因转化无核白葡萄 | 第66页 |
5.2.2 转芪合成酶基因检测 | 第66-68页 |
5.2.3 转基因株系中芪合成酶基因家族(STS)转录水平变化 | 第68页 |
5.2.4 转基因株系中查尔酮合成酶基因(CHS)转录水平变化 | 第68页 |
5.2.5 转基因植株中芪类化合物含量测定 | 第68-69页 |
5.2.6 无核白葡萄转芪合成酶基因株系抗白粉病测试 | 第69页 |
5.2.7 数据分析 | 第69页 |
5.3 结果与分析 | 第69-80页 |
5.3.1 无核白葡萄转芪合成酶基因株系再生以及检测 | 第69-71页 |
5.3.2 STS 基因过量表达对于其家族各个基因表达的影响 | 第71-72页 |
5.3.3 STS 基因过量表达对 CHS 基因表达的影响 | 第72-73页 |
5.3.4 芪类化合物含量测定 | 第73-76页 |
5.3.5 无核白葡萄转芪合成酶基因株系抗白粉病检测 | 第76-80页 |
5.4 讨论 | 第80-81页 |
5.5 小结 | 第81-82页 |
全文结论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-91页 |
缩略词 | 第91-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
作者简介 | 第93页 |