附件 | 第4-10页 |
致谢 | 第10-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
缩略语表 | 第15-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-31页 |
1.1 生长素的代谢 | 第17-19页 |
1.1.1 生长素及其生物合成 | 第17-18页 |
1.1.2 生长素的降解 | 第18-19页 |
1.2 生长素的极性运输 | 第19-27页 |
1.2.1 生长素的极性运输概述 | 第19-20页 |
1.2.2 生长素极性运输载体 | 第20-27页 |
1.2.2.1 PIN蛋白家族 | 第20-22页 |
1.2.2.2 AUX/LAX蛋白家族 | 第22-23页 |
1.2.2.3 ABCB蛋白家族 | 第23-27页 |
1.2.2.3.1 ABCB在植物生长发育中的作用 | 第23-24页 |
1.2.2.3.2 ABCB介导的生长素转运的调控 | 第24-27页 |
1.3 生长素的生理功能 | 第27-30页 |
1.3.1 生长素与器官发育及形态建成 | 第27-28页 |
1.3.2 生长素与顶端优势 | 第28页 |
1.3.3 生长素与向性生长 | 第28-30页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
第二章 水稻ABCB家族的生物信息学分析 | 第31-37页 |
2.1 引言 | 第31页 |
2.2 材料与方法 | 第31-32页 |
2.2.1 进化树的构建 | 第31页 |
2.2.2 组织特异性表达预测 | 第31页 |
2.2.3 亚细胞定位预测 | 第31-32页 |
2.3 结果与讨论 | 第32-37页 |
2.3.1 植物中ABCB蛋白家族进化关系分析 | 第32-34页 |
2.3.2 水稻中ABCB家族基因的组织特异性表达及亚细胞定位预测 | 第34-37页 |
第三章 osabcb14突变体的鉴定、互补验证及表型分析 | 第37-48页 |
3.1 引言 | 第37-39页 |
3.2 材料与方法 | 第39-41页 |
3.2.1 植物材料与生长条件 | 第39页 |
3.2.2 osabcb14突变体的鉴定 | 第39-40页 |
3.2.2.1 DNA水平的鉴定 | 第39-40页 |
3.2.2.2 RNA水平的鉴定 | 第40页 |
3.2.3 osabcb14突变体的转基因互补验证 | 第40-41页 |
3.2.3.1 互补载体的构建 | 第40-41页 |
3.2.3.2 互补载体转化osabcb14突变体愈伤 | 第41页 |
3.2.3.3 互补验证转基因阳性苗的鉴定 | 第41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-44页 |
3.3.1 突变体的鉴定及互补验证 | 第41-43页 |
3.3.2 突变体的表型分析 | 第43-44页 |
3.4 讨论 | 第44-47页 |
3.5 小结 | 第47-48页 |
第四章 OsABCB14基因表达谱分析及亚细胞定位 | 第48-58页 |
4.1 引言 | 第48-49页 |
4.2 材料与方法 | 第49-51页 |
4.2.1 植物材料与生长条件 | 第49页 |
4.2.2 定量RT-PCR | 第49页 |
4.2.3 GUS染色 | 第49-51页 |
4.2.3.1 GUS融合载体的构建及转基因 | 第49-50页 |
4.2.3.2 GUS染色步骤 | 第50-51页 |
4.2.4 GFP荧光观察 | 第51页 |
4.2.4.1 GFP融合载体的构建 | 第51页 |
4.2.4.2 农杆菌介导的烟草瞬时侵染 | 第51页 |
4.2.4.3 基因枪法抨击洋葱表皮 | 第51页 |
4.3 结果与分析 | 第51-56页 |
4.3.1 OsABCB14基因的表达谱分析 | 第51-53页 |
4.3.2 OsABCB14亚细胞定位分析 | 第53-56页 |
4.4 讨论 | 第56-57页 |
4.5 小结 | 第57-58页 |
第五章 osabcb14突变体中生长素含量及转运分析 | 第58-68页 |
5.1 引言 | 第58页 |
5.2 材料与方法 | 第58-61页 |
5.2.1 植物材料与生长条件 | 第58-59页 |
5.2.2 生长素含量的测定 | 第59页 |
5.2.2.1 自由态IAA的测定 | 第59页 |
5.2.2.2 生长素报告基因DR5-GUS表达分析 | 第59页 |
5.2.3 定量PCR分析生长素快速响应基因的表达 | 第59页 |
5.2.4 生长素极性运输的分析 | 第59-61页 |
5.2.4.1 酵母和原生质体中IAA转运的分析 | 第59-61页 |
5.2.4.2 水稻根中IAA极性运输的测定 | 第61页 |
5.3 结果与分析 | 第61-64页 |
5.3.1 osabcb14突变体中游离IAA含量降低 | 第61-63页 |
5.3.2 osabcb14突变体中生长素反应基因的表达降低 | 第63页 |
5.3.3 OsABCB14极性运输功能分析 | 第63-64页 |
5.4 讨论 | 第64-66页 |
5.5 小结 | 第66-68页 |
第六章 osabcb14突变体中离子含量的分析 | 第68-77页 |
6.1 引言 | 第68-69页 |
6.2 材料与方法 | 第69-70页 |
6.2.1 植物材料与生长条件 | 第69页 |
6.2.2 叶绿素含量的测定 | 第69页 |
6.2.3 二价金属离子的测定 | 第69页 |
6.2.4 照片拍摄 | 第69页 |
6.2.5 定量RT-PCR | 第69-70页 |
6.3 结果与分析 | 第70-75页 |
6.3.1 osabcb14突变体中二价金属离子含量上升 | 第70-71页 |
6.3.2 osabcb14突变体对缺铁不敏感 | 第71-73页 |
6.3.3 osabcb14突变体中缺铁响应基因表达变化 | 第73-75页 |
6.4 讨论 | 第75-76页 |
6.5 小结 | 第76-77页 |
第七章 全文讨论与展望 | 第77-82页 |
7.1 全文讨论 | 第77-79页 |
7.1.1 OsABCB14编码一个质膜定位的生长素输入载体 | 第77-78页 |
7.1.2 OsABCB14参与水稻离子平衡 | 第78-79页 |
7.2 本研究创新点 | 第79页 |
7.3 未来可能的研究动态 | 第79-82页 |
7.3.1 寻找上下游基因 | 第80页 |
7.3.2 寻找互作蛋白 | 第80-81页 |
7.3.3 深入研究生长素与其他信号关系 | 第81-82页 |
附录 | 第82-90页 |
参考文献 | 第90-108页 |
个人简介 | 第108-109页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第109页 |