| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 文献综述 | 第16-33页 |
| 第一章 肝脏葡萄糖代谢 | 第16-29页 |
| 1.1 糖异生途径简介 | 第16-17页 |
| 1.2 葡萄糖异生的底物 | 第17-19页 |
| 1.2.1 乳酸 | 第17-18页 |
| 1.2.2 丙酮酸 | 第18页 |
| 1.2.3 氨基酸 | 第18页 |
| 1.2.4 甘油 | 第18-19页 |
| 1.2.5 丙酸盐 | 第19页 |
| 1.3 三羧酸循环 (Tricarboxylic acid cycle, TCA cycle) | 第19-20页 |
| 1.4 肝脏糖异生信号转导通路 | 第20-21页 |
| 1.4.1 胰高血糖素 | 第20-21页 |
| 1.4.2 胰岛素 | 第21页 |
| 1.5 肝脏糖异生的关键限速酶 | 第21-26页 |
| 1.5.1 磷酸果糖激酶-1（PFK-1）和果糖-1,6-二磷酸酶（F1,6BPase） | 第21-22页 |
| 1.5.2 丙酮酸羧化酶（PC） | 第22页 |
| 1.5.3 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPCK） | 第22-23页 |
| 1.5.4 葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase） | 第23-24页 |
| 1.5.5 丙酮酸脱氢酶复合物（PDH） | 第24页 |
| 1.5.6 葡萄糖激酶（Glucokinase, GK） | 第24页 |
| 1.5.7 丙酮酸脱氢酶激酶（Pyruvate Dehydrogenase Kinase, PDK） | 第24-26页 |
| 1.6 肝脏糖异生的调控因子 | 第26-29页 |
| 1.6.1 FoxO 转录因子家族 | 第26-27页 |
| 1.6.2 AMPK | 第27页 |
| 1.6.3 CREB | 第27-28页 |
| 1.6.4 TCF4（TCF7L2） | 第28页 |
| 1.6.5 内质网应激（ER stress） | 第28-29页 |
| 第二章 Fyn酪氨酸激酶的研究进展 | 第29-33页 |
| 2.1 Fyn 激酶的结构特征 | 第29-30页 |
| 2.2 Fyn 蛋白激酶在胰岛素信号中的作用 | 第30-31页 |
| 2.3 Fyn 在外周组织脂肪酸氧化中的作用 | 第31-32页 |
| 2.4 Fyn 对炎症的调控作用 | 第32页 |
| 2.5 Fyn 参与调控骨骼肌纤维类型转换 | 第32-33页 |
| 实验研究 | 第33-62页 |
| 第三章 禁食状态下 FynKO小鼠肝脏糖异生改变引起 HGP降低 | 第33-48页 |
| 前言 | 第33-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第34页 |
| 3.1.2 实验材料 | 第34页 |
| 3.2 实验步骤与方法 | 第34-39页 |
| 3.2.1 FynKO 小鼠基因型的鉴定 | 第34-35页 |
| 3.2.2 PCR array 检测禁食 FynKO 小鼠肝脏葡萄糖代谢中的差异表达基因 | 第35-36页 |
| 3.2.3 丙酮酸、丙酮酸/乳酸复合物，甘油和果糖耐受性实验 | 第36页 |
| 3.2.4 稳定同位素标记检测肝脏葡萄糖生成 | 第36-37页 |
| 3.2.5 [U-13C]-glycerol 诱导的葡萄糖合成 | 第37页 |
| 3.2.6 组织样品的采集与代谢产物分析样品的制备 | 第37页 |
| 3.2.7 亲水性代谢产物的分析 | 第37-38页 |
| 3.2.8 Western Blot | 第38页 |
| 3.2.9 Quantitative Real-Time PCR | 第38-39页 |
| 3.2.10 统计学分析 | 第39页 |
| 3.3 结果 | 第39-45页 |
| 3.3.1 FynKO 小鼠的鉴定 | 第39页 |
| 3.3.2 PCR array 分析 | 第39-40页 |
| 3.3.3 FynKO 小鼠丙酮酸和乳酸诱导的肝脏葡萄糖合成降低 | 第40-42页 |
| 3.3.4 FynKO 小鼠肝糖异生关键基因 PEPCK 的表达量下调 | 第42页 |
| 3.3.5 FynKO 小鼠甘油诱导的肝脏葡萄糖合成减少 | 第42-43页 |
| 3.3.6 FynKO 小鼠肝脏的磷酸丙糖含量降低 | 第43-44页 |
| 3.3.7 FynKO 小鼠果糖诱导的肝脏葡萄糖合成降低 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-48页 |
| 第四章 Fyn对肝脏细胞葡萄糖合成的调控作用研究 | 第48-56页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第48-49页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第48页 |
| 4.1.2 FynKO 小鼠原代肝脏细胞的分离培养及葡萄糖含量的测定 | 第48页 |
| 4.1.3 FynKO 小鼠原代肝脏细胞和 FAO 大鼠肝脏细胞的转染 | 第48-49页 |
| 4.1.4 Q-PCR 和 Western Blot | 第49页 |
| 4.2 结果 | 第49-54页 |
| 4.2.1 FynKO 小鼠原代肝脏细胞葡萄糖生成降低 | 第49-50页 |
| 4.2.2 FynKO 原代肝脏细胞中糖异生相关基因的 mRNA 表达水平降低 | 第50-51页 |
| 4.2.3 WT 原代肝脏细胞超表达活性缺失的 Fyn 载体 PEPCK 蛋白表达量降低 | 第51页 |
| 4.2.4 FAO 细胞转染效果的检测 | 第51-52页 |
| 4.2.5 FAO 细胞超表达 Fyn-CA 上调 PEPCK 和 G6Pase 的表达 | 第52-53页 |
| 4.2.6 FAO 细胞超表达 Fyn-CA 糖异生相关基因 mRNA 表达量上调 | 第53页 |
| 4.2.7 FAO 细胞超表达 Fyn-CA 葡萄糖合成增加 | 第53-54页 |
| 4.3 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 FynKO小鼠肝脏 TCA循环活性改变引起 HGP 降低 | 第56-62页 |
| 5.1 实验材料和方法 | 第56-57页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第56页 |
| 5.1.2 组织样品的采集与置备 | 第56页 |
| 5.1.3 水解代谢产物分析 | 第56页 |
| 5.1.4 RNA 提取与 qRT-PCR | 第56-57页 |
| 5.1.5 统计分析 | 第57页 |
| 5.2 结果 | 第57-60页 |
| 5.2.1 FynKO 小鼠肝脏磷酸烯醇式丙酮酸含量降低 | 第57-58页 |
| 5.2.2 FynKO 小鼠乳酸和丙氨酸含量减少 | 第58页 |
| 5.2.3 FynKO 小鼠三羧酸循环活性增加 | 第58-59页 |
| 5.2.4 苹果酸-天冬氨酸穿梭在 FynKO 小鼠肝脏中受损 | 第59-60页 |
| 5.3 讨论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 创新点 | 第63-64页 |
| 下一步研究计划 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-78页 |
| 缩略词表 (Abbreviation) | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 个人简介 | 第81-82页 |
