| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 一、引言 | 第13-28页 |
| 1.1 高等植物细胞壁 | 第13-17页 |
| 1.1.1 纤维素 | 第13-15页 |
| 1.1.2 果胶 | 第15页 |
| 1.1.3 半纤维素 | 第15-16页 |
| 1.1.4 木质素 | 第16-17页 |
| 1.2 棉花研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2.1 棉花属物种演化 | 第17-18页 |
| 1.2.2 棉花基因组测序 | 第18页 |
| 1.2.3 棉花纤维细胞发育过程 | 第18-19页 |
| 1.2.4 影响棉花纤维发育的分子机制 | 第19-20页 |
| 1.3 木聚糖研究进展 | 第20-27页 |
| 1.3.1 木聚糖分子结构 | 第21页 |
| 1.3.2 木聚糖生物学功能 | 第21-22页 |
| 1.3.3 参与木聚糖合成的基因 | 第22-27页 |
| 1.4 立题依据和研究意义 | 第27-28页 |
| 二、实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1 菌种和载体 | 第28页 |
| 2.2 化学试剂 | 第28页 |
| 2.3 工具酶 | 第28页 |
| 2.4 植物材料 | 第28-29页 |
| 三、实验方法 | 第29-39页 |
| 3.1 基因分离 | 第29页 |
| 3.1.1 信息来源简介 | 第29页 |
| 3.1.2 基因分离策略 | 第29页 |
| 3.2 候选基因的分析 | 第29-30页 |
| 3.3 候选基因在棉花各组织中的表达分析 | 第30-34页 |
| 3.3.1 棉花各组织RNA的提取 | 第30-31页 |
| 3.3.2 cDNA的制备 | 第31-33页 |
| 3.3.3 表达分析 | 第33-34页 |
| 3.4 拟南芥和棉花转化 | 第34-35页 |
| 3.4.1 感受态细胞的制备 | 第34页 |
| 3.4.2 载体构建 | 第34页 |
| 3.4.3 农杆菌介导的拟南芥介导的拟南芥和棉花转化 | 第34页 |
| 3.4.4 转基因拟南芥的检测 | 第34-35页 |
| 3.5 拟南芥花序茎切片分析 | 第35-39页 |
| 3.5.1 树脂切片 | 第35页 |
| 3.5.2 石蜡切片 | 第35-37页 |
| 3.5.3 免疫组化 | 第37-38页 |
| 3.5.4 Calcofluor White纤维素染色 | 第38-39页 |
| 四、结果与分析 | 第39-62页 |
| 4.1 棉花木聚糖合成相关基因的分离 | 第39-41页 |
| 4.1.1 拟南芥中参与木聚糖合成基因的查找 | 第39-40页 |
| 4.1.2 二倍体棉花D基因组可能参与木聚糖合成的候选基因 | 第40页 |
| 4.1.3 四倍体棉花(Gossypium hirsutum)ESTs | 第40页 |
| 4.1.4 候选基因的序列拼接 | 第40-41页 |
| 4.2 基因分离克隆及相关分析 | 第41-50页 |
| 4.2.1 蛋白序列同源性分析 | 第41-43页 |
| 4.2.2 蛋白定位分析 | 第43-45页 |
| 4.2.3 进化树分析 | 第45-47页 |
| 4.2.4 蛋白功能结构域分析 | 第47-50页 |
| 4.3 基因表达分析 | 第50-55页 |
| 4.3.1 棉花不同组织RNA的提取与cDNA合成 | 第50-51页 |
| 4.3.2 半定量RT-PCR分析 | 第51-52页 |
| 4.3.3 荧光定量RT-PCR分析 | 第52-55页 |
| 4.4 GhGT47B功能初步分析 | 第55-60页 |
| 4.4.1 回补突变体的获得 | 第55-57页 |
| 4.4.2 转基因拟南芥的表型分析 | 第57-60页 |
| 4.5 GhGT47A转基因棉花 | 第60-62页 |
| 4.5.1 GhGT47A过量载体和RNAi载体的构建 | 第60-61页 |
| 4.5.2 转基因棉花材料旳继代培养与种植 | 第61-62页 |
| 五、讨论 | 第62-64页 |
| 5.1 利用公共EST资料库蹄查获得新基因 | 第62页 |
| 5.2 基因功能预测分析 | 第62-63页 |
| 5.3 棉花A基因组与D基因组比较分析 | 第63页 |
| 5.4 棉花GT47B功能分析 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 附录 | 第72-74页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
