| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| 1.1 PRV病原学特征 | 第11-14页 |
| 1.1.1 PRV的形态结构和理化性质 | 第11-12页 |
| 1.1.2 轮状病毒的培养特性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 轮状病毒的抗原分型 | 第13页 |
| 1.1.4 轮状病毒的基因组结构、蛋白及功能 | 第13-14页 |
| 1.2 轮状病毒的诊断方法 | 第14-16页 |
| 1.2.1 猪轮状病毒临床诊断 | 第14-15页 |
| 1.2.2 猪轮状病毒实验室诊断 | 第15-16页 |
| 1.3 单克隆抗体的研究进展 | 第16页 |
| 1.3.1 单克隆抗体的概述 | 第16页 |
| 1.3.2 抗PRV单克隆抗体的研究进展 | 第16页 |
| 1.4 研究的目的意义 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 细胞与病毒 | 第18页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第18页 |
| 2.1.3 临床粪便样品 | 第18页 |
| 2.1.4 培养基和主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第18-21页 |
| 2.1.6 主要实验仪器设备 | 第21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 免疫原的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.2 免疫动物 | 第22页 |
| 2.2.3 杂交瘤筛选方法的建立 | 第22-23页 |
| 2.2.4 杂交瘤细胞株的建立与筛选 | 第23-24页 |
| 2.2.5 单克隆抗体效价的测定 | 第24-25页 |
| 2.2.6 单克隆抗体生物学特性鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.7 双抗体夹心ELISA方法的初步建立 | 第26-27页 |
| 2.2.8 双抗体夹心ELISA方法优化 | 第27-28页 |
| 2.2.9 双抗体夹心ELISA方法的灵敏性试验 | 第28页 |
| 2.2.10 双抗体夹心ELISA方法的特异性试验 | 第28页 |
| 2.2.11 双抗体夹心ELISA方法的重复性试验 | 第28-29页 |
| 2.2.12 双抗体夹心ELISA方法检测临床样品 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-42页 |
| 3.1 PRV的增殖及鉴定 | 第30页 |
| 3.1.1 PRV的增殖 | 第30页 |
| 3.1.2 PRV JL94株TCID_(50)的测定 | 第30页 |
| 3.1.3 PRV病毒的纯化 | 第30页 |
| 3.2 杂交瘤细胞株筛选方法的建立 | 第30-31页 |
| 3.3 杂交瘤细胞株建立和筛选 | 第31-32页 |
| 3.4 单克隆抗体效价的测定 | 第32页 |
| 3.5 单克隆抗体生物学特性鉴定 | 第32-34页 |
| 3.5.1 单克隆抗体亚类鉴定 | 第32页 |
| 3.5.2 杂交瘤细胞染色体计数 | 第32页 |
| 3.5.3 杂交瘤细胞分泌单克隆抗体稳定性的鉴定结果 | 第32-33页 |
| 3.5.4 单克隆抗体针对的抗原表位鉴定结果 | 第33页 |
| 3.5.5 间接免疫荧光试验结果 | 第33-34页 |
| 3.5.6 单克隆抗体的特异性分析 | 第34页 |
| 3.6 双抗体夹心ELISA方法的初步建立及应用 | 第34-42页 |
| 3.6.1 兔抗PRV抗血清纯度鉴定及其浓度测定 | 第34-35页 |
| 3.6.2 兔抗PRV抗血清与McAb上清最佳工作浓度的确定 | 第35页 |
| 3.6.3 双抗体夹心ELISA方法优化 | 第35-38页 |
| 3.6.4 双抗体夹心ELISA方法灵敏性试验 | 第38页 |
| 3.6.5 双抗体夹心ELISA方法特异性试验 | 第38-39页 |
| 3.6.6 双抗体夹心ELISA方法重复性试验 | 第39页 |
| 3.6.7 临床样品处理液的选择 | 第39-40页 |
| 3.6.8 临床样品的检测 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 以病毒为抗原制备单克隆抗体的优势 | 第42页 |
| 4.2 抗PRV单克隆抗体用作检测试剂的特性分析 | 第42页 |
| 4.3 双抗体夹心ELISA法的建立 | 第42-43页 |
| 4.4 单克隆抗体制备过程中的几个重要环节 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |
