| 中文摘要 | 第11-15页 |
| 英文摘要 | 第15-19页 |
| 前言 | 第20-24页 |
| 第一部分 基于iTRAQ蛋白质组学的Emodin对重症急性胰腺炎大鼠胰腺HTRA1/TGF-β1信号通路的影响 | 第24-49页 |
| 引言 | 第24页 |
| 材料和方法 | 第24-34页 |
| 1.材料 | 第24-26页 |
| 1.1 实验动物 | 第24-25页 |
| 1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.方法 | 第26-34页 |
| 2.1 药物配制 | 第26页 |
| 2.2 动物分组与模型制备 | 第26-27页 |
| 2.3 样本采集 | 第27页 |
| 2.4 ELISA检测 | 第27页 |
| 2.5 组织病理学检查 | 第27-28页 |
| 2.6 免疫化学分析 | 第28-29页 |
| 2.7 透射电子显微镜观察 | 第29页 |
| 2.8 Real-timePCR分析 | 第29-30页 |
| 2.9 iTRAQ定量蛋白质组学分析 | 第30-32页 |
| 2.10 Westernblotting分析 | 第32-33页 |
| 2.11 统计学分析 | 第33-34页 |
| 结果 | 第34-40页 |
| 1.Emodin降低SAP大鼠血浆酶学指标和炎性因子水平 | 第34页 |
| 2.Emodin减轻SAP大鼠胰腺组织病理学和细胞超微结构损伤 | 第34-35页 |
| 3.Emodin抑制SAP大鼠胰腺组织MPO蛋白表达 | 第35-36页 |
| 4.Emodin抑制SAP大鼠胰腺组织炎性因子mRNA的表达 | 第36页 |
| 5.iTRAQ蛋白质组学分析大鼠胰腺蛋白质差异表达 | 第36-37页 |
| 6.差异表达蛋白质的功能分类 | 第37-40页 |
| 7.Emodin对HTRA1/TGF-β1信号通路相关蛋白表达的影响 | 第40页 |
| 讨论 | 第40-43页 |
| 小结 | 第43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 第二部分 HTRA1/TGF-β1信号通路在STC诱导的胰腺腺泡细胞损伤中的作用及Emodin干预的体外研究 | 第49-65页 |
| 引言 | 第49页 |
| 材料和方法 | 第49-54页 |
| 1.材料 | 第49-51页 |
| 1.1 细胞 | 第49-50页 |
| 1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 1.3 主要仪器 | 第50-51页 |
| 2.方法 | 第51-54页 |
| 2.1 Emodin溶液的配制 | 第51页 |
| 2.2 细胞培养 | 第51页 |
| 2.3 STC诱导细胞损伤 | 第51页 |
| 2.4 Emodin毒性测定 | 第51-52页 |
| 2.5 细胞活力检测 | 第52页 |
| 2.6 细胞形态学观察 | 第52页 |
| 2.7 胞内蛋白酶检测 | 第52页 |
| 2.8 淀粉酶活性检测 | 第52-53页 |
| 2.9 免疫荧光细胞化学 | 第53页 |
| 2.10 ELISA检测 | 第53页 |
| 2.11 Real-timePCR分析 | 第53页 |
| 2.12 Westernblotting分析 | 第53页 |
| 2.13 HTRA1基因过表达转染实验 | 第53-54页 |
| 2.14 统计学分析 | 第54页 |
| 结果 | 第54-59页 |
| 1.造模药STC对AR42J细胞活力的影响 | 第54页 |
| 2.Emodin对AR42J细胞活力的影响 | 第54-55页 |
| 3.Emodin改善STC诱导的AR42J细胞损伤 | 第55页 |
| 4.Emodin抑制AR42J细胞合成、分泌胰蛋白酶和淀粉酶 | 第55页 |
| 5.Emodin抑制AR42J细胞释放炎性因子 | 第55-56页 |
| 6.Emodin对STC损伤的AR42J细胞内HTRA1/TGF-β1信号通路的抑制作用 | 第56-57页 |
| 7.过表达HTRA1基因抵抗Emodin对STC损伤的AR42J细胞的保护作用 | 第57-59页 |
| 讨论 | 第59-61页 |
| 小结 | 第61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 第三部分 miR-30a-5p调控HTRA1/TGF-β1信号通路在STC诱导的胰腺腺泡细胞损伤中的作用及Emodin干预机制 | 第65-83页 |
| 引言 | 第65-66页 |
| 材料和方法 | 第66-71页 |
| 1.材料 | 第66-67页 |
| 1.1 细胞 | 第66页 |
| 1.2 主要试剂 | 第66-67页 |
| 1.3 主要仪器 | 第67页 |
| 2.方法 | 第67-71页 |
| 2.1 调控HTRA1基因的上游miRNA预测 | 第67页 |
| 2.2 HTRA13’UTR目的基因片段设计与合成 | 第67页 |
| 2.3 双荧光素酶报告基因实验 | 第67-68页 |
| 2.4 定量miR-30a-5p基因表达 | 第68-69页 |
| 2.5 miR-30a-5pinhibitor转染 | 第69页 |
| 2.6 动物实验 | 第69-70页 |
| 2.7 统计学分析 | 第70-71页 |
| 结果 | 第71-77页 |
| 1.生物信息学预测调控HTRA1基因表达的上游miRNA | 第71页 |
| 2.miR-30a-5p靶向调控HTRA1mRNA | 第71页 |
| 3.Emodin上调STC损伤的AR42J细胞中的miR-30a-5p表达 | 第71-72页 |
| 4.miR-30a-5p影响HTRA1对下游TGF-β1的抑制作用 | 第72-73页 |
| 5.miR-30a-5pinhibitor抵抗Emodin对STC诱导损伤的AR42J细胞的保护作用 | 第73-74页 |
| 6.miR-30a-5pantagomir抵抗Emodin对SAP大鼠的治疗作用 | 第74-75页 |
| 7.miR-30a-5pantagomir抵抗Emodin对炎症反应的抑制作用 | 第75-77页 |
| 8.Emodin上调miR-30a-5p抑制HTRA1/TGF-β1信号通路激活.. | 第77页 |
| 讨论 | 第77-79页 |
| 小结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-83页 |
| 结论 | 第83页 |
| 不足与展望 | 第83-84页 |
| 综述 | 第84-115页 |
| 参考文献 | 第98-115页 |
| 附录 | 第115-116页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
