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CRMP5与微管相互作用调节生长锥发育的研究

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 前言第9-18页
    1.1 生长锥与神经元的发育第9-11页
    1.2. 微管与神经元突起生长第11-13页
        1.2.1 微管的结构特点第11-12页
        1.2.2 生长锥微管运动与突起生长第12-13页
    1.3. CRMPs 家族第13-16页
        1.3.1 CRMPs 的生物学特点第13-14页
        1.3.2 CRMPs 的空间表达特征第14-15页
        1.3.3 CRMPs 与神经元突起生长的关系第15-16页
        1.3.4 CRMPs 与疾病第16页
    1.4. 研究目的及其意义第16-18页
第二章 实验材料和方法第18-39页
    2.1 实验材料第18-23页
        2.1.1 实验动物第18页
        2.1.2 细菌菌株、细胞株第18页
        2.1.3 主要试剂、工具和试剂盒第18-20页
        2.1.4 一般试剂的配制第20-22页
        2.1.5 主要的仪器设备第22-23页
    2.2 试验方法第23-38页
        2.2.1 RT-PCR第23-24页
        2.2.2. 反转录反应 (RT)第24-25页
        2.2.3. PCR 反应第25-26页
        2.2.4 构建 CRMP5-GST、CRMP5-FLAG 和 Tubulin-GFP 的重组原核、真核表达载 体第26-28页
        2.2.5 293T 细胞的培养第28-30页
        2.2.6 CRMP5-GST 融合蛋白与 Tubulin 的 Pulldown 分析及免疫印迹(Western Blot) 检测第30-34页
        2.2.7 CRMP5 与 tubulin 免疫荧光共定位第34-35页
        2.2.8 CRMP5 与 tubulin 免疫共沉淀(coIP)分析及检测第35-37页
        2.2.9 生长锥的提取第37-38页
        2.2.10 siRNA 的设计及合成第38页
    2.3 数据统计与分析第38-39页
第三章 结果与分析第39-49页
    3.1 构建 Tubulin-GFP、CRMP5-FLAG 和 CRMP5-GST 的原核和真核重组表达载体第39-40页
    3.2 CRMP-5-GST 融合蛋白和 tubulin GST Pulldown 分析第40-42页
        3.2.1 CRMP-5-GST 融合蛋白的诱导表达,考马斯亮蓝染胶图第40-41页
        3.2.2 胎鼠脑组织生长锥的提取第41页
        3.2.3 CRMP5 和 Tubulin 的 Pulldown 分析第41-42页
    3.3 CRMP5 和 Tubulin 的 CoIP 分析第42-43页
    3.4 CRMP-5 和 Tubulin 免疫荧光共定位第43-45页
        3.4.1 CRMP-5 和 Tubulin 在 293T 细胞中免疫荧光共定位第43-44页
        3.4.2 CRMP5 和 Tubulin 在神经元及生长锥中免疫荧光共定位第44-45页
    3.5 干扰和过表达 CRMP5 对神经元生长锥发育的影响第45-49页
        3.5.1 干扰 CRMP-5 对神经元的生长发育的影响第46-47页
        3.5.2 过表达 CRMP-5 对神经元的生长发育的影响第47-49页
第四章 讨论第49-52页
第五章 结论第52-53页
参考文献第53-60页
附录:英文缩写词第60-61页
在读期间发表论文第61-62页
致谢第62页

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