| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 英文缩略词 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-19页 |
| 第一章 胚胎干细胞与miR-17-92的研究进展 | 第12-19页 |
| 1 胚胎干细胞(ESCs)的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1 IESCs的特性 | 第12页 |
| 1.2 牛ESCs建系的研究进展 | 第12页 |
| 1.3 核心转录因子在ESCs多能性表达的调控中发挥重要作用 | 第12-13页 |
| 1.4 与LIF相关的维持未分化状态与自我更新能力的信号通路 | 第13页 |
| 1.5 ESCs诱导分化为神经细胞 | 第13-14页 |
| 2 miRNA简介 | 第14-18页 |
| 2.1 miRNA的基本结构与miRNA的产生过程 | 第14页 |
| 2.2 miRNA对其靶基因作用的基本原理 | 第14-15页 |
| 2.3 miRNA对ESCs的调控作用 | 第15页 |
| 2.4 miR-17-92简介 | 第15-18页 |
| 3 课题研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二部分 试验研究 | 第19-55页 |
| 第二章 黄牛类ESCs的分离与培养 | 第20-37页 |
| 摘要 | 第20页 |
| 1 材料与方法 | 第20-27页 |
| 1.1 器材 | 第20页 |
| 1.2 试剂与溶液 | 第20-22页 |
| 1.3 试验材料 | 第22页 |
| 1.4 饲养层的制备 | 第22-23页 |
| 1.5 黄牛卵母细胞的体外成熟和体外受精 | 第23-24页 |
| 1.6 黄牛类ESCs的分离、培养、传代 | 第24-25页 |
| 1.7 黄牛类ESCs的冻存与复苏 | 第25页 |
| 1.8 聚合酶链式反应(PCR) | 第25-26页 |
| 1.9 黄牛类ESCs碱性磷酸酶(AP)染色 | 第26页 |
| 1.10 黄牛类ESCs免疫荧光染色 | 第26页 |
| 1.11 拟胚体试验 | 第26-27页 |
| 1.12 数据处理分析 | 第27页 |
| 2 结果 | 第27-34页 |
| 2.1 饲养层细胞汇合度对黄牛类ESCs原始克隆形成的影响 | 第27-28页 |
| 2.2 饲养层细胞汇合度对黄牛类ESCs原始克隆直径增长的影响 | 第28页 |
| 2.3 不同来源饲养层对黄牛类ESCs原始克隆形成的影响 | 第28-29页 |
| 2.4 黄牛类ESCs的鉴定 | 第29-34页 |
| 3 分析与讨论 | 第34-36页 |
| 3.1 在ESCs中多能性基因的鉴定 | 第34页 |
| 3.2 饲养层细胞的选择 | 第34-35页 |
| 3.3 传代方法的选择 | 第35-36页 |
| 4 结论 | 第36-37页 |
| 第三章 miR-17-92过表达对其靶基因表达的影响 | 第37-55页 |
| 摘要 | 第37页 |
| 1 材料与方法 | 第37-48页 |
| 1.1 材料 | 第37-44页 |
| 1.2 方法 | 第44-48页 |
| 2 结果 | 第48-53页 |
| 2.1 黄牛miR-17-92基因的克隆与测序分析 | 第48-49页 |
| 2.2 黄牛miR-17-92基因真核表达载体构建 | 第49-50页 |
| 2.3 慢病毒感染黄牛类ESCs | 第50-51页 |
| 2.4 实时定量PCR(RT-PCR)检测感染效果 | 第51-53页 |
| 3 分析与讨论 | 第53-54页 |
| 3.1 miR-17-92的靶基因 | 第53页 |
| 3.2 关于慢病毒载体 | 第53页 |
| 3.3 miRNA介导靶基因的mRNA的降解 | 第53-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读硕士期间发表学术论文情况 | 第62页 |
