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新型核苷类似物FNC对非霍奇金淋巴瘤细胞侵袭力影响的实验研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略词表第11-13页
引言第13-15页
一 材料与仪器第15-18页
    1 细胞株第15页
    2 实验使用的试剂及重要耗材第15-17页
    3 实验使用的仪器第17-18页
二 所需溶液配制第18-22页
    1 药物溶液的配制第18页
    2 细胞培养中所需溶液的配制第18-19页
        2.1 含 10%和 20%胎牛血清的 RPMI-1640 培养基第18页
        2.2 PBS 缓冲液第18页
        2.3 0.04%台盼蓝第18页
        2.4 细胞冻存液第18-19页
    3 检测细胞粘附力、迁移力、侵袭力实验中所需溶液的配制第19页
        3.1 20μg·ml~(-1)的 FN 溶液第19页
        3.2 10 mg·ml~(-1)的 BSA 溶液第19页
        3.3 5 mg·ml~(-1)的 MTT 溶液第19页
        3.4 Matrigel 基质胶第19页
        3.5 0.1%的结晶紫溶液第19页
    4 RT-PCR 实验所需溶液的配制第19-20页
        4.1 0.1% DEPC 溶液第19-20页
        4.2 75%乙醇第20页
        4.3 5×TAE 电泳缓冲液(1L)第20页
        4.4 5 mg·ml~(-1)的溴化乙啶(EB)第20页
        4.5 1.5%琼脂糖第20页
    5 Western Blot 实验相关溶液的配制第20-22页
        5.1 电泳缓冲液第20页
        5.2 电转缓冲液第20-21页
        5.3 5×SDS loading buffer 缓冲液第21页
        5.4 10×TBS第21页
        5.5 TBST 缓冲液(1×TBS+0.05%Tween-20)第21页
        5.6 5%的脱脂奶粉封闭液第21页
        5.7 显影液第21页
        5.8 定影液第21-22页
三 实验方法第22-36页
    1 细胞复苏、培养和冻存第22-23页
        1.1 细胞复苏第22页
        1.2 细胞培养第22页
        1.3 细胞传代第22页
        1.4 细胞冻存第22-23页
        1.5 细胞悬液制备及细胞计数第23页
    2 改良 MTT 法分别检测 FNC 对 Raji、JeKo-1 细胞粘附力的影响第23-24页
    3 Transwell 小室测定 FNC 对 Raji、JeKo-1 细胞迁移能力的影响第24-25页
    4 Transwell 小室测定 FNC 对 Raji、JeKo-1 细胞侵袭能力的影响第25页
    5 RT-PCR 法检测 FNC 对 Raji、JeKo-1 细胞中一些基因表达量的影响第25-30页
        5.1 试剂与器皿的准备第26页
        5.2 引物的序列与溶解第26-27页
        5.3 提取 Raji、JeKo-1 细胞的总 RNA第27页
        5.4 RNA 样品的测定第27-28页
        5.5 cDNA 链的合成第28-29页
        5.6 PCR 产物凝胶电泳图像分析第29-30页
    6 Western Blot 法检测 FNC 对 Raji、JeKo-1 细胞中一些蛋白表达的影响18第30-35页
        6.1 提取 Raji 和 JeKo-1 细胞的总蛋白第30-31页
        6.2 BCA 法测定蛋白浓度第31页
        6.3 聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳第31-33页
        6.4 转膜第33页
        6.5 丽春红染膜第33页
        6.6 封闭第33页
        6.7 孵一抗第33-34页
        6.8 孵二抗第34页
        6.9 ECL 化学发光法显色第34-35页
        6.10 条带分析第35页
    7 数据分析第35-36页
四 结果第36-48页
    1 FNC 对 Raji、JeKo-1 细胞粘附力的影响第36-37页
    2 FNC 对 Raji、JeKo-1 细胞迁移力、侵袭力的影响第37-40页
    3 FNC 对 Raji、JeKo-1 细胞中β-catenin、GSK-3β、MMP-2、MMP-9、E-cadherin 及 VEGF mRNA 表达的影响第40-44页
    4 FNC 对 Raji、JeKo-1 细胞中β-catenin、E-cadherin、GSK-3β、MMP-2、MMP-9 及 VEGF 蛋白表达的影响第44-48页
五 讨论第48-51页
六 结论第51-52页
参考文献第52-54页
综述第54-68页
    参考文献第63-68页
个人简介第68-69页
致谢第69页

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