摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-17页 |
第一部分 :MiR-126对ICH后BBB破坏的治疗作用的研究 | 第17-48页 |
1 前言 | 第17-19页 |
2 材料和方法 | 第19-31页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第19-21页 |
2.1.1 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
2.2 研究对象和分组 | 第21页 |
2.3 实验方法和步骤 | 第21-30页 |
2.3.1 ICH动物模型制备 | 第21页 |
2.3.2 MiR-126-3pmimic给药 | 第21-22页 |
2.3.3 肢体放置试验 | 第22-23页 |
2.3.4 转角实验 | 第23页 |
2.3.5 伊万斯蓝渗透实验 | 第23页 |
2.3.6 脑水含量 | 第23-24页 |
2.3.7 标本采集 | 第24页 |
2.3.8 实时荧光定量PCR | 第24-26页 |
2.3.9 石蜡切片制作 | 第26-27页 |
2.3.10 免疫荧光染色 | 第27页 |
2.3.11 TUNEL染色 | 第27-28页 |
2.3.12 Fluoro-JadeB(FJB)染色 | 第28-29页 |
2.3.13 免疫组织化学染色 | 第29-30页 |
2.4 统计分析 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-44页 |
3.1 大鼠血清、血肿周围区和血肿区miR-126-3p水平 | 第31页 |
3.2 MiR-126-3pmimic治疗提高了ICH后大鼠的行为表现 | 第31-32页 |
3.3 MiR-126-3p减轻ICH大鼠脑水肿 | 第32-33页 |
3.4 MiR-126-3p降低大鼠ICH后BBB渗透性 | 第33-34页 |
3.5 MiR-126-3p抑制ICH后白细胞浸润 | 第34-36页 |
3.6 MiR-126-3p抑制ICH后小胶质细胞活化 | 第36-37页 |
3.7 MiR-126-3p抑制ICH后血肿周围区FJB阳性细胞数升高 | 第37-39页 |
3.8 MiR-126-3p抑制ICH后血肿周围区TUNEL阳性细胞数升高 | 第39-41页 |
3.9 MiR-126-3p抑制血肿区神经元凋亡 | 第41-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
第二部分 :MiR-126通过下调VCAM1在ICH后产生神经保护作用的研究 | 第48-66页 |
1 前言 | 第48-50页 |
2 材料和方法 | 第50-58页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第50-52页 |
2.1.1 主要试剂 | 第50-51页 |
2.1.2 主要仪器 | 第51-52页 |
2.2 实验方法和步骤 | 第52-56页 |
2.2.1 ICH动物模型制备 | 第52页 |
2.2.2 MiR-126-3pmimic给药 | 第52页 |
2.2.3 标本采集 | 第52-53页 |
2.2.4 WesternBlotting | 第53-54页 |
2.2.5 BMEC分离和培养 | 第54-55页 |
2.2.6 BMEC鉴定 | 第55页 |
2.2.7 细胞转染 | 第55-56页 |
2.2.8 实时荧光定量PCR | 第56页 |
2.2.9 BMEC渗透实验 | 第56页 |
2.3 统计分析 | 第56-58页 |
3 结果 | 第58-63页 |
3.1 MiR-126-3p降低ICH后VCAM1表达 | 第58页 |
3.2 BMEC鉴定 | 第58-59页 |
3.3 体外敲除miR-126-3P有效降低BMEC内miR-126-3p表达水平 | 第59-60页 |
3.4 体外敲除miR-126-3P提高BMEC内VCAM1表达 | 第60-61页 |
3.5 体外敲除miR-126-3P使BMEC细胞膜渗透性受损 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
第三部分 :MiR-126通过下调PIK3R2在ICH后产生神经保护作用及其相关信号转导机制的研究 | 第66-80页 |
1 前言 | 第66-67页 |
2 材料和方法 | 第67-72页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第67-69页 |
2.1.1 主要试剂 | 第67-68页 |
2.1.2 主要仪器 | 第68-69页 |
2.2 实验方法和步骤 | 第69-70页 |
2.2.1 ICH动物模型制备 | 第69页 |
2.2.2 MiR-126-3pmimic给药 | 第69-70页 |
2.2.3 标本采集 | 第70页 |
2.2.4 WesternBlotting | 第70页 |
2.2.5 BMEC分离和培养 | 第70页 |
2.2.6 细胞转染 | 第70页 |
2.2.7 细胞处理 | 第70页 |
2.2.8 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第70页 |
2.3 统计分析 | 第70-72页 |
3 结果 | 第72-77页 |
3.1 MiR-126-3p降低ICH后PIK3R2表达、增强Akt活化 | 第72页 |
3.2 体外敲除miR-126-3P提高BMEC内PIK3R2表达 | 第72-73页 |
3.3 MiR-126-3p敲除部分阻断了VEGF和Ang-1刺激的Akt活化 | 第73-75页 |
3.4 体外敲除miR-126-3P使BMEC凋亡率升高 | 第75-77页 |
4 讨论 | 第77-79页 |
5 结论 | 第79-80页 |
本研究创新性的自我评价 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-88页 |
综述 | 第88-99页 |
参考文献 | 第94-99页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
个人简历 | 第101页 |