| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 褐飞虱再猖獗研究 | 第10-11页 |
| 2 脂肪体 | 第11-13页 |
| 3 蛋白质组学的研究 | 第13-17页 |
| 3.1 蛋白质组学在昆虫学上的应用 | 第14-15页 |
| 3.1.1 昆虫发育 | 第14页 |
| 3.1.2 昆虫生殖 | 第14页 |
| 3.1.3 毒理学中的应用 | 第14-15页 |
| 3.2 蛋白质组学的研究方法 | 第15-17页 |
| 3.2.1 双向电泳技术(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE) | 第15-16页 |
| 3.2.2 iTRAQ技术(同位素标记相对与绝对定量技术) | 第16页 |
| 3.2.3 基因干扰研究 | 第16-17页 |
| 4 RNAi的研究进展 | 第17-20页 |
| 4.1 RNAi的分子机制 | 第17-18页 |
| 4.2 RNAi技术的实施方法 | 第18-19页 |
| 4.2.1 注射法 | 第18页 |
| 4.2.2 饲喂法 | 第18-19页 |
| 4.2.3 转基因 | 第19页 |
| 4.3 RNAi技术在昆虫学中的其他应用 | 第19-20页 |
| 4.3.1 RNAi与昆虫免疫 | 第19页 |
| 4.3.2 RNAi在害虫控制中的应用 | 第19-20页 |
| 5 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 不同药剂处理后褐飞虱脂肪体的蛋白质组学分析 | 第21-45页 |
| 1 前言 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-28页 |
| 2.1 材料 | 第22页 |
| 2.1.1 供试水稻和虫源 | 第22页 |
| 2.1.2 供试农药 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 褐飞虱的药剂处理、脂肪体的收集 | 第22-23页 |
| 2.2.2 蛋白质的提取和定量 | 第23页 |
| 2.2.3 iTRAQ标记和SCX分离 | 第23-24页 |
| 2.2.4 基于QE(Q-EXACTIVE)的液质联用分析 | 第24页 |
| 2.3 数据分析 | 第24-28页 |
| 2.3.1 鉴定到蛋白的生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2.3.2 差异蛋白质的生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-41页 |
| 3.1 整体蛋白质表达谱 | 第28-32页 |
| 3.1.1 功能类别的GO分析 | 第30-32页 |
| 3.1.2 Patway分析 | 第32页 |
| 3.2 差异表达蛋白质的生物信息学分析 | 第32-41页 |
| 3.2.1 差异蛋白质的功能分类 | 第34-37页 |
| 3.2.2 差异蛋白质的Pathway分析 | 第37-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| 第三章 小G蛋白Ras对褐飞虱生殖力的影响 | 第45-65页 |
| 1 前言 | 第45-46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-56页 |
| 2.1 材料 | 第46页 |
| 2.1.1 供试水稻和虫源 | 第46页 |
| 2.1.2 供试农药 | 第46页 |
| 2.2 方法 | 第46-56页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第46-47页 |
| 2.2.2 cDNA合成 | 第47-48页 |
| 2.2.3 设计简并引物、合成中间片段并纯化 | 第48-50页 |
| 2.2.4 大肠杆菌菌(E.coli)DH5α感受态细胞的转化 | 第50页 |
| 2.2.5 试剂盒合成dsRNA | 第50-54页 |
| 2.2.7 药剂处理 | 第54-55页 |
| 2.2.8 褐飞虱短翅雌成虫脂肪体和卵巢蛋白质含量的测定 | 第55页 |
| 2.2.9 褐飞虱短翅雌成虫脂肪体和卵巢可溶性糖含量的测定 | 第55-56页 |
| 2.2.10 褐飞虱产卵前期、产卵量、产卵期和寿命的测定 | 第56页 |
| 2.3 数据分析 | 第56页 |
| 3. 结果与分析 | 第56-62页 |
| 3.1 褐飞虱小G蛋白基因dsRas的合成 | 第56-58页 |
| 3.2 敲除靶标基因对褐飞虱体内基因表达量的影响 | 第58-60页 |
| 3.2.1 褐飞虱Ras基因的定量PCR检测引物 | 第58-59页 |
| 3.2.2 RNAi后NlRas的基因表达情况 | 第59-60页 |
| 3.3 NlRas敲除对生殖的影响 | 第60页 |
| 3.4 敲除靶标基因对褐飞虱卵巢和脂肪体蛋白质含量的影响 | 第60-61页 |
| 3.5 敲除靶标基因对褐飞虱卵巢和脂肪体可溶性糖含量的影响 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 第四章 依赖cAMP的蛋白激酶1(Pka)对褐飞虱生殖力的影响 | 第65-84页 |
| 1 前言 | 第65-66页 |
| 2 材料与方法 | 第66-75页 |
| 2.1 材料 | 第66页 |
| 2.1.1 供试水稻和虫源 | 第66页 |
| 2.1.2 供试农药 | 第66页 |
| 2.2 方法 | 第66-75页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第66-67页 |
| 2.2.2 cDNA合成 | 第67-68页 |
| 2.2.3 设计简并引物、合成中间片段并纯化 | 第68-70页 |
| 2.2.4 大肠杆菌菌(E.coli)DH5α感受态细胞的转化 | 第70页 |
| 2.2.5 试剂盒合成dsRNA | 第70-73页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR分析 | 第73页 |
| 2.2.7 药剂处理 | 第73-74页 |
| 2.2.8 褐飞虱短翅雌成虫脂肪体和卵巢蛋白质含量的测定 | 第74-75页 |
| 2.2.9 褐飞虱短翅雌成虫脂肪体和卵巢可溶性糖含量的测定 | 第75页 |
| 2.2.10 褐飞虱产卵前期、产卵量、产卵期和寿命的测定 | 第75页 |
| 2.3 数据分析 | 第75页 |
| 3、结果与分析 | 第75-81页 |
| 3.1 褐飞虱cAMP依赖性蛋白激酶1基因dsPka的合成 | 第75-76页 |
| 3.2 敲除靶标基因对褐飞虱体内基因表达量的影响 | 第76-78页 |
| 3.2.1 褐飞虱Pka基因的定量PCR检测引物 | 第76-77页 |
| 3.2.2 RNAi后NlPka的基因表达情况 | 第77-78页 |
| 3.3 NlPka敲除对生殖的影响 | 第78-79页 |
| 3.4 敲除NlPka对褐飞虱卵巢和脂肪体蛋白质含量的影响 | 第79-80页 |
| 3.5 敲除NlPka对褐飞虱卵巢和脂肪体可溶性糖含量的影响 | 第80-81页 |
| 4 讨论 | 第81-84页 |
| 参考文献 | 第84-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第100-101页 |
