| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 脱落酸在非生物逆境胁迫信号转导中的作用 | 第11-12页 |
| 1.2 蔗糖非发酵型蛋白激酶 | 第12-15页 |
| 1.3 SNRK2在ABA信号转导途径中的作用 | 第15-16页 |
| 1.4 SN RK2下游底物 | 第16-18页 |
| 1.5 转移PCR | 第18-19页 |
| 1.6 立题依据 | 第19-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-34页 |
| 2.1 技术路线 | 第21页 |
| 2.2 响应ABA诱导的ZMSNRK2底物蛋白预测 | 第21页 |
| 2.3 ZMSNRK2基因及ZMSNRK2预测底物基因克隆 | 第21-27页 |
| 2.3.1 总RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.3.2 反转录合成CDNA第一链 | 第22-23页 |
| 2.3.3 开放阅读框扩增 | 第23-25页 |
| 2.3.4 目的片段的回收纯化 | 第25页 |
| 2.3.5 3 '端加多聚A与克隆载体连接 | 第25-26页 |
| 2.3.6 大肠杆菌的热激转化 | 第26页 |
| 2.3.7 重组质粒检测 | 第26-27页 |
| 2.4 ZMSNRK2体外磷酸化检测 | 第27-32页 |
| 2.4.1 菌液扩大培养和质粒提取 | 第27-28页 |
| 2.4.2 T-PCR构建体外磷酸化载体 | 第28-30页 |
| 2.4.3 试剂配制 | 第30页 |
| 2.4.4 原生质体制备 | 第30-31页 |
| 2.4.5 原生质体的共转化 | 第31-32页 |
| 2.5 酵母双杂交 | 第32-34页 |
| 2.5.1 载体构建 | 第32页 |
| 2.5.2 自体磷酸化检测 | 第32-33页 |
| 2.5.3 酵母双杂交 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-42页 |
| 3.1 响应ABA诱导的ZMSNRK2预测底物蛋白 | 第34-36页 |
| 3.2 ZMSNRK2基因亚家族实际包含10个成员 | 第36-37页 |
| 3.3 ZMSNRK2预测底物蛋白基因OFR序列 | 第37-38页 |
| 3.4 ZMSNRK2体外磷酸化对ABA诱导的响应 | 第38-40页 |
| 3.5 ZMSNRK2预测底物蛋白自磷酸化 | 第40页 |
| 3.6 ZMSNRK2与其预测底物蛋白的相互作用 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 4.1 参与ABA信号转导的ZMSNRK2亚家族成员 | 第42页 |
| 4.2 转导ABA信号的ZMSNRK2底物蛋白 | 第42页 |
| 4.3 转移PCR条件的优化 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第51页 |
