摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 引言 | 第10-30页 |
1.1 流感病毒概述 | 第10-13页 |
1.2 甲型流感病毒发展及现状 | 第13-16页 |
1.2.1 甲型流感病毒的进化 | 第13-14页 |
1.2.2 甲型流感疫情的发展 | 第14-16页 |
1.3 甲型流感病毒诊断技术研究进展 | 第16-27页 |
1.3.1 胶体金免疫层析技术 | 第17-18页 |
1.3.2 血清学诊断 | 第18页 |
1.3.3 酶联免疫吸附法(ELISA) | 第18-19页 |
1.3.4 聚合酶链式反应 | 第19-20页 |
1.3.5 环介导逆转录等温核酸扩增技术 | 第20-24页 |
1.3.6 竞争性互补介导核酸恒温扩增技术(CAMP) | 第24-26页 |
1.3.7 微流控芯片技术 | 第26-27页 |
1.4 本论文的选题依据及研究内容 | 第27-30页 |
1.4.1 选题依据及意义 | 第27-29页 |
1.4.2 研究内容 | 第29-30页 |
第2章 材料与方法 | 第30-40页 |
2.1 实验材料 | 第30-32页 |
2.1.1 实验毒株 | 第30页 |
2.1.2 实验试剂和设备 | 第30-31页 |
2.1.3 病毒基因人工质粒的构建及DNA模板制备 | 第31-32页 |
2.2 LAMP实验方法 | 第32-36页 |
2.2.1 保守靶序列筛选及LAMP引物设计筛选 | 第32页 |
2.2.2 基因人工质粒的构建及DNA模板的制备 | 第32-33页 |
2.2.3 甲型流感病毒的体外转录RNA制备及病毒样本RNA提取 | 第33-34页 |
2.2.4 RT-LAMP扩增体系条件的建立 | 第34-35页 |
2.2.5 敏感性评价 | 第35页 |
2.2.6 凝胶电泳实验 | 第35-36页 |
2.2.7 统计学分析 | 第36页 |
2.3 CAMP实验方法 | 第36-39页 |
2.3.1 保守靶序列筛选及CAMP引物设计筛选 | 第36-37页 |
2.3.2 基因人工质粒的构建及DNA模板的制备 | 第37页 |
2.3.3 甲型流感病毒的体外转录RNA制备及病毒样本RNA提取 | 第37-38页 |
2.3.4 RT-CAMP扩增体系条件的建立 | 第38-39页 |
2.4 多重微流控LAMP芯片的建立 | 第39-40页 |
第3章 结果 | 第40-68页 |
3.1 LAMP方法检测甲型流感病毒 | 第40-58页 |
3.1.1 H序列保守靶序列及LAMP引物设计筛选 | 第40-47页 |
3.1.2 N序列保守靶序列及LAMP引物设计筛选 | 第47-52页 |
3.1.3 甲型流感病毒七种重要型别LAMP目标检测的敏感性评价 | 第52-55页 |
3.1.4 甲型流感病毒七种重要型别LAMP多重微流控芯片检测评价 | 第55-57页 |
3.1.5 甲型流感病毒七种重要型别LAMP检测的统计学分析 | 第57-58页 |
3.2 CAMP方法检测甲型流感病毒 | 第58-68页 |
3.2.1 H序列保守靶序列与CAMP引物设计评价 | 第58-63页 |
3.2.2 N序列保守靶序列与CAMP引物设计评价 | 第63-68页 |
第4章 讨论 | 第68-70页 |
4.1 甲型流感病毒LAMP微流控芯片检测方法的建立 | 第68-69页 |
4.2 甲型流感病毒CAMP检测方法的初步建立 | 第69-70页 |
第5章 结论与展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第80页 |