| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第13-24页 |
| 第一章 睾酮生成及调控机制 | 第13-20页 |
| 1.1 睾丸的解剖结构 | 第13页 |
| 1.2 睾丸间质细胞发育 | 第13-15页 |
| 1.3 睾酮合成 | 第15-16页 |
| 1.4 睾酮合成的调节机制 | 第16-20页 |
| 1.4.1 线粒体与睾酮调节 | 第17页 |
| 1.4.2 骨钙素与睾酮调节 | 第17页 |
| 1.4.3 维A酸与睾酮调节 | 第17页 |
| 1.4.4 细胞因子与睾酮调节 | 第17-18页 |
| 1.4.5 激素与睾酮调节 | 第18页 |
| 1.4.6 核受体与睾酮调节 | 第18-20页 |
| 第二章 CREBZF功能与作用机制 | 第20-24页 |
| 2.1 CREBZF结构与调控方式 | 第20页 |
| 2.2 CREBZF生物学功能及作用机制 | 第20-24页 |
| 2.2.1 CREBZF与未折叠蛋白反应 | 第20-22页 |
| 2.2.2 CREBZF与细胞增殖和凋亡 | 第22页 |
| 2.2.3 CREBZF与核受体调节 | 第22-23页 |
| 2.2.4 CREBZF与雌性生殖 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-65页 |
| 第三章 CREBZF在小鼠睾丸中的表达和定位 | 第24-33页 |
| 3.1 试验材料 | 第24-25页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第24页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第25页 |
| 3.2 试验方法 | 第25-29页 |
| 3.2.1 不同发育阶段小鼠睾丸石蜡切片的制备 | 第25-26页 |
| 3.2.2 免疫组织化学染色 | 第26页 |
| 3.2.3 小鼠睾丸组织RNA提取 | 第26-27页 |
| 3.2.4 RT-PCR | 第27页 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 3.2.6 睾丸组织蛋白提取与浓度测定 | 第28页 |
| 3.2.7 蛋白免疫印迹(WesternBlot) | 第28-29页 |
| 3.2.8 数据统计分析 | 第29页 |
| 3.3 试验结果 | 第29-31页 |
| 3.3.1 CREBZF在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达和定位 | 第29-30页 |
| 3.3.2 CREBZFmRNA在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达检测 | 第30页 |
| 3.3.3 小鼠睾丸组织中的CREBZF蛋白亚型检测分析 | 第30-31页 |
| 3.4 讨论 | 第31-32页 |
| 3.5 小结 | 第32-33页 |
| 第四章 CREBZF调节小鼠睾酮生成 | 第33-50页 |
| 4.1 试验材料 | 第33-34页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第33页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第34页 |
| 4.2 试验方法 | 第34-39页 |
| 4.2.1 人绒毛膜促性腺激素(hCG)在体注射小鼠 | 第34页 |
| 4.2.2 小鼠原代睾丸间质细胞分离培养及鉴定 | 第34-35页 |
| 4.2.3 ELISA方法检测睾酮含量 | 第35页 |
| 4.2.4 细胞免疫荧光 | 第35页 |
| 4.2.5 CREBZF干扰慢病毒载体的扩增和鉴定 | 第35-37页 |
| 4.2.6 CREBZF干扰慢病毒包装 | 第37-38页 |
| 4.2.7 慢病毒转染MLTC1细胞 | 第38页 |
| 4.2.8 慢病毒显微注射小鼠睾丸 | 第38页 |
| 4.2.9 siRNA转染小鼠睾丸间质细胞 | 第38-39页 |
| 4.2.10 实时荧光定量PCR | 第39页 |
| 4.3 试验结果 | 第39-47页 |
| 4.3.1 原代睾丸间质细胞的分离培养及鉴定 | 第39页 |
| 4.3.2 人绒毛膜促性腺激素(hCG)对CREBZF的调节作用 | 第39-42页 |
| 4.3.3 慢病毒载体鉴定结果 | 第42页 |
| 4.3.4 CREBZF对小鼠睾酮的调节作用 | 第42-44页 |
| 4.3.5 CREBZF对MLTC1睾酮合成的调节 | 第44-46页 |
| 4.3.6 CREBZF对原代睾丸间质细胞睾酮合成的调节 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-49页 |
| 4.5 小结 | 第49-50页 |
| 第五章 CREBZF影响睾酮生成的作用机制 | 第50-65页 |
| 5.1 试验材料 | 第50-51页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第50-51页 |
| 5.1.2 试验仪器 | 第51页 |
| 5.2 试验方法 | 第51-57页 |
| 5.2.1 CREBZF重组过表达载体构建 | 第51-54页 |
| 5.2.2 CREBZF重组过表达载体瞬时转染原代睾丸间质细胞 | 第54页 |
| 5.2.3 实时荧光定量PCR | 第54-55页 |
| 5.2.4 重组质粒pNur77-luc和pSF-1-luc的构建 | 第55-56页 |
| 5.2.5 Nur77和SF-1启动子活性验证 | 第56页 |
| 5.2.6 双荧光素酶活性检测 | 第56-57页 |
| 5.3 试验结果 | 第57-63页 |
| 5.3.1 CREBZF基因扩增 | 第57页 |
| 5.3.2 CREBZF基因回收纯化 | 第57-58页 |
| 5.3.3 pMD19-T-CREBZF酶切鉴定 | 第58页 |
| 5.3.4 pCDNA3-CREBZF酶切鉴定 | 第58-59页 |
| 5.3.5 CREBZF过表达重组载体瞬时转染原代睾丸间质细胞 | 第59-60页 |
| 5.3.6 CREBZF调节类固醇合成酶的表达 | 第60-61页 |
| 5.3.7 CREBZF调节核受体的表达 | 第61页 |
| 5.3.8 小鼠Nur77和SF-1启动子重组载体酶切鉴定结果 | 第61-62页 |
| 5.3.9 Nur77和SF-1启动子活性验证 | 第62-63页 |
| 5.3.10 CREBZF对Nur77和SF-1启动子的调节作用 | 第63页 |
| 5.4 讨论 | 第63-64页 |
| 5.5 小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
