摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-11页 |
第一章 纤维素降解酶及其多酶复合体研究进展 | 第15-35页 |
1.1 纤维素酶的研究概况 | 第15-18页 |
1.1.1 纤维素酶的组成 | 第15-16页 |
1.1.2 纤维素酶的来源及发酵生产 | 第16-17页 |
1.1.3 纤维素酶的性质 | 第17页 |
1.1.4 纤维素酶的基因表达 | 第17-18页 |
1.2 纤维素酶多酶复合体研究进展 | 第18-30页 |
1.2.1 纤维素酶多酶复合体研究概况 | 第18-19页 |
1.2.2 纤维素酶多酶复合体的结构 | 第19-20页 |
1.2.3 锚定蛋白与粘附蛋白的相互作用 | 第20-22页 |
1.2.4 纤维素酶多酶复合体的催化组分 | 第22-24页 |
1.2.5 原核微生物(梭菌)的多酶复合体 | 第24-29页 |
1.2.6 人工设计型纤维素酶多酶复合体 | 第29-30页 |
1.3 枯草芽孢杆菌分泌表达系统研究进展 | 第30-35页 |
1.3.1 枯草芽孢杆菌的表达系统概述 | 第30-31页 |
1.3.2 枯草芽孢杆菌的常用载体 | 第31页 |
1.3.3 枯草芽孢杆菌表达系统的启动子 | 第31-32页 |
1.3.4 枯草杆菌表达系统的现状及发展方向 | 第32-35页 |
第二章 产纤维素酶芽孢杆菌的筛选及其基因克隆 | 第35-53页 |
2.1 材料与方法 | 第35-40页 |
2.1.1 材料 | 第35页 |
2.1.2 试验方法 | 第35-40页 |
2.2 结果与分析 | 第40-50页 |
2.2.1 产纤维素酶芽孢杆菌的分离筛选 | 第40-41页 |
2.2.2 纤维降解菌株ZC-5的鉴定 | 第41-44页 |
2.2.3 BacillussubtilisZC-5生长特性与产酶特性分析 | 第44-46页 |
2.2.4 不同来源纤维素对BacillussubtilisZC-5产纤维素酶的影响 | 第46-47页 |
2.2.5 BacillussubtilisZC-5纤维素酶基因的克隆 | 第47-50页 |
2.3 讨论 | 第50-52页 |
2.4 小结 | 第52-53页 |
第三章 枯草芽孢杆菌信号肽的筛选 | 第53-78页 |
3.1 材料与方法 | 第53-65页 |
3.1.1 菌株和质粒及其来源 | 第53-54页 |
3.1.2 生化试剂 | 第54-55页 |
3.1.3 试验所用引物 | 第55-62页 |
3.1.4 信号肽筛选载体的构建 | 第62页 |
3.1.5 B.subtilis的培养 | 第62-63页 |
3.1.6 信号肽筛选表达库的构建 | 第63-65页 |
3.1.7 大肠杆菌与枯草芽孢杆菌的转化方法 | 第65页 |
3.1.8 木聚糖酶活性检测 | 第65页 |
3.1.9 数据分析 | 第65页 |
3.2 结果与分析 | 第65-75页 |
3.2.1 信号肽筛选载体的构建 | 第65页 |
3.2.2 信号肽筛选表达库的构建 | 第65-66页 |
3.2.3 P43启动子介导的木聚糖酶分泌表达 | 第66页 |
3.2.4 Pglvm启动子介导的木聚糖酶分泌表达 | 第66-71页 |
3.2.5 信号肽序列与分泌表达水平分析 | 第71-75页 |
3.3 讨论 | 第75-76页 |
3.4 小结 | 第76-78页 |
第四章 纤维素酶分泌表达 | 第78-96页 |
4.1 材料与方法 | 第78-82页 |
4.1.1 菌株和质粒及其来源 | 第78-79页 |
4.1.2 PCR扩增引物 | 第79页 |
4.1.3 分泌表达载体的构建 | 第79-80页 |
4.1.4 大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的转化 | 第80页 |
4.1.5 纤维素内切酶酶活测定 | 第80页 |
4.1.6 纤维素外切酶酶活测定 | 第80页 |
4.1.7 木聚糖酶酶活测定 | 第80页 |
4.1.8 纤维素酶与木聚糖酶协同降解测定 | 第80-81页 |
4.1.9 多酶复合体的组装 | 第81-82页 |
4.2 结果与分析 | 第82-92页 |
4.2.1 分泌表达载体的构建 | 第82-86页 |
4.2.2 重组纤维素和木聚糖酶的分泌表达 | 第86-89页 |
4.2.3 纤维素酶的协同降解效果 | 第89-90页 |
4.2.4 多酶复合体酶的协同降解效果 | 第90-92页 |
4.3 讨论 | 第92-94页 |
4.4 小结 | 第94-96页 |
第五章 结论 | 第96-98页 |
5.1 研究结论 | 第96-97页 |
5.2 本研究创新点 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-108页 |
附录 | 第108-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
个人简介 | 第114页 |