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纤维素酶系在枯草芽孢杆菌中的分泌表达及高效协同作用的研究

摘要第6-8页
abstract第8-11页
第一章 纤维素降解酶及其多酶复合体研究进展第15-35页
    1.1 纤维素酶的研究概况第15-18页
        1.1.1 纤维素酶的组成第15-16页
        1.1.2 纤维素酶的来源及发酵生产第16-17页
        1.1.3 纤维素酶的性质第17页
        1.1.4 纤维素酶的基因表达第17-18页
    1.2 纤维素酶多酶复合体研究进展第18-30页
        1.2.1 纤维素酶多酶复合体研究概况第18-19页
        1.2.2 纤维素酶多酶复合体的结构第19-20页
        1.2.3 锚定蛋白与粘附蛋白的相互作用第20-22页
        1.2.4 纤维素酶多酶复合体的催化组分第22-24页
        1.2.5 原核微生物(梭菌)的多酶复合体第24-29页
        1.2.6 人工设计型纤维素酶多酶复合体第29-30页
    1.3 枯草芽孢杆菌分泌表达系统研究进展第30-35页
        1.3.1 枯草芽孢杆菌的表达系统概述第30-31页
        1.3.2 枯草芽孢杆菌的常用载体第31页
        1.3.3 枯草芽孢杆菌表达系统的启动子第31-32页
        1.3.4 枯草杆菌表达系统的现状及发展方向第32-35页
第二章 产纤维素酶芽孢杆菌的筛选及其基因克隆第35-53页
    2.1 材料与方法第35-40页
        2.1.1 材料第35页
        2.1.2 试验方法第35-40页
    2.2 结果与分析第40-50页
        2.2.1 产纤维素酶芽孢杆菌的分离筛选第40-41页
        2.2.2 纤维降解菌株ZC-5的鉴定第41-44页
        2.2.3 BacillussubtilisZC-5生长特性与产酶特性分析第44-46页
        2.2.4 不同来源纤维素对BacillussubtilisZC-5产纤维素酶的影响第46-47页
        2.2.5 BacillussubtilisZC-5纤维素酶基因的克隆第47-50页
    2.3 讨论第50-52页
    2.4 小结第52-53页
第三章 枯草芽孢杆菌信号肽的筛选第53-78页
    3.1 材料与方法第53-65页
        3.1.1 菌株和质粒及其来源第53-54页
        3.1.2 生化试剂第54-55页
        3.1.3 试验所用引物第55-62页
        3.1.4 信号肽筛选载体的构建第62页
        3.1.5 B.subtilis的培养第62-63页
        3.1.6 信号肽筛选表达库的构建第63-65页
        3.1.7 大肠杆菌与枯草芽孢杆菌的转化方法第65页
        3.1.8 木聚糖酶活性检测第65页
        3.1.9 数据分析第65页
    3.2 结果与分析第65-75页
        3.2.1 信号肽筛选载体的构建第65页
        3.2.2 信号肽筛选表达库的构建第65-66页
        3.2.3 P43启动子介导的木聚糖酶分泌表达第66页
        3.2.4 Pglvm启动子介导的木聚糖酶分泌表达第66-71页
        3.2.5 信号肽序列与分泌表达水平分析第71-75页
    3.3 讨论第75-76页
    3.4 小结第76-78页
第四章 纤维素酶分泌表达第78-96页
    4.1 材料与方法第78-82页
        4.1.1 菌株和质粒及其来源第78-79页
        4.1.2 PCR扩增引物第79页
        4.1.3 分泌表达载体的构建第79-80页
        4.1.4 大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的转化第80页
        4.1.5 纤维素内切酶酶活测定第80页
        4.1.6 纤维素外切酶酶活测定第80页
        4.1.7 木聚糖酶酶活测定第80页
        4.1.8 纤维素酶与木聚糖酶协同降解测定第80-81页
        4.1.9 多酶复合体的组装第81-82页
    4.2 结果与分析第82-92页
        4.2.1 分泌表达载体的构建第82-86页
        4.2.2 重组纤维素和木聚糖酶的分泌表达第86-89页
        4.2.3 纤维素酶的协同降解效果第89-90页
        4.2.4 多酶复合体酶的协同降解效果第90-92页
    4.3 讨论第92-94页
    4.4 小结第94-96页
第五章 结论第96-98页
    5.1 研究结论第96-97页
    5.2 本研究创新点第97-98页
参考文献第98-108页
附录第108-113页
致谢第113-114页
个人简介第114页

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