| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第9-21页 |
| 一、衰老的表观遗传调控 | 第9-12页 |
| (一)DNA甲基化 | 第9-10页 |
| (二)染色质重塑对衰老的调控 | 第10页 |
| (三)组蛋白修饰 | 第10-12页 |
| 二、秀丽隐杆线虫是研究衰老调控的主要模式生物之一 | 第12-13页 |
| 三、WDR-5的研究进展 | 第13-16页 |
| (一)WDR-5的命名 | 第13页 |
| (二)WDR-5与组蛋白精氨酸甲基化修饰之间存在的关联 | 第13-15页 |
| (三)WDR-5对秀丽线虫衰老的调控 | 第15-16页 |
| 四、精氨酸甲基转移酶PRMT- | 第16-18页 |
| (一)蛋白精氨酸甲基转移酶家族(PRMTs) | 第16-17页 |
| (二)PRMT-1在哺乳动物中的功能 | 第17页 |
| (三)PRMT-1在秀丽线虫中的功能 | 第17-18页 |
| 五、DAF-16的研究进展 | 第18-19页 |
| (一)DAF-16基因 | 第18-19页 |
| (二)DAF-16参与衰老调控的信号通路 | 第19页 |
| (三)DAF-16的蛋白翻译后修饰对衰老调控的影响 | 第19页 |
| 六、研究内容及意义 | 第19-21页 |
| (一)立体依据 | 第19-20页 |
| (二)研究内容和意义 | 第20-21页 |
| 实验材料与方法 | 第21-36页 |
| 一、实验材料 | 第21-23页 |
| (一)线虫品系 | 第21页 |
| (二)菌株与载体 | 第21页 |
| (三)主要试剂 | 第21-22页 |
| (四)主要仪器 | 第22-23页 |
| 二、实验方法 | 第23-36页 |
| (一)试剂及培养基的配置 | 第23-25页 |
| (二)线虫培养 | 第25-26页 |
| (三)线虫CDNA的获取 | 第26-27页 |
| (四)线虫基因组获取 | 第27页 |
| (五)线虫的RNAI处理 | 第27-28页 |
| (六)干涉质粒(set-2RNAi,ash-2RNAi)构建 | 第28-30页 |
| (七)线虫寿命统计 | 第30页 |
| (八)Real-timePCR验证靶基因表达情况 | 第30-31页 |
| (九)激光共聚焦检测基因在线虫体内入核情况 | 第31-32页 |
| (十)Westernblot检测 | 第32-34页 |
| (十一)免疫共沉淀(Co-IP) | 第34-35页 |
| (十二)GST-pulldown | 第35-36页 |
| 实验结果与分析 | 第36-42页 |
| 一、WDR-5对线虫衰老的促进作用依赖于PRMT- | 第36-37页 |
| 二、WDR-5与PRMT-1相互结合 | 第37-38页 |
| 三、WDR-5促进线虫衰老依赖于转录因子DAF- | 第38-39页 |
| 四、WDR-5依赖于PRMT-1抑制DAF-16下游靶基因的表达 | 第39页 |
| 五、WDR-5依赖于PRMT-1抑制DAF-16入核 | 第39-40页 |
| 六、WDR-5抑制PRMT-1与DAF-16的结合 | 第40-42页 |
| 讨论 | 第42-43页 |
| 主要结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
