| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 缩略词语表 | 第16-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-35页 |
| 1.1 植物生长素运输载体 | 第18-21页 |
| 1.1.1 生长素运输载体简介 | 第18-20页 |
| 1.1.2 PIN家族简介与分类 | 第20-21页 |
| 1.2 PIN在生长发育过程的作用 | 第21-25页 |
| 1.2.1 PIN调控胚发育 | 第22-23页 |
| 1.2.2 PIN调控根生长 | 第23页 |
| 1.2.3 PIN参与地上部器官发育与形态建成 | 第23-24页 |
| 1.2.4 PIN调控向性生长反应 | 第24-25页 |
| 1.2.5 PIN调控细胞内生长素动态平衡 | 第25页 |
| 1.3 内外源因子对PIN的调控 | 第25-31页 |
| 1.3.1 PIN蛋白胞内循环过程及相关调控因子 | 第25-28页 |
| 1.3.1.1 PIN胞内循环 | 第25-26页 |
| 1.3.1.2 泛素化与PIN蛋白降解 | 第26-27页 |
| 1.3.1.3 PIN磷酸化 | 第27-28页 |
| 1.3.2 激素对PIN的调控 | 第28-30页 |
| 1.3.2.1 生长素对PIN的调控 | 第28-29页 |
| 1.3.2.2 其他激素对PIN的调控 | 第29-30页 |
| 1.3.3 环境因子对PIN的调控 | 第30-31页 |
| 1.4 激素对器官脱落的的调控 | 第31-33页 |
| 1.4.1 内源生长素下降与脱落 | 第31-33页 |
| 1.4.2 IDA信号通路与脱落 | 第33页 |
| 1.4.3 其他激素与脱落的关系 | 第33页 |
| 1.5 本研究的目的及主要研究内容 | 第33-35页 |
| 第二章 番茄SlPIN家族在花柄脱落过程中表达及调控分析 | 第35-52页 |
| 2.1 材料与方法 | 第35-38页 |
| 2.1.1 植物材料及生长条件 | 第35页 |
| 2.1.2 番茄SlPIN蛋白家族生物信息学分析 | 第35页 |
| 2.1.3 番茄花器官、花柄外植体取样 | 第35-36页 |
| 2.1.4 番茄花柄外植体处理 | 第36页 |
| 2.1.5 番茄花柄脱落率调查 | 第36页 |
| 2.1.6 RNA提取及微滴式数字PCR(ddPCR)分析 | 第36页 |
| 2.1.7 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第36-37页 |
| 2.1.8 原位杂交 | 第37页 |
| 2.1.9 数据分析 | 第37-38页 |
| 2.2 结果与分析 | 第38-49页 |
| 2.2.1 番茄SlPIN蛋白家族生物信息学分析 | 第38-40页 |
| 2.2.2 SlPIN基因家族在番茄花柄中表达分析 | 第40页 |
| 2.2.3 番茄花柄开花期外植体脱落率调查 | 第40-41页 |
| 2.2.4 番茄花柄脱落过程中SlPIN基因表达分析 | 第41-43页 |
| 2.2.5 番茄花柄脱落过程中SlPIN1原位杂交 | 第43-45页 |
| 2.2.6 番茄花柄脱落过程中SlPIN基因对生长素的响应 | 第45-47页 |
| 2.2.7 番茄花柄脱落过程中SlPIN基因对乙烯的响应 | 第47-49页 |
| 2.3 讨论 | 第49-52页 |
| 2.3.1 番茄SlPIN蛋白可能拥有不同的亚细胞定位和生长素运输功能 | 第49页 |
| 2.3.2 SlPIN可能参与番茄花柄中多种生长素运输调控 | 第49-50页 |
| 2.3.3 SlPIN基因表达对番茄花柄脱落各阶段的作用分析 | 第50页 |
| 2.3.4 番茄花柄脱落过程中生长素对SlPIN基因表达具有不同的调控作用 | 第50-51页 |
| 2.3.5 乙烯可能通过调控SlPIN基因表达影响脱落过程中生长素运输 | 第51-52页 |
| 第三章 SlPIN1和SlPIN4在介导番茄花器官生长素运输及花柄脱落中的功能 | 第52-63页 |
| 3.1 材料与方法 | 第52-55页 |
| 3.1.1 植物材料及生长条件 | 第52页 |
| 3.1.2 病毒诱导基因沉默(VIGS) | 第52-53页 |
| 3.1.3 pTRV-SlPIN植株qRT-PCR鉴定 | 第53页 |
| 3.1.4 番茄花柄脱落率调查 | 第53页 |
| 3.1.5 GUS染色 | 第53页 |
| 3.1.6 内源IAA浓度检测 | 第53页 |
| 3.1.7 非损伤微测技术(Non-invasiveMicro-testTechnology,NMT)检测番茄花柄离区IAA流速 | 第53-54页 |
| 3.1.8 IAA预处理pTRV-SlPIN1和pTRV-SlPIN4植株花柄外植体及脱落率检测 | 第54页 |
| 3.1.9 数据分析 | 第54-55页 |
| 3.2 结果与分析 | 第55-61页 |
| 3.2.1 pTRV-SlPIN1、pTRV-SlPIN3和pTRV-SlPIN4植株构建与有效沉默植株筛选 | 第55-57页 |
| 3.2.2 沉默SlPIN1和SlPIN4导致番茄花柄外植体加速脱落 | 第57页 |
| 3.2.3 沉默SlPIN1和SlPIN4削弱了番茄花器官中生长素的源库运输 | 第57-60页 |
| 3.2.4 IAA预处理条件下pTRV-SlPIN1和pTRV-SlPIN4花柄外植体脱落减缓 | 第60-61页 |
| 3.3 讨论 | 第61-63页 |
| 3.3.1 SlPIN1和SlPIN4是番茄花器官生长素源库运输的关键调控因子 | 第61-62页 |
| 3.3.2 Sl PIN1和SlPIN4通过促进生长素向基性运输影响花柄离区生长素积累和脱落 | 第62-63页 |
| 第四章 SlPIN1和SlPIN4蛋白调控番茄花柄脱落机理分析 | 第63-71页 |
| 4.1 材料与方法 | 第63-65页 |
| 4.1.1 植物材料及生长条件 | 第63页 |
| 4.1.2 MG132处理与番茄花柄外植体脱落率检测 | 第63-64页 |
| 4.1.3 WesternBlot检测SlPIN1和SlPIN4蛋白量 | 第64页 |
| 4.1.4 GUS染色检测脱落过程中花柄生长素分布 | 第64-65页 |
| 4.1.5 非损伤微测技术(NMT)检测脱落过程中花柄离区IAA流速 | 第65页 |
| 4.1.6 数据分析 | 第65页 |
| 4.2 结果与分析 | 第65-68页 |
| 4.2.1 MG132处理促进番茄花柄脱落 | 第65-66页 |
| 4.2.2 番茄花柄脱落过程中离区SlPIN1和SlPIN4蛋白量变化及MG132处理对其蛋白量的影响 | 第66-67页 |
| 4.2.3 番茄花柄脱落过程中MG132对生长素分布与流速的影响 | 第67-68页 |
| 4.3 讨论 | 第68-71页 |
| 4.3.1 脱落过程中离区生长素运输速率与分布变化分析 | 第68-69页 |
| 4.3.2 脱落过程中SlPIN1和SlPIN4蛋白通过增强生长素向基性运输促进脱落 | 第69页 |
| 4.3.3 脱落过程中存在翻译后水平调控机制提高SlPIN1和SlPIN4蛋白积累 | 第69-71页 |
| 第五章 SlPIN1和SlPIN4蛋白极性定位对番茄花柄脱落的调控作用 | 第71-83页 |
| 5.1 材料与方法 | 第71-73页 |
| 5.1.1 植物材料及生长条件 | 第71页 |
| 5.1.2 BrefeldinA(BFA)处理番茄花柄外植体脱落率检测 | 第71-72页 |
| 5.1.3 GUS检测 | 第72页 |
| 5.1.4 PIN蛋白序列比对 | 第72页 |
| 5.1.5 模拟磷酸化定点突变与瞬时表达试验 | 第72页 |
| 5.1.6 数据分析 | 第72-73页 |
| 5.2 结果与分析 | 第73-80页 |
| 5.2.1 BFA处理延缓番茄花柄脱落 | 第73-74页 |
| 5.2.2 BFA处理导致脱落过程中花柄纵向横向生长素分布异常 | 第74-76页 |
| 5.2.3 脱落过程中显著变化的磷酸化位点 | 第76-78页 |
| 5.2.4 磷酸化对PIN蛋白极性定位的影响 | 第78-80页 |
| 5.3 讨论 | 第80-83页 |
| 5.3.1 脱落过程中SlPIN1和SlPIN4可能存在未知的磷酸化调控途径 | 第80-81页 |
| 5.3.2 脱落过程中SlPIN1和SlPIN4蛋白极性定位对生长素运输与分布的作用 | 第81-82页 |
| 5.3.3 脱落过程中乙烯对SlPIN翻译后水平调控 | 第82-83页 |
| 第六章 全文总结 | 第83-86页 |
| 本论文的特色与创新之处 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-99页 |
| 附录 | 第99-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第106-107页 |
