| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 本课题研究的背景及意义 | 第11-19页 |
| 1.1.1 ALA 的合成途径 | 第11-15页 |
| 1.1.2 ALA 的应用 | 第15-19页 |
| 1.1.3 ALA 的稳定性 | 第19页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第19-20页 |
| 1.3 本课题的研究内容 | 第20-21页 |
| 第2章 ALA 产生菌的筛选及分子生物学鉴定 | 第21-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 实验药品 | 第21页 |
| 2.1.2 实验仪器设备 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 ALA 的测定方法[Ehrlich’s 试剂显色法测定ALA] | 第21-22页 |
| 2.2.2 常用试剂的配制 | 第22页 |
| 2.2.3 样品的测定 | 第22-23页 |
| 2.2.4 ALA 产生菌的富集与分离 | 第23页 |
| 2.2.5 菌株的分子生物学鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第24-29页 |
| 2.3.1 ALA 产生菌的初筛结果 | 第24-25页 |
| 2.3.2 ALA 高产菌株的复筛 | 第25-27页 |
| 2.3.3 菌株G-污泥Ⅱ初步鉴定 | 第27-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第3章 菌株 G-污泥Ⅱ生长特性的研究 | 第30-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 实验药品 | 第30页 |
| 3.1.2 实验仪器设备 | 第30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-32页 |
| 3.2.1 ALA 标准曲线的制作 | 第30页 |
| 3.2.2 培养基中的碳、氮源种类对菌体生长及 ALA 积累的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.3 黑暗好氧、光照厌氧培养对菌体生长及 ALA 积累的影响 | 第31页 |
| 3.2.4 接种量对菌体生长及 ALA 积累的影响 | 第31页 |
| 3.2.5 摇瓶装液量对菌体生长及 ALA 积累的影响 | 第31页 |
| 3.2.6 前体对菌体生长及ALA 积累的影响 | 第31页 |
| 3.2.7 醋酸铅对菌体生长及 ALA 积累的影响 | 第31-32页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第32-47页 |
| 3.3.1 ALA 标准曲线的绘制 | 第32-33页 |
| 3.3.2 碳源对菌体生长及ALA 积累的影响 | 第33页 |
| 3.3.3 不同氮源对菌体生长及ALA 积累的影响 | 第33-35页 |
| 3.3.4 黑暗好氧、光照厌氧培养对菌体生长及 ALA 积累的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.5 接种量的选择 | 第36-37页 |
| 3.3.6 不同装液量的选择 | 第37-38页 |
| 3.3.7 前体对菌体生长及ALA 积累的影响 | 第38-43页 |
| 3.3.8 醋酸铅对菌体生长及 ALA 积累的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.9 最佳发酵条件下的菌体生长及 ALA 合成情况 | 第44-47页 |
| 3.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第4章 菌种 G-污泥Ⅱ的诱变育种 | 第48-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第48页 |
| 4.1.1 实验药品 | 第48页 |
| 4.1.2 实验仪器设备 | 第48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-49页 |
| 4.2.1 实验流程 | 第48页 |
| 4.2.2 氯化锂、紫外协同诱变方法 | 第48-49页 |
| 4.2.3 微培养方法 | 第49页 |
| 4.2.4 摇瓶培养 | 第49页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第49-52页 |
| 4.3.1 第一批诱变结果 | 第49-50页 |
| 4.3.2 第二批诱变结果 | 第50-51页 |
| 4.3.3 第三批诱变结果 | 第51-52页 |
| 4.3.4 三次诱变结果比较 | 第52页 |
| 4.4 本章小结 | 第52-54页 |
| 第5章 ALA 合成酶基因（HEMA）的克隆与表达 | 第54-71页 |
| 5.1 试验材料 | 第54-55页 |
| 5.1.1 实验药品 | 第54-55页 |
| 5.1.2 实验仪器设备 | 第55页 |
| 5.2 实验方法 | 第55-64页 |
| 5.2.1 光合细菌G-污泥Ⅱ基因组的提取 | 第55页 |
| 5.2.2 引物设计与hem A 目的基因的扩增 | 第55-57页 |
| 5.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第57页 |
| 5.2.4 DNA 的纯化回收 | 第57-58页 |
| 5.2.5 克隆载体hemA-PEASY-T1 的构建及测序 | 第58-60页 |
| 5.2.6 原核表达载体PET30a-hemA 的构建 | 第60-62页 |
| 5.2.7 重组hemA 基因在E.coli 中的诱导表达 | 第62-63页 |
| 5.2.8 SDS-PAGE 电泳 | 第63页 |
| 5.2.9 粗酶液制备 | 第63-64页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第64-70页 |
| 5.3.1 hemA 目的基因的获得 | 第64-65页 |
| 5.3.2 TA 克隆及克隆载体hemA-PEASY-T1 的验证和测序结果 | 第65-69页 |
| 5.3.3 表达载体PET30a-hemA 的构建及酶切验证 | 第69页 |
| 5.3.4 SDS-PAGE 分析 | 第69-70页 |
| 5.4 本章小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
