摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略语表 | 第13-14页 |
第1章 H9N2亚型禽流感病毒西藏分离毒株全基因组测序及遗传进化分析 | 第14-51页 |
1. 文献综述 | 第14-23页 |
1.1 禽流感概述 | 第14-18页 |
1.2 禽流感病毒的基因组 | 第18-20页 |
1.3 禽流感病毒的变异 | 第20-21页 |
1.4 禽流感病毒的分类及流行病学研究进展 | 第21-23页 |
2. 研究目的与意义 | 第23-24页 |
3. 材料 | 第24-25页 |
3.1 SPF鸡胚 | 第24页 |
3.2 病料 | 第24页 |
3.3 参考血清 | 第24-25页 |
3.4 菌株和质粒 | 第25页 |
3.5 工具酶及主要试剂 | 第25页 |
3.6 培养基 | 第25页 |
3.7 质粒提取用缓冲液 | 第25页 |
4. 试验方法 | 第25-31页 |
4.1 病毒的分离 | 第25-26页 |
4.2 病毒鉴定 | 第26页 |
4.3 病毒RNA的提取 | 第26-27页 |
4.4 RT-PCR | 第27页 |
4.5 PCR产物回收 | 第27-28页 |
4.6 连接反应 | 第28-29页 |
4.7 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
4.8 连接产物的转化 | 第29页 |
4.9 质粒的小量制备 | 第29-30页 |
4.10 重组质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
4.11 聚合酶重组质粒的PCR鉴定 | 第30-31页 |
4.12 序列测定和分子进化分析 | 第31页 |
5. 结果 | 第31-47页 |
5.1 病毒分离 | 第31页 |
5.2 病毒鉴定 | 第31-32页 |
5.3 基因组扩增结果 | 第32-33页 |
5.4 禽流感H9N2亚型西藏分离毒株基因序列分析 | 第33-47页 |
6. 讨论与分析 | 第47-51页 |
第2章 新城疫病毒西藏分离株生物学特性研究 | 第51-83页 |
1. 文献综述 | 第51-58页 |
1.1 新城疫病毒的概述 | 第51页 |
1.2 新城疫流行病学研究进展 | 第51-52页 |
1.3 新城疫病毒的演化 | 第52-55页 |
1.4 蛋白质组学与比较蛋白质组学概述 | 第55页 |
1.5 比较蛋白质组学的应用 | 第55-58页 |
2. 研究目的与意义 | 第58-59页 |
3. 材料 | 第59-61页 |
3.1 病料 | 第59页 |
3.2 NDV标准强弱毒株及血清 | 第59页 |
3.3 鸡胚和非免疫鸡 | 第59页 |
3.4 病毒、细胞和抗体 | 第59-60页 |
3.5 菌株和质粒 | 第60页 |
3.6 试剂 | 第60页 |
3.7 仪器设备和软件 | 第60-61页 |
4. 试验方法 | 第61-68页 |
4.1 器皿准备 | 第61页 |
4.2 病毒的分离 | 第61-62页 |
4.3 病毒的鉴定 | 第62页 |
4.4 分离毒株理化特性的鉴定 | 第62-63页 |
4.5 分离株毒力的测定 | 第63页 |
4.6 NDV分离株F基因序列测定 | 第63-64页 |
4.7 藏鸡新城疫病毒感染细胞的比较蛋白质组研究 | 第64-68页 |
4.7.1 主要试剂及缓冲液的配制 | 第64页 |
4.7.2 鸡胚成纤维细胞制备 | 第64页 |
4.7.3 病毒感染及蛋白样品制备 | 第64-65页 |
4.7.4 蛋白浓度测定 | 第65页 |
4.7.5 双向凝胶电泳 | 第65-66页 |
4.7.6 凝胶扫描和图像分析 | 第66-67页 |
4.7.7 挖点 | 第67页 |
4.7.8 胶内酶解、质谱鉴定及生物信息学检 | 第67-68页 |
4.7.9 差异蛋白的Western-blot验证 | 第68页 |
4.7.10 差异蛋白质参与的信号通路分析 | 第68页 |
5. 结果 | 第68-77页 |
5.1 病毒的分离鉴定 | 第68-69页 |
5.2 血凝谱测定结果 | 第69页 |
5.3 分离株的理化特性鉴定 | 第69页 |
5.4 分离株的毒力测定结果 | 第69页 |
5.5 分离株F基因的RT-PCR和测序 | 第69-70页 |
5.6 F基因的克隆与序列比较分析 | 第70-71页 |
5.7 藏鸡新城疫病毒感染细胞的比较蛋白质组研究 | 第71-77页 |
5.7.1 新城疫病毒感染组及对照组CEF细胞蛋白样品的制备 | 第71-72页 |
5.7.2 新城疫病毒感染CEF细胞不同时间点的蛋白质图谱 | 第72页 |
5.7.3 差异蛋白点的质谱分析 | 第72-76页 |
5.7.4 差异表达蛋白质的Western-blot验证 | 第76页 |
5.7.5 差异蛋白质参与的信号通路分析 | 第76-77页 |
6 讨论与分析 | 第77-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
个人简历 | 第94-95页 |