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H9N2亚型禽流感病毒及新城疫病毒西藏分离株的生物学特性研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略语表第13-14页
第1章 H9N2亚型禽流感病毒西藏分离毒株全基因组测序及遗传进化分析第14-51页
    1. 文献综述第14-23页
        1.1 禽流感概述第14-18页
        1.2 禽流感病毒的基因组第18-20页
        1.3 禽流感病毒的变异第20-21页
        1.4 禽流感病毒的分类及流行病学研究进展第21-23页
    2. 研究目的与意义第23-24页
    3. 材料第24-25页
        3.1 SPF鸡胚第24页
        3.2 病料第24页
        3.3 参考血清第24-25页
        3.4 菌株和质粒第25页
        3.5 工具酶及主要试剂第25页
        3.6 培养基第25页
        3.7 质粒提取用缓冲液第25页
    4. 试验方法第25-31页
        4.1 病毒的分离第25-26页
        4.2 病毒鉴定第26页
        4.3 病毒RNA的提取第26-27页
        4.4 RT-PCR第27页
        4.5 PCR产物回收第27-28页
        4.6 连接反应第28-29页
        4.7 大肠杆菌感受态细胞的制备第29页
        4.8 连接产物的转化第29页
        4.9 质粒的小量制备第29-30页
        4.10 重组质粒的酶切鉴定第30页
        4.11 聚合酶重组质粒的PCR鉴定第30-31页
        4.12 序列测定和分子进化分析第31页
    5. 结果第31-47页
        5.1 病毒分离第31页
        5.2 病毒鉴定第31-32页
        5.3 基因组扩增结果第32-33页
        5.4 禽流感H9N2亚型西藏分离毒株基因序列分析第33-47页
    6. 讨论与分析第47-51页
第2章 新城疫病毒西藏分离株生物学特性研究第51-83页
    1. 文献综述第51-58页
        1.1 新城疫病毒的概述第51页
        1.2 新城疫流行病学研究进展第51-52页
        1.3 新城疫病毒的演化第52-55页
        1.4 蛋白质组学与比较蛋白质组学概述第55页
        1.5 比较蛋白质组学的应用第55-58页
    2. 研究目的与意义第58-59页
    3. 材料第59-61页
        3.1 病料第59页
        3.2 NDV标准强弱毒株及血清第59页
        3.3 鸡胚和非免疫鸡第59页
        3.4 病毒、细胞和抗体第59-60页
        3.5 菌株和质粒第60页
        3.6 试剂第60页
        3.7 仪器设备和软件第60-61页
    4. 试验方法第61-68页
        4.1 器皿准备第61页
        4.2 病毒的分离第61-62页
        4.3 病毒的鉴定第62页
        4.4 分离毒株理化特性的鉴定第62-63页
        4.5 分离株毒力的测定第63页
        4.6 NDV分离株F基因序列测定第63-64页
        4.7 藏鸡新城疫病毒感染细胞的比较蛋白质组研究第64-68页
            4.7.1 主要试剂及缓冲液的配制第64页
            4.7.2 鸡胚成纤维细胞制备第64页
            4.7.3 病毒感染及蛋白样品制备第64-65页
            4.7.4 蛋白浓度测定第65页
            4.7.5 双向凝胶电泳第65-66页
            4.7.6 凝胶扫描和图像分析第66-67页
            4.7.7 挖点第67页
            4.7.8 胶内酶解、质谱鉴定及生物信息学检第67-68页
            4.7.9 差异蛋白的Western-blot验证第68页
            4.7.10 差异蛋白质参与的信号通路分析第68页
    5. 结果第68-77页
        5.1 病毒的分离鉴定第68-69页
        5.2 血凝谱测定结果第69页
        5.3 分离株的理化特性鉴定第69页
        5.4 分离株的毒力测定结果第69页
        5.5 分离株F基因的RT-PCR和测序第69-70页
        5.6 F基因的克隆与序列比较分析第70-71页
        5.7 藏鸡新城疫病毒感染细胞的比较蛋白质组研究第71-77页
            5.7.1 新城疫病毒感染组及对照组CEF细胞蛋白样品的制备第71-72页
            5.7.2 新城疫病毒感染CEF细胞不同时间点的蛋白质图谱第72页
            5.7.3 差异蛋白点的质谱分析第72-76页
            5.7.4 差异表达蛋白质的Western-blot验证第76页
            5.7.5 差异蛋白质参与的信号通路分析第76-77页
    6 讨论与分析第77-83页
致谢第83-84页
参考文献第84-94页
个人简历第94-95页

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