| 前言 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.I LKAP 的发现 | 第12-14页 |
| 2.ILKAP 的三维结构特征 | 第14-15页 |
| 3.ILKAP 与整合素激酶信号通路的关系 | 第15-16页 |
| 4.ILKAP 与JNK 通路的关系及其对肿瘤的抑制作用 | 第16-17页 |
| 5.肿瘤组织中存在ILKAP 基因的杂合性缺失 | 第17页 |
| 6.一些肿瘤细胞及组织中存在ILKAP 基因的失活突变 | 第17-18页 |
| 7.Palladin 的结构与功能 | 第18页 |
| 8.ILKAP 与palladin 的相关性 | 第18-19页 |
| 9. 本论文的研究目的与意义 | 第19-22页 |
| 第2章 ILKAP 细胞定位的研究 | 第22-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 细胞系、菌种和质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 各种酶、主要生化试剂及抗体 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 质粒提取 | 第24-26页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| 2.2.3 DNA 的定量 | 第26页 |
| 2.2.4 目的基因的获得 | 第26-28页 |
| 2.2.5 限制性内切酶的酶切反应 | 第28-29页 |
| 2.2.6 线性质粒DNA 末端去磷酸化 | 第29页 |
| 2.2.7 琼脂糖凝胶回收试剂盒DNA 片段的回收 | 第29页 |
| 2.2.8 外源DNA 片段与质粒载体的连接反应 | 第29-30页 |
| 2.2.9 氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第30页 |
| 2.2.10 连接产物的转化 | 第30页 |
| 2.2.11 阳性菌株筛选及鉴定（PCR 和酶切） | 第30-31页 |
| 2.2.12 蛋白印记分析（Western blot） | 第31-32页 |
| 2.2.13 转染 | 第32页 |
| 2.2.14 细胞培养 | 第32-34页 |
| 2.2.15 细胞计数 | 第34页 |
| 2.2.16 用于哺乳动物转染的高纯度质粒DNA 的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.17 细胞裂解 | 第35页 |
| 2.2.18 细胞核细胞浆的分离 | 第35-36页 |
| 2.2.19 免疫荧光分析 | 第36页 |
| 2.2.20 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-51页 |
| 2.3.1 Human ILKAP 相关表达载体的构建 | 第36-40页 |
| 2.3.2 内源性ILKAP 的细胞定位 | 第40-44页 |
| 2.3.3 外源性ILKAP 的细胞定位 | 第44-48页 |
| 2.3.4 ILKAP 与Integrin 及ILK 的共定位 | 第48-51页 |
| 本章小结 | 第51-52页 |
| 第3章 ILKAP 通过INTEGRIN 通路导致细胞凋亡的研究 | 第52-62页 |
| 3.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 3.1.1 细胞系、菌株及载体质粒 | 第52页 |
| 3.1.2 试剂及抗体 | 第52-53页 |
| 3.1.3 主要实验设备 | 第53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第53页 |
| 3.2.2 细胞计数 | 第53页 |
| 3.2.3 用于哺乳动物转染的高纯度质粒DNA 的制备 | 第53页 |
| 3.2.4 转染 | 第53-54页 |
| 3.2.5 细胞裂解 | 第54页 |
| 3.2.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第54页 |
| 3.2.7 蛋白印记分析 | 第54页 |
| 3.2.8 Casepase-3 活性分析实验 | 第54页 |
| 3.2.9 MTT 细胞存活率实验 | 第54-55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-60页 |
| 3.3.1 ILKAP 小 RNA 干扰的研究 | 第55-56页 |
| 3.3.2 ILKAP 对Integrin 信号通路的负调控作用 | 第56-58页 |
| 3.3.3 ILKAP 对细胞凋亡的影响 | 第58-60页 |
| 本章小结 | 第60-62页 |
| 第4章 ILKAP 与PALLADIN 相互作用的研究 | 第62-80页 |
| 4.1 实验材料 | 第62-64页 |
| 4.1.1 细胞系、菌株及载体质粒 | 第62-63页 |
| 4.1.2 试剂及抗体 | 第63页 |
| 4.1.3 主要实验设备 | 第63-64页 |
| 4.2 实验方法 | 第64-68页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第64页 |
| 4.2.2 细胞计数 | 第64页 |
| 4.2.3 用于哺乳动物转染的高纯度质粒DNA 的制备 | 第64页 |
| 4.2.4 转染 | 第64页 |
| 4.2.5 细胞裂解 | 第64页 |
| 4.2.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第64页 |
| 4.2.7 蛋白印记分析 | 第64页 |
| 4.2.8 Casepase-3 活性分析实验 | 第64页 |
| 4.2.9 MTT 细胞存活率实验 | 第64页 |
| 4.2.10 palladin shRNA 的设计 | 第64-67页 |
| 4.2.11 palladin 相关载体引物及片段的扩增 | 第67-68页 |
| 4.3 实验结果 | 第68-79页 |
| 4.3.1 palladin 相关载体的构建 | 第68-72页 |
| 4.3.2 ILKAP 与palladin 的相互作用研究 | 第72-74页 |
| 4.3.3 ILKAP-C 末端与palladin 319 domain 介导了两个蛋白的相互作用 | 第74-77页 |
| 4.3.4 沉默表达palladin 可以阻止ILKAP 导致的细胞凋亡 | 第77-79页 |
| 本章小结 | 第79-80页 |
| 全文结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-86页 |
| 博士期间发表的论文 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
