摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 绪论 | 第10-36页 |
1.1 原始卵泡的形成 | 第10-14页 |
1.1.1 雌性生殖细胞的起源及原始生殖细胞的迁移 | 第12页 |
1.1.2 卵包囊形成 | 第12-13页 |
1.1.3 卵包囊解体及原始卵泡的形成 | 第13-14页 |
1.2 体细胞粘附和迁移与原始卵泡形成 | 第14-15页 |
1.3 卵母细胞的减数分裂与原始卵泡形成 | 第15页 |
1.4 卵母细胞死亡与原始卵泡形成 | 第15-16页 |
1.4.1 自噬和坏死与卵母细胞死亡 | 第15-16页 |
1.4.2 凋亡与卵母细胞死亡 | 第16页 |
1.5 原始卵泡形成的分子机制 | 第16-23页 |
1.5.1 转录因子 | 第16-17页 |
1.5.2 生长因子及信号分子 | 第17-21页 |
1.5.3 激素 | 第21-23页 |
1.6 线粒体的形态与功能 | 第23-30页 |
1.6.1 线粒体的功能 | 第23-25页 |
1.6.2 线粒体的分裂与融合 | 第25-26页 |
1.6.3 线粒体的形态变化与凋亡 | 第26-30页 |
1.7 线粒体与生殖 | 第30-34页 |
1.7.1 卵母细胞及早期胚胎中线粒体的数量及结构 | 第30-31页 |
1.7.2 卵母细胞及早期胚胎中线粒体的分布受到高度调节 | 第31-32页 |
1.7.3 卵母细胞及早期胚胎中能量代谢 | 第32-33页 |
1.7.4 线粒体在卵母细胞凋亡及ROS清除中的作用 | 第33页 |
1.7.5 与衰老相关的生殖疾病与线粒体功能障碍 | 第33-34页 |
1.7.6 Krakauer and Mira假说 | 第34页 |
1.8 研究内容及研究意义 | 第34-36页 |
第2章 材料和方法 | 第36-50页 |
2.1 实验材料 | 第36-38页 |
2.1.1 试剂 | 第36-38页 |
2.1.2 实验动物 | 第38页 |
2.2 实验方法 | 第38-47页 |
2.2.1 胎鼠卵巢组织石蜡包埋及切片 | 第38-39页 |
2.2.2 免疫组织化学 | 第39-40页 |
2.2.3 胎鼠及新生老鼠双向电泳分析及质谱分析 | 第40-42页 |
2.2.4 Western blot | 第42-43页 |
2.2.5 胎鼠卵巢体外培养 | 第43页 |
2.2.6 体外培养卵巢siRNA转染 | 第43页 |
2.2.7 卵巢组织电镜包埋及切片染色后电镜观察 | 第43-44页 |
2.2.8 卵巢组织免疫胶体金 | 第44页 |
2.2.9 卵巢组织ATP水平检测 | 第44-45页 |
2.2.10 卵巢组织ROS水平检测 | 第45页 |
2.2.11 卵巢组织膜电位水平检测 | 第45页 |
2.2.12 卵巢组织mitochondria mass水平检测 | 第45页 |
2.2.13 卵巢组织GSH水平检测 | 第45-46页 |
2.2.14 TUNEL检测 | 第46页 |
2.2.15 mRNA表达水平的Q-PCR检测 | 第46-47页 |
2.3 数据分析 | 第47-50页 |
2.3.1 切片统计标准 | 第47-48页 |
2.3.2 卵母细胞和各级卵泡计数标准 | 第48页 |
2.3.3 能用于电镜分析的卵母细胞标准 | 第48页 |
2.3.4 统计分析 | 第48-50页 |
第3章 研究结果和讨论 | 第50-80页 |
3.1 原始卵泡形成过程中差异表达蛋白质的筛选 | 第50-54页 |
3.1.1 小鼠卵巢中卵泡的发育 | 第51-52页 |
3.1.2 2D-PAGE及MALDI-TOF/TOF的结果和验证 | 第52-54页 |
3.2 蛋白功能筛选 | 第54-59页 |
3.2.1 原始卵泡形成阶段差异表达蛋白功能筛选的平台 | 第54-57页 |
3.2.2 发现29个参与原始卵泡形成的功能蛋白 | 第57-59页 |
3.2.3 小结与讨论 | 第59页 |
3.3 线粒体相关蛋白敲减对线粒体及原始卵泡形成的影响 | 第59-66页 |
3.3.1 功能蛋白的生物信息学分析 | 第59-60页 |
3.3.2 线粒体相关蛋白的敲减后卵母细胞中线粒体形态异常比例增加 | 第60-63页 |
3.3.3 线粒体相关蛋白的敲减线粒体功能受损 | 第63-64页 |
3.3.4 线粒体相关蛋白的敲减后凋亡的卵母细胞增加 | 第64-66页 |
3.4 SOD1突变通过影响线粒体的结构及功能影响原始卵泡形成 | 第66-75页 |
3.4.1 SOD1~(G93A)突变鼠卵巢的卵母细胞线粒体形态异常 | 第66-67页 |
3.4.2 SOD1~(G93A)突变鼠中卵母细胞的凋亡增加 | 第67-70页 |
3.4.3 SOD1突变卵巢中原始卵泡数量减少 | 第70-71页 |
3.4.4 恢复Sod1~(G93A)突变卵巢线粒体的氧化还原状态能够有效的恢复线粒体功能及原始卵泡形成 | 第71-73页 |
3.4.5 小结与讨论 | 第73-75页 |
3.5 生理状态下线粒体与原始卵泡形成的关系 | 第75-80页 |
3.5.1 不同发育时间点卵巢卵母细胞中线粒体的形态及数量的变化 | 第75-77页 |
3.5.2 卵包囊卵母细胞和原始卵泡卵母细胞中线粒体的形态及数量的变化及卵母细胞的命运 | 第77-78页 |
3.5.3 小结与讨论 | 第78-80页 |
第4章 结论 | 第80-84页 |
参考文献 | 第84-108页 |
附录1 参加会议情况 | 第108-110页 |
附录2 中英文对照表 | 第110-112页 |
附录3 siRNA序列 | 第112-117页 |
附录4 原始卵泡形成过程中差异表达蛋白 | 第117-118页 |
致谢 | 第118-120页 |
在读期间发表的学术论文与取得的成果 | 第120页 |