| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 0 前言 | 第16-28页 |
| 0.1 野生大豆 | 第16-18页 |
| 0.1.1 野生大豆分布 | 第16页 |
| 0.1.2 野生大豆价值及利用现状 | 第16-18页 |
| 0.2 大豆胰蛋白酶抑制剂 | 第18-21页 |
| 0.2.1 大豆胰蛋白酶抑制剂的性质 | 第18-19页 |
| 0.2.2 Kunitz型大豆胰蛋白酶抑制剂 | 第19-20页 |
| 0.2.3 Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂 | 第20-21页 |
| 0.3 胰蛋白酶抑制剂的分离纯化 | 第21-22页 |
| 0.4 大豆胰蛋白酶抑制剂的抗肿瘤活性 | 第22-24页 |
| 0.5 野生大豆胰蛋白酶抑制剂的基因克隆 | 第24-25页 |
| 0.6 研究内容及研究意义 | 第25-28页 |
| 0.6.1 研究内容 | 第25-26页 |
| 0.6.2 研究背景及意义 | 第26-28页 |
| 1 即墨野生大豆主要成分及其营养价值分析 | 第28-41页 |
| 1.1 试剂与仪器 | 第29页 |
| 1.1.1 材料及试剂 | 第29页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第29页 |
| 1.2 实验方法 | 第29-33页 |
| 1.2.1 常规成分的测定 | 第29-30页 |
| 1.2.2 矿质元素含量的测定 | 第30页 |
| 1.2.3 脂肪酸组成的测定 | 第30-31页 |
| 1.2.4 氨基酸组成的测定 | 第31页 |
| 1.2.5 营养价值分析 | 第31-33页 |
| 1.3 结果与分析 | 第33-39页 |
| 1.3.1 主要营养成分分析 | 第33-34页 |
| 1.3.2 矿质元素的含量分析 | 第34-35页 |
| 1.3.3 脂肪酸的组成分析 | 第35-36页 |
| 1.3.4 氨基酸的组成分析 | 第36-38页 |
| 1.3.5 营养价值的评定 | 第38-39页 |
| 1.4 小结 | 第39-41页 |
| 2 野生大豆胰蛋白酶抑制剂的提取及活性测定 | 第41-52页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第42页 |
| 2.1.1 材料及试剂 | 第42页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-44页 |
| 2.2.1 野生大豆胰蛋白酶抑制剂的提取 | 第42-43页 |
| 2.2.2 蛋白浓度的测定 | 第43页 |
| 2.2.3 荧光分光光度法测定WSTI活力原理 | 第43页 |
| 2.2.4 胰蛋白酶抑制剂的活力测定方法 | 第43-44页 |
| 2.2.5 AMC标准曲线的建立 | 第44页 |
| 2.2.6 胰蛋白酶最佳浓度的确定 | 第44页 |
| 2.2.7 线性范围和检出限 | 第44页 |
| 2.3 结果与分析 | 第44-51页 |
| 2.3.1 野生大豆胰蛋白酶抑制剂的提取 | 第44-45页 |
| 2.3.2 荧光分光光度法条件的选择 | 第45-48页 |
| 2.3.3 AMC标准曲线的建立 | 第48-49页 |
| 2.3.4 胰蛋白酶浓度对反应速度的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.5 线性范围和检出限 | 第50-51页 |
| 2.4 小结 | 第51-52页 |
| 3 野生大豆胰蛋白酶抑制剂的纯化及性质的研究 | 第52-72页 |
| 3.1 试剂与仪器 | 第52-53页 |
| 3.1.1 材料及试剂 | 第52-53页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第53页 |
| 3.2 方法与步骤 | 第53-57页 |
| 3.2.1 Sephadex G-50凝胶柱层析 | 第53-54页 |
| 3.2.2 Trypsin-Sepharose 4B亲和层析填料的制备 | 第54页 |
| 3.2.3 Trypsin-Sepharose 4B亲和层析 | 第54-55页 |
| 3.2.4 超滤脱盐及小分子蛋白 | 第55页 |
| 3.2.5 WSTI的纯度及分子量 | 第55页 |
| 3.2.6 WSTI的结构性质 | 第55-56页 |
| 3.2.7 WSTI抑制机理及抑制类型 | 第56页 |
| 3.2.8 WSTI的抗肿瘤活性 | 第56-57页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第57-70页 |
| 3.3.1 Sephadex G-50凝胶柱分离纯化 | 第57-58页 |
| 3.3.2 胰蛋白酶与填料的偶联 | 第58页 |
| 3.3.3 Trypsin-Sepharose 4B亲和层析的分离纯化 | 第58-59页 |
| 3.3.4 超滤浓缩、脱盐及小分子蛋白 | 第59-60页 |
| 3.3.5 WSTI的分离、纯化总结 | 第60-61页 |
| 3.3.6 WSTI的纯度及分子量分析 | 第61-63页 |
| 3.3.7 WSTI的结构性质分析 | 第63-67页 |
| 3.3.8 WSTI的抑制机理及抑制类型分析 | 第67-69页 |
| 3.3.9 WSTI对A549肺癌细胞增殖的影响 | 第69-70页 |
| 3.4 小结 | 第70-72页 |
| 4 野生大豆胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及分析 | 第72-88页 |
| 4.1 试剂及仪器 | 第72-73页 |
| 4.1.1 材料及试剂 | 第72-73页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第73页 |
| 4.2 实验方法 | 第73-77页 |
| 4.2.1 RNA的提取 | 第73页 |
| 4.2.2 RT-PCR | 第73-74页 |
| 4.2.3 巢式PCR扩增cDNA | 第74-76页 |
| 4.2.4 PCR产物纯化 | 第76页 |
| 4.2.5 测序分析 | 第76页 |
| 4.2.6 生物信息学分析 | 第76-77页 |
| 4.3 实验结果 | 第77-86页 |
| 4.3.1 RNA提取 | 第77页 |
| 4.3.2 目的基因cDNA序列扩增 | 第77-78页 |
| 4.3.3 KSTI的测序结果及序列分析 | 第78-82页 |
| 4.3.4. BSTI的测序结果及序列分析 | 第82-86页 |
| 4.4 小结 | 第86-88页 |
| 论文结论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-99页 |
| 个人简介 | 第99页 |
| 发表文章 | 第99页 |
