摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
目录 | 第9-12页 |
第1章 绪论 | 第12-21页 |
1.1 生物传感器 | 第12-14页 |
1.1.1 生物传感器介绍 | 第12-13页 |
1.1.2 生物传感器的应用 | 第13-14页 |
1.2 光学 DNA 传感器 | 第14-16页 |
1.2.1 荧光分析法 | 第14-15页 |
1.2.2 紫外-可见光分析法 | 第15页 |
1.2.3 生物发光分析法 | 第15-16页 |
1.3 酶信号放大技术 | 第16-19页 |
1.3.1 聚合酶扩增放大 | 第16-17页 |
1.3.2 核酸酶切放大 | 第17-18页 |
1.3.3 DNAzyme 放大 | 第18-19页 |
1.4 非标记的 DNA 光学传感器 | 第19-20页 |
1.5 本文研究构想 | 第20-21页 |
第2章 基于甲基化敏感的限制性内切酶的生物发光方法用于 DNA 甲基转移酶活性的检测 | 第21-31页 |
2.1 前言 | 第21-22页 |
2.2 实验部分 | 第22-24页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第22-23页 |
2.2.2 PCR 获得线性 DNA 模板 | 第23页 |
2.2.3 甲基化作用及限制性酶切过程 | 第23页 |
2.2.4 荧光素酶报告基因的体外表达 | 第23页 |
2.2.5 生物发光检测 | 第23-24页 |
2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
2.2.7 Dam 甲基转移酶抑制剂分析 | 第24页 |
2.3 结果与讨论 | 第24-30页 |
2.3.1 实验设计原理 | 第24-26页 |
2.3.2 实验可行性分析 | 第26-27页 |
2.3.3 电泳分析 | 第27-28页 |
2.3.4 体外表达时间的优化 | 第28页 |
2.3.5 Dam 甲基化酶活性的检测 | 第28-30页 |
2.4 小结 | 第30-31页 |
第3章 HRP-DNAzyme 和 Lamda 核酸外切酶用于 T4 多聚核苷酸激酶的可视化研究 | 第31-43页 |
3.1 前言 | 第31-32页 |
3.2 实验部分 | 第32-34页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第32-33页 |
3.2.2 识别 DNA 探针设计 | 第33页 |
3.2.3 实验过程 | 第33页 |
3.2.4 嵌入核酸染料的荧光光谱表征 | 第33页 |
3.2.5 抑制剂分析 | 第33-34页 |
3.3 结果与讨论 | 第34-42页 |
3.3.1 实验原理及其验证 | 第34-37页 |
3.3.2 实验条件的优化 | 第37-39页 |
3.3.3 T4 多聚核苷酸激酶的定量分析 | 第39-40页 |
3.3.4 抑制剂的考查 | 第40-42页 |
3.4 小结 | 第42-43页 |
第4章 基于目标物放大和 DNAzyme 的简单比色方法用于 MicroRNA 的分析检测 | 第43-53页 |
4.1 前言 | 第43-44页 |
4.2 实验部分 | 第44-46页 |
4.2.1 试剂与仪器 | 第44-45页 |
4.2.2 识别发夹探针的设计 | 第45页 |
4.2.3 实验过程 | 第45-46页 |
4.3 结果与讨论 | 第46-52页 |
4.3.1 实验原理及可行性分析 | 第46-48页 |
4.3.2 实验条件的优化 | 第48-50页 |
4.3.3 目标 MicroRNA 的定量检测 | 第50-51页 |
4.3.4 错配分析 | 第51页 |
4.3.5 复杂体系分析 | 第51-52页 |
4.4 小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-68页 |
附录A LR-DNA 的具体序列 | 第68-70页 |
附录B 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |