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基于酶信号放大的新型无标记核酸生物传感方法研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
目录第9-12页
第1章 绪论第12-21页
    1.1 生物传感器第12-14页
        1.1.1 生物传感器介绍第12-13页
        1.1.2 生物传感器的应用第13-14页
    1.2 光学 DNA 传感器第14-16页
        1.2.1 荧光分析法第14-15页
        1.2.2 紫外-可见光分析法第15页
        1.2.3 生物发光分析法第15-16页
    1.3 酶信号放大技术第16-19页
        1.3.1 聚合酶扩增放大第16-17页
        1.3.2 核酸酶切放大第17-18页
        1.3.3 DNAzyme 放大第18-19页
    1.4 非标记的 DNA 光学传感器第19-20页
    1.5 本文研究构想第20-21页
第2章 基于甲基化敏感的限制性内切酶的生物发光方法用于 DNA 甲基转移酶活性的检测第21-31页
    2.1 前言第21-22页
    2.2 实验部分第22-24页
        2.2.1 试剂与仪器第22-23页
        2.2.2 PCR 获得线性 DNA 模板第23页
        2.2.3 甲基化作用及限制性酶切过程第23页
        2.2.4 荧光素酶报告基因的体外表达第23页
        2.2.5 生物发光检测第23-24页
        2.2.6 琼脂糖凝胶电泳第24页
        2.2.7 Dam 甲基转移酶抑制剂分析第24页
    2.3 结果与讨论第24-30页
        2.3.1 实验设计原理第24-26页
        2.3.2 实验可行性分析第26-27页
        2.3.3 电泳分析第27-28页
        2.3.4 体外表达时间的优化第28页
        2.3.5 Dam 甲基化酶活性的检测第28-30页
    2.4 小结第30-31页
第3章 HRP-DNAzyme 和 Lamda 核酸外切酶用于 T4 多聚核苷酸激酶的可视化研究第31-43页
    3.1 前言第31-32页
    3.2 实验部分第32-34页
        3.2.1 试剂与仪器第32-33页
        3.2.2 识别 DNA 探针设计第33页
        3.2.3 实验过程第33页
        3.2.4 嵌入核酸染料的荧光光谱表征第33页
        3.2.5 抑制剂分析第33-34页
    3.3 结果与讨论第34-42页
        3.3.1 实验原理及其验证第34-37页
        3.3.2 实验条件的优化第37-39页
        3.3.3 T4 多聚核苷酸激酶的定量分析第39-40页
        3.3.4 抑制剂的考查第40-42页
    3.4 小结第42-43页
第4章 基于目标物放大和 DNAzyme 的简单比色方法用于 MicroRNA 的分析检测第43-53页
    4.1 前言第43-44页
    4.2 实验部分第44-46页
        4.2.1 试剂与仪器第44-45页
        4.2.2 识别发夹探针的设计第45页
        4.2.3 实验过程第45-46页
    4.3 结果与讨论第46-52页
        4.3.1 实验原理及可行性分析第46-48页
        4.3.2 实验条件的优化第48-50页
        4.3.3 目标 MicroRNA 的定量检测第50-51页
        4.3.4 错配分析第51页
        4.3.5 复杂体系分析第51-52页
    4.4 小结第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-68页
附录A LR-DNA 的具体序列第68-70页
附录B 攻读硕士学位期间所发表的学术论文第70-71页
致谢第71页

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