致谢 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第17-28页 |
1.1 烟粉虱 | 第17-19页 |
1.1.1 烟粉虱概述 | 第17-18页 |
1.1.2 烟粉虱的入侵与危害 | 第18-19页 |
1.2 活性氧 | 第19-22页 |
1.2.1 活性氧的产生 | 第19-20页 |
1.2.2 ROS的危害 | 第20-21页 |
1.2.3 抗氧化系统 | 第21-22页 |
1.3 超氧化物歧化酶(SOD) | 第22-26页 |
1.3.1 SOD的种类与分布 | 第22页 |
1.3.2 SOD的分子结构与理化性质 | 第22-24页 |
1.3.3 SOD的作用机理 | 第24页 |
1.3.4 SOD酶活影响因素 | 第24-25页 |
1.3.5 SOD酶活的测定方法 | 第25页 |
1.3.6 昆虫中SOD的研究进展 | 第25-26页 |
1.4 本研究的目的、意义及主要内容 | 第26-28页 |
1.4.1 本研究的目的与意义 | 第26页 |
1.4.2 本研究的主要内容 | 第26-28页 |
第二章 基本材料与方法 | 第28-35页 |
2.1 供试昆虫以及建立试验种群 | 第28页 |
2.2 供试植物 | 第28页 |
2.3 生态学研究相关的主要仪器设备 | 第28-29页 |
2.3.1 养虫笼 | 第28-29页 |
2.3.2 人工气候室 | 第29页 |
2.3.3 吸虫器 | 第29页 |
2.3.4 夹叶笼 | 第29页 |
2.4 生化及分子生物学相关的主要仪器与试剂 | 第29-31页 |
2.4.1 主要仪器 | 第29-30页 |
2.4.2 主要试剂 | 第30-31页 |
2.5 实验中用到的相关软件 | 第31页 |
2.6 方法 | 第31-33页 |
2.6.1 烟粉虱总DNA的提取 | 第31-32页 |
2.6.2 烟粉虱隐种的鉴定 | 第32-33页 |
2.7 数据分析 | 第33-35页 |
第三章 Bt-MnSOD基因的克隆、表达以及各种胁迫下活性测定 | 第35-62页 |
3.1 试验材料 | 第35-37页 |
3.1.1 供试昆虫与植物 | 第35页 |
3.1.2 菌株、质粒和酶 | 第35-36页 |
3.1.3 主要的仪器设备及相关软件 | 第36页 |
3.1.4 主要生化试剂及常用试剂的配制 | 第36-37页 |
3.2 试验方法 | 第37-48页 |
3.2.1 Bt-MnSOD基因的克隆及序列分析 | 第37-42页 |
3.2.2 Bt-MnSOD基因的原核表达及纯化 | 第42-46页 |
3.2.3 Bt-MnSOD纯化蛋白的热稳定性分析 | 第46页 |
3.2.4 qRT-PCR检测Bt-MnSOD在烟粉虱各个发育阶段的表达量 | 第46-47页 |
3.2.5 高低温、寄主转换和农药处理等胁迫对MEMA1体内MnSOD酶活的影响 | 第47-48页 |
3.3 结果与分析 | 第48-51页 |
3.3.1 Bt-MnSOD序列分析结果 | 第48-49页 |
3.3.2 Bt-MnSOD的原核表达及纯化结果 | 第49-50页 |
3.3.3 Bt-MnSOD纯化的融合蛋白热稳定性分析结果 | 第50页 |
3.3.4 烟粉虱各个虫态下Bt-MnSOD的表达 | 第50页 |
3.3.5 高低温条件下MEAM1体内MnSOD酶活性变化 | 第50页 |
3.3.6 寄主转换条件下MEAM1体内MnSOD酶活性变化 | 第50-51页 |
3.3.7 寄主转换条件下MEAM1和Asia Ⅱ3体内MnSOD表达量变化 | 第51页 |
3.3.8 农药处理条件下MEAM1体内MnSOD酶活性的变化 | 第51页 |
3.4 讨论 | 第51-62页 |
第四章 Bt-ecCuZnSOD基因的克隆以及逆境胁迫下表达量检测 | 第62-74页 |
4.1 试验材料 | 第62-63页 |
4.1.1 供试昆虫与植物 | 第62页 |
4.1.2 菌株、质粒及相关试剂盒 | 第62-63页 |
4.1.3 主要仪器与试剂 | 第63页 |
4.1.4 实验中用到的相关软件 | 第63页 |
4.2 试验方法 | 第63-64页 |
4.2.1 烟粉虱总RNA的提取 | 第63页 |
4.2.2 实验用cDNA的制备 | 第63页 |
4.2.3 MEAM1中Bt-ecCuZnSOD cDNA的克隆 | 第63-64页 |
4.2.4 Bt-ecCuZnSOD序列分析 | 第64页 |
4.2.5 Bt-ecCuZnSOD在烟粉虱各个发育阶段的表达量 | 第64页 |
4.2.6 高低温胁迫对MEAM1和Asia Ⅱ3中Bt-ecCuZnSOD表达量的影响 | 第64页 |
4.2.7 寄主转换对MEAM1和Asia Ⅱ3中Bt-ecCuZnSOD表达量的影响 | 第64页 |
4.3 结果与分析 | 第64-66页 |
4.3.1 Bt-ecCuZnSOD克隆以及序列分析结果 | 第65页 |
4.3.2 烟粉虱各个虫态下Bt-ecCuZnSOD的表达 | 第65页 |
4.3.3 MEAM1和Asia Ⅱ3中Bt-ecCuZnSOD在高低温胁迫下的表达量变化 | 第65-66页 |
4.3.4 MEAM1和Asia Ⅱ3中Bt-ecCuZnSOD在寄主转换条件下表达量变化 | 第66页 |
4.4 讨论 | 第66-74页 |
第五章 总讨论 | 第74-76页 |
5.1 Bt-MnSOD基因的克隆、表达以及各种胁迫下活性测定 | 第74-75页 |
5.2 Bt-ecCuZnSOD基因的克隆以及逆境胁迫下表达量检测 | 第75页 |
5.3 值得继续研究的问题 | 第75页 |
5.4 本实验的特色与创新之处 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-87页 |
附录 硕士期间已经发表和待发表的学术论文 | 第87页 |