| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第10-16页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 蜱类功能因子研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2.1 蜱类功能因子的筛选与功能研究方法 | 第10-11页 |
| 1.2.2 蜱类功能因子在组织中的分布 | 第11-12页 |
| 1.3 蜱类生殖系统与交配过程 | 第12-13页 |
| 1.4 与蜱类生殖活动有关的功能因子 | 第13-16页 |
| 1.4.1 精子获能因子 | 第13页 |
| 1.4.2 卵黄发生刺激因子 | 第13-14页 |
| 1.4.3 饱血因子 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-25页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第16页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.3 实验试剂及耗材 | 第16-17页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-25页 |
| 2.2.1 长角血蜱HLEFa原核表达载体的构建 | 第17-20页 |
| 2.2.1.1 HLEFa信号肽signalP预测 | 第17页 |
| 2.2.1.2 pET-32a-HLEFα原核表达载体的构建 | 第17-20页 |
| 2.2.2 reHLEFα重组蛋白的诱导表达与亲和纯化 | 第20-23页 |
| 2.2.3 reHLEFα功能分析 | 第23-25页 |
| 2.2.3.1 reHLEFα生物活性分析 | 第23-24页 |
| 2.2.3.2 reHLEFα抗蜱作用的初步研究 | 第24-25页 |
| 3 结果 | 第25-40页 |
| 3.1 长角血蜱reHLEFα原核表达载体的构建 | 第25-29页 |
| 3.1.1 HLEFα信号肽SignalP预测结果 | 第25-26页 |
| 3.1.2 pET-32a-HLEFα原核表达载体的构建 | 第26-29页 |
| 3.1.2.1 HLEFα基因的扩增 | 第26页 |
| 3.1.2.2 HLEFα测序分析 | 第26-27页 |
| 3.1.2.3 pET-32a-HLEFα重组表达质粒的构建 | 第27页 |
| 3.1.2.4 pET-32a-HLEFα双酶切检测 | 第27-28页 |
| 3.1.2.5 pET-32a-HLEFα重组质粒BL21菌株的筛选 | 第28-29页 |
| 3.2 reHLEFα重组蛋白的诱导表达与亲和纯化 | 第29-35页 |
| 3.2.1 reHLEFα重组蛋白的诱导表达与条件优化 | 第29-31页 |
| 3.2.1.1 reHLEFα的诱导表达 | 第29-30页 |
| 3.2.1.2 reHLEFα表达条件的优化 | 第30-31页 |
| 3.2.2 reHLEFα重组蛋白的纯化 | 第31-35页 |
| 3.2.2.1 reHLEFα重组蛋白的可溶性分析 | 第31-32页 |
| 3.2.2.2 reHLEFα包涵体洗涤 | 第32-33页 |
| 3.2.2.3 reHLEFα包涵体溶解 | 第33-34页 |
| 3.2.2.4 reHLEFα亲和层析 | 第34页 |
| 3.2.2.5 reHLEFα尿素梯度透析复性 | 第34-35页 |
| 3.3 reHLEFα的功能分析 | 第35-40页 |
| 3.3.1 reHLEFα生物活性分析 | 第35-39页 |
| 3.3.2 reHLEFα在抗蜱疫苗领域的初步研究 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-46页 |
| 4.1 长角血蜱饱血因子HLEFα的原核表达 | 第40-42页 |
| 4.2 饱血因子重组蛋白reHLEFα的功能分析 | 第42-44页 |
| 4.3 reHLEFα在抗蜱疫苗领域的初步研究 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 个人简历 | 第53页 |
