| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-36页 |
| 第一章 卵泡的发育与闭锁 | 第15-20页 |
| 1.1 卵泡的发育 | 第15-18页 |
| 1.2 卵泡的闭锁 | 第18-20页 |
| 第二章 内质网应激和自噬的研究进展 | 第20-33页 |
| 2.1 内质网应激 | 第20页 |
| 2.2 未折叠蛋白反应 | 第20-22页 |
| 2.3 内质网应激介导的细胞凋亡 | 第22-23页 |
| 2.4 内质网应激与线粒体途径介导的细胞凋亡 | 第23-24页 |
| 2.5 自噬 | 第24-29页 |
| 2.5.1 自噬的发生 | 第24-25页 |
| 2.5.2 自噬的主要分子机制 | 第25-27页 |
| 2.5.3 内质网应激对自噬的调控机制 | 第27-29页 |
| 2.6 内质网应激和自噬与疾病的关系 | 第29-30页 |
| 2.7 内质网应激和自噬与卵泡发育 | 第30-33页 |
| 2.7.1 内质网应激与卵泡发育 | 第30页 |
| 2.7.2 自噬与卵泡发育 | 第30-33页 |
| 第三章 HERP的结构与功能 | 第33-36页 |
| 3.1 Herp基因的发现 | 第33页 |
| 3.2 Herp的结构特点 | 第33页 |
| 3.3 HERP的生物学功能 | 第33-36页 |
| 3.3.1 HERP在β淀粉样蛋白蓄积过程中的作用 | 第33-34页 |
| 3.3.2 HERP在内质网应激过程中的作用 | 第34页 |
| 3.3.3 HERP在其他信号通路过程中的作用 | 第34-36页 |
| 第二部分 试验研究 | 第36-101页 |
| 第四章 HERP在小鼠卵巢组织中的时序表达和定位分布 | 第36-48页 |
| 4.1 实验材料 | 第36-38页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第36-37页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第37页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第37-38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-41页 |
| 4.2.1 昆白小鼠的处理 | 第38页 |
| 4.2.2 小鼠卵巢石蜡切片的制备 | 第38-39页 |
| 4.2.3 免疫组化染色 | 第39-40页 |
| 4.2.4 卵巢组织全蛋白的提取和western blot检测 | 第40-41页 |
| 4.3 结果与分析 | 第41-47页 |
| 4.3.1 小鼠发情周期的鉴定 | 第41-42页 |
| 4.3.2 小鼠卵巢免疫组化结果 | 第42-45页 |
| 4.3.3 不同处理小鼠卵巢western blot结果 | 第45-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47页 |
| 4.5 小结 | 第47-48页 |
| 第五章 小鼠Herp基因shRNA慢病毒干扰载体的构建 | 第48-69页 |
| 5.1 材料 | 第48-50页 |
| 5.1.1 感受态细菌、质粒和细胞 | 第48页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第48-49页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第49-50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-58页 |
| 5.2.1 小鼠Herp基因shRNA慢病毒干扰载体的构建 | 第50-53页 |
| 5.2.2 Herp shRNA干扰慢病毒颗粒的包装 | 第53-54页 |
| 5.2.3 Herp shRNA干扰慢病毒滴度测定 | 第54-55页 |
| 5.2.4 Herp shRNA干扰片段的筛选 | 第55-56页 |
| 5.2.5 干扰Herp对内质网应激和炎症反应的调节 | 第56页 |
| 5.2.6 RNA提取和RT-qPCR检测 | 第56-58页 |
| 5.3 结果与分析 | 第58-66页 |
| 5.3.1 pCD513B-U6-Herp-shRNA慢病毒干扰载体的构建和鉴定 | 第58-59页 |
| 5.3.2 pCD513B-U6-Herp-shRNA慢病毒干扰载体序列测定 | 第59-60页 |
| 5.3.3 pCD513B-U6-Herp-shRNA慢病毒包装 | 第60页 |
| 5.3.4 pCD513B-U6-Herp-shRNA慢病毒滴度测定 | 第60-61页 |
| 5.3.5 pCD513B-U6-Herp-shRNA慢病毒转导RAW 264.7 细胞 | 第61-62页 |
| 5.3.6 Herp shRNA有效靶点的筛选 | 第62-63页 |
| 5.3.7 抑制Herp对内质网应激反应的影响 | 第63-64页 |
| 5.3.8 抑制Herp对炎症反应的影响 | 第64-65页 |
| 5.3.9 抑制Herp对RAW 264.7 细胞凋亡的影响 | 第65-66页 |
| 5.4 讨论 | 第66-68页 |
| 5.5 小结 | 第68-69页 |
| 第六章 HERP在小鼠卵巢颗粒细胞中的功能研究 | 第69-85页 |
| 6.1 材料 | 第69-70页 |
| 6.1.1 主要试剂 | 第69-70页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第70页 |
| 6.1.3 实验动物 | 第70页 |
| 6.2 实验方法 | 第70-75页 |
| 6.2.1 昆白小鼠的超排处理 | 第70页 |
| 6.2.2 小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养 | 第70-71页 |
| 6.2.3 小鼠卵巢颗粒细胞的传代培养 | 第71页 |
| 6.2.4 Herp shRNA慢病毒颗粒的包装 | 第71页 |
| 6.2.5 Herp shRNA慢病毒的浓缩 | 第71页 |
| 6.2.6 Herp shRNA慢病毒转导小鼠卵巢颗粒细胞 | 第71-72页 |
| 6.2.7 小鼠卵巢颗粒细胞的RNA提取和RT-qPCR检测 | 第72-73页 |
| 6.2.8 免疫荧光染色 | 第73页 |
| 6.2.9 细胞全蛋白提取和western blot检测 | 第73页 |
| 6.2.10 小鼠卵巢颗粒细胞分泌类固醇激素检测 | 第73-74页 |
| 6.2.11 小鼠卵巢颗粒细胞周期检测 | 第74页 |
| 6.2.12 小鼠卵巢颗粒细胞凋亡检测 | 第74-75页 |
| 6.3 结果与分析 | 第75-83页 |
| 6.3.1 小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养 | 第75页 |
| 6.3.2 Herp shRNA慢病毒转导小鼠卵巢颗粒细胞 | 第75-76页 |
| 6.3.3 Herp shRNA干扰效率检测 | 第76-77页 |
| 6.3.4 Herp shRNA对激素分泌的影响 | 第77-79页 |
| 6.3.5 Herp shRNA对颗粒细胞周期的影响 | 第79-80页 |
| 6.3.6 Herp shRNA对颗粒细胞凋亡的影响 | 第80-82页 |
| 6.3.7 Herp shRNA干扰对颗粒细胞功能基因的影响 | 第82-83页 |
| 6.4 讨论 | 第83-84页 |
| 6.5 小结 | 第84-85页 |
| 第七章 HERP在赤霉烯酮对颗粒细胞凋亡和自噬的作用机制的初步研究 | 第85-101页 |
| 7.1 材料 | 第85-87页 |
| 7.1.1 主要试剂 | 第85-86页 |
| 7.1.2 主要仪器 | 第86页 |
| 7.1.3 实验动物 | 第86-87页 |
| 7.2 实验方法 | 第87-88页 |
| 7.2.1 昆白小鼠的超排处理 | 第87页 |
| 7.2.2 小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养 | 第87页 |
| 7.2.3 赤霉烯酮对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响 | 第87页 |
| 7.2.4 赤霉烯酮对小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响 | 第87页 |
| 7.2.5 赤霉烯酮对自噬、内质网应激、mTOR和MAPK信号通路的调节 | 第87页 |
| 7.2.6 CQ对赤霉烯酮引起小鼠卵巢颗粒细胞自噬的调节 | 第87-88页 |
| 7.2.7 4-PBA对赤霉烯酮引起小鼠卵巢颗粒细胞内质网应激的调节 | 第88页 |
| 7.2.8 Herp shRNA慢病毒转导小鼠卵巢颗粒细胞 | 第88页 |
| 7.2.9 细胞全蛋白提取和western blot检测 | 第88页 |
| 7.3 结果与分析 | 第88-99页 |
| 7.3.1 赤霉烯酮诱导小鼠卵巢颗粒细胞凋亡检测 | 第88-89页 |
| 7.3.2 赤霉烯酮诱导小鼠卵巢颗粒细胞自噬的检测 | 第89-91页 |
| 7.3.3 赤霉烯酮诱导小鼠卵巢颗粒细胞发生内质网应激的检测 | 第91-93页 |
| 7.3.4 赤霉烯酮对m TOR和MAPK信号通路的检测 | 第93-95页 |
| 7.3.5 CQ对赤霉烯酮诱导的细胞凋亡的影响 | 第95-96页 |
| 7.3.6 Herp shRNA对赤霉烯酮诱导的细胞凋亡的影响 | 第96页 |
| 7.3.7 Herp shRNA对赤霉烯酮诱导的细胞自噬和凋亡中相关基因的调节 | 第96-99页 |
| 7.4 讨论 | 第99-100页 |
| 7.5 小结 | 第100-101页 |
| 结论 | 第101-102页 |
| 创新点 | 第102-103页 |
| 下一步研究计划 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-125页 |
| 附录 | 第125-128页 |
| 缩略词 | 第128-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 作者简介 | 第131-132页 |
