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黄腐酸提高苜蓿产量及促进Sinorhizobium meliloti与苜蓿结瘤固氮的作用机理

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 引言第9-33页
    1.1 苜蓿的价值及其需求第9-12页
        1.1.1 苜蓿的价值第9页
        1.1.2 我国畜牧业对苜蓿的需求第9-10页
        1.1.3 苜蓿高效根瘤菌筛选及接种的必要性第10-12页
    1.2 根瘤菌与豆科植物的共生固氮第12-19页
        1.2.1 根瘤菌-豆科植物共生固氮体系的建立第12-15页
        1.2.2 根瘤菌表面多糖在共生中的作用第15-19页
    1.3 根瘤菌的群体感应第19-26页
        1.3.1 群体感应调控概述第19-21页
        1.3.2 群体感应系统的功能第21-25页
        1.3.3 S.meliloti 8530的群体感应系统第25-26页
    1.4 腐植酸及其应用第26-30页
        1.4.1 黄腐酸促进植物生长提高植物品质的作用第27-29页
        1.4.2 黄腐酸提高植物抗逆性的作用第29页
        1.4.3 黄腐酸对土壤微生物的调控作用第29-30页
    1.5 本研究的目的及意义第30-33页
第二章 材料与方法第33-53页
    2.1 实验材料第33-40页
        2.1.1 微生物降解褐煤产生的水溶性黄腐酸(water-soluble humic material,WSHM)第33页
        2.1.2 苜蓿品种第33页
        2.1.3 所用菌株、质粒及引物第33-36页
        2.1.4 培养基第36-37页
        2.1.5 缓冲液及试剂第37-39页
        2.1.6 抗生素第39页
        2.1.7 酶及其他化学试剂第39页
        2.1.8 主要实验仪器及设备第39-40页
    2.2 实验方法第40-53页
        2.2.1 苜蓿田间试验第40-41页
        2.2.2 苜蓿结瘤试验第41-42页
        2.2.3 黄腐酸对根瘤菌生长的影响第42页
        2.2.4 黄腐酸对根瘤菌胞外多糖合成的影响第42-43页
        2.2.5 黄腐酸对S. meliloti群体感应信号物质AHLs合成的影响第43页
        2.2.6 根瘤菌总RNA的提取第43-44页
        2.2.7 总RNA样品的检测第44页
        2.2.8 RNA反转录为cDNA第44页
        2.2.9 RT-qPCR第44-45页
        2.2.10 S. meliloti △qsrR基因突变株的构建第45-46页
        2.2.11 检测S. meliloti △qsrR中expR基因的表达第46-47页
        2.2.12 His_6-QsrR蛋白的外源表达及纯化第47-48页
        2.2.13 EMSA(DIG Gel Shift Kit,2~(nd)Generation,Roche)第48-49页
        2.2.14 细菌单杂交第49-50页
        2.2.15 苜蓿根瘤中根瘤菌的分离纯化与鉴定第50-51页
        2.2.16 分离纯化的苜蓿根瘤菌与八个苜蓿品种的共生匹配第51-53页
第三章 实验结果与分析第53-99页
    3.1 施加黄腐酸及接种根瘤菌对苜蓿产量及土壤养分的影响第53-67页
        3.1.1 施加黄腐酸及接种根瘤菌对苜蓿结瘤的影响第53-54页
        3.1.2 施加黄腐酸及接种根瘤菌对苜蓿固氮酶活的影响第54-55页
        3.1.3 施加黄腐酸及接种根瘤菌对苜蓿产量及蛋白产量的影响第55-60页
        3.1.4 施加黄腐酸或接种根瘤菌对土壤养分的影响第60-67页
        3.1.5 小结第67页
    3.2 黄腐酸促进S. meliloti生长及结瘤的作用机理研究第67-75页
        3.2.1 黄腐酸对S. meliloti与苜蓿结瘤固氮的影响第68-69页
        3.2.2 黄腐酸对S.meliloti生长的影响第69-70页
        3.2.3 黄腐酸对S. meliloti胞外多糖合成的影响第70-72页
        3.2.4 黄腐酸对S. meliloti群体感应信号物质AHLs合成的影响第72-74页
        3.2.5 小结第74-75页
    3.3 黄腐酸对S.meliloti群体感应系统的调控机理研究第75-89页
        3.3.1 黄腐酸对S.meliloti群体感应相关基因表达的影响第75-78页
        3.3.2. S.meliloti 8530 qsrR基因突变株的构建及表型分析第78-81页
        3.3.3 黄腐酸通过QsrR蛋白而抑制S meliloti 8530 expR基因的表达第81-82页
        3.3.4 QsrR蛋白能够直接调控expR基因的表达第82-85页
        3.3.5 黄腐酸抑制expR基因表达的机制第85-89页
        3.3.6 小结第89页
    3.4 苜蓿根瘤菌的分离及针对内蒙科尔沁沙地八个苜蓿品种的高效菌株筛选第89-99页
        3.4.1 苜蓿根瘤菌的分离、纯化、鉴定第90-92页
        3.4.2 所分离根瘤菌与八个苜蓿品种的温室匹配实验第92-98页
        3.4.3 小结第98-99页
第四章 讨论与展望第99-103页
    4.1 讨论第99-102页
    4.2 展望第102-103页
参考文献第103-121页
致谢第121-123页
个人简历第123页

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