摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第9-33页 |
1.1 苜蓿的价值及其需求 | 第9-12页 |
1.1.1 苜蓿的价值 | 第9页 |
1.1.2 我国畜牧业对苜蓿的需求 | 第9-10页 |
1.1.3 苜蓿高效根瘤菌筛选及接种的必要性 | 第10-12页 |
1.2 根瘤菌与豆科植物的共生固氮 | 第12-19页 |
1.2.1 根瘤菌-豆科植物共生固氮体系的建立 | 第12-15页 |
1.2.2 根瘤菌表面多糖在共生中的作用 | 第15-19页 |
1.3 根瘤菌的群体感应 | 第19-26页 |
1.3.1 群体感应调控概述 | 第19-21页 |
1.3.2 群体感应系统的功能 | 第21-25页 |
1.3.3 S.meliloti 8530的群体感应系统 | 第25-26页 |
1.4 腐植酸及其应用 | 第26-30页 |
1.4.1 黄腐酸促进植物生长提高植物品质的作用 | 第27-29页 |
1.4.2 黄腐酸提高植物抗逆性的作用 | 第29页 |
1.4.3 黄腐酸对土壤微生物的调控作用 | 第29-30页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第30-33页 |
第二章 材料与方法 | 第33-53页 |
2.1 实验材料 | 第33-40页 |
2.1.1 微生物降解褐煤产生的水溶性黄腐酸(water-soluble humic material,WSHM) | 第33页 |
2.1.2 苜蓿品种 | 第33页 |
2.1.3 所用菌株、质粒及引物 | 第33-36页 |
2.1.4 培养基 | 第36-37页 |
2.1.5 缓冲液及试剂 | 第37-39页 |
2.1.6 抗生素 | 第39页 |
2.1.7 酶及其他化学试剂 | 第39页 |
2.1.8 主要实验仪器及设备 | 第39-40页 |
2.2 实验方法 | 第40-53页 |
2.2.1 苜蓿田间试验 | 第40-41页 |
2.2.2 苜蓿结瘤试验 | 第41-42页 |
2.2.3 黄腐酸对根瘤菌生长的影响 | 第42页 |
2.2.4 黄腐酸对根瘤菌胞外多糖合成的影响 | 第42-43页 |
2.2.5 黄腐酸对S. meliloti群体感应信号物质AHLs合成的影响 | 第43页 |
2.2.6 根瘤菌总RNA的提取 | 第43-44页 |
2.2.7 总RNA样品的检测 | 第44页 |
2.2.8 RNA反转录为cDNA | 第44页 |
2.2.9 RT-qPCR | 第44-45页 |
2.2.10 S. meliloti △qsrR基因突变株的构建 | 第45-46页 |
2.2.11 检测S. meliloti △qsrR中expR基因的表达 | 第46-47页 |
2.2.12 His_6-QsrR蛋白的外源表达及纯化 | 第47-48页 |
2.2.13 EMSA(DIG Gel Shift Kit,2~(nd)Generation,Roche) | 第48-49页 |
2.2.14 细菌单杂交 | 第49-50页 |
2.2.15 苜蓿根瘤中根瘤菌的分离纯化与鉴定 | 第50-51页 |
2.2.16 分离纯化的苜蓿根瘤菌与八个苜蓿品种的共生匹配 | 第51-53页 |
第三章 实验结果与分析 | 第53-99页 |
3.1 施加黄腐酸及接种根瘤菌对苜蓿产量及土壤养分的影响 | 第53-67页 |
3.1.1 施加黄腐酸及接种根瘤菌对苜蓿结瘤的影响 | 第53-54页 |
3.1.2 施加黄腐酸及接种根瘤菌对苜蓿固氮酶活的影响 | 第54-55页 |
3.1.3 施加黄腐酸及接种根瘤菌对苜蓿产量及蛋白产量的影响 | 第55-60页 |
3.1.4 施加黄腐酸或接种根瘤菌对土壤养分的影响 | 第60-67页 |
3.1.5 小结 | 第67页 |
3.2 黄腐酸促进S. meliloti生长及结瘤的作用机理研究 | 第67-75页 |
3.2.1 黄腐酸对S. meliloti与苜蓿结瘤固氮的影响 | 第68-69页 |
3.2.2 黄腐酸对S.meliloti生长的影响 | 第69-70页 |
3.2.3 黄腐酸对S. meliloti胞外多糖合成的影响 | 第70-72页 |
3.2.4 黄腐酸对S. meliloti群体感应信号物质AHLs合成的影响 | 第72-74页 |
3.2.5 小结 | 第74-75页 |
3.3 黄腐酸对S.meliloti群体感应系统的调控机理研究 | 第75-89页 |
3.3.1 黄腐酸对S.meliloti群体感应相关基因表达的影响 | 第75-78页 |
3.3.2. S.meliloti 8530 qsrR基因突变株的构建及表型分析 | 第78-81页 |
3.3.3 黄腐酸通过QsrR蛋白而抑制S meliloti 8530 expR基因的表达 | 第81-82页 |
3.3.4 QsrR蛋白能够直接调控expR基因的表达 | 第82-85页 |
3.3.5 黄腐酸抑制expR基因表达的机制 | 第85-89页 |
3.3.6 小结 | 第89页 |
3.4 苜蓿根瘤菌的分离及针对内蒙科尔沁沙地八个苜蓿品种的高效菌株筛选 | 第89-99页 |
3.4.1 苜蓿根瘤菌的分离、纯化、鉴定 | 第90-92页 |
3.4.2 所分离根瘤菌与八个苜蓿品种的温室匹配实验 | 第92-98页 |
3.4.3 小结 | 第98-99页 |
第四章 讨论与展望 | 第99-103页 |
4.1 讨论 | 第99-102页 |
4.2 展望 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-121页 |
致谢 | 第121-123页 |
个人简历 | 第123页 |