| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 纤维素乙醇的发展现状 | 第11-13页 |
| 1.1.1 燃料乙醇的研究意义和发展历程 | 第11-12页 |
| 1.1.2 纤维素乙醇发展面临的挑战 | 第12-13页 |
| 1.2 纤维素水解液中抑制物的种类 | 第13-15页 |
| 1.2.1 甲酸和乙酸 | 第13-14页 |
| 1.2.2 糠醛和羟甲基糠醛 | 第14-15页 |
| 1.2.3 其他抑制物 | 第15页 |
| 1.3 纤维素水解液的脱毒方法 | 第15-17页 |
| 1.3.1 物理方法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 化学方法 | 第16页 |
| 1.3.3 生物方法 | 第16页 |
| 1.3.4 综合处理方法 | 第16-17页 |
| 1.4 纤维素水解液抑制物抗性提高的微生物菌株构建策略 | 第17-18页 |
| 1.4.1 进化过程驯化 | 第17页 |
| 1.4.2 基因工程改造 | 第17-18页 |
| 1.5 本课题的研究内容及研究意义 | 第18-20页 |
| 2 过表达膜转运蛋白基因提高酿酒酵母抑制物的抗性 | 第20-51页 |
| 2.1 引言 | 第20-21页 |
| 2.2 材料 | 第21-24页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第21-22页 |
| 2.2.2 引物 | 第22页 |
| 2.2.3 试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.4 培养基 | 第23页 |
| 2.2.5 主要实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-31页 |
| 2.3.1 酵母基因组的提取 | 第24页 |
| 2.3.2 E.coli质粒提取方法 | 第24-25页 |
| 2.3.3 E.coli DH5α感受态细胞制备与转化 | 第25-26页 |
| 2.3.4 空载对照载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.3.5 膜转运蛋白基因过表达载体的构建 | 第27-29页 |
| 2.3.6 酿酒酵母的转化 | 第29-30页 |
| 2.3.7 抑制物胁迫条件下细胞生长情况和发酵性能考察 | 第30-31页 |
| 2.3.8 转运蛋白基因表达量分析 | 第31页 |
| 2.3.9 分析方法 | 第31页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第31-50页 |
| 2.4.1 空载对照载体的构建 | 第31-33页 |
| 2.4.2 膜转运蛋白基因过表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 2.4.3 S.cerevisiae 280/959的转化及重组菌的鉴定 | 第36页 |
| 2.4.4 抑制物胁迫条件下细胞生长情况的考察 | 第36-42页 |
| 2.4.5 抑制物胁迫条件下发酵性能的考察 | 第42-48页 |
| 2.4.6 S.cerevisiae 959中转运蛋白基因表达量分析 | 第48-50页 |
| 2.5 小结 | 第50-51页 |
| 3 定向驯化提高酿酒酵母的纤维素水解液抑制物抗性 | 第51-65页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 实验材料 | 第51-52页 |
| 3.2.1 菌株 | 第51页 |
| 3.2.2 主要化学试剂 | 第51页 |
| 3.2.3 培养基 | 第51-52页 |
| 3.2.4 主要实验仪器 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-53页 |
| 3.3.1 定向驯化 | 第52页 |
| 3.3.2 抑制物胁迫条件下细胞生长情况和发酵性能考察 | 第52-53页 |
| 3.3.3 分析方法 | 第53页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第53-64页 |
| 3.4.1 S.cerevisiae 959的定向驯化 | 第53-54页 |
| 3.4.2 抑制物胁迫条件下细胞生长情况的考察 | 第54-57页 |
| 3.4.3 抑制物胁迫条件下发酵性能的考察 | 第57-64页 |
| 3.5 小结 | 第64-65页 |
| 4 定向驯化提高马克斯克鲁维酵母的木糖利用速率和纤维素水解液抑制物抗性 | 第65-87页 |
| 4.1 引言 | 第65页 |
| 4.2 实验材料 | 第65-66页 |
| 4.2.1 菌株 | 第65页 |
| 4.2.2 主要化学试剂 | 第65-66页 |
| 4.2.3 培养基 | 第66页 |
| 4.2.4 主要试验仪器 | 第66页 |
| 4.3 实验方法 | 第66-67页 |
| 4.3.1 定向驯化 | 第66页 |
| 4.3.2 抑制物胁迫条件下细胞生长情况和发酵性能考察 | 第66页 |
| 4.3.3 分析方法 | 第66-67页 |
| 4.3.4 酵母基因组的提取 | 第67页 |
| 4.3.5 驯化后代表菌株基因组重测序 | 第67页 |
| 4.4 结果与分析 | 第67-86页 |
| 4.4.1 马克斯克鲁维酵母的定向驯化 | 第67页 |
| 4.4.2 抑制物胁迫条件下细胞生长情况的考察 | 第67-71页 |
| 4.4.3 抑制物胁迫条件下发酵性能的考察 | 第71-82页 |
| 4.4.4 驯化后代表菌株K. marxianus 1727-5基因组重测序结果分析 | 第82-86页 |
| 4.5 小结 | 第86-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-95页 |
| 附录A PGK基因序列 | 第95-96页 |
| 附录B ADP1基因序列 | 第96-98页 |
| 附录C MDR1基因序列 | 第98-100页 |
| 附录D STE6基因序列 | 第100-103页 |
| 附录E TPO1基因序列 | 第103-104页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
